人脐血CD_(34)~ 细胞体外诱导树突状细胞及其功能的检测

目的　探讨人脐血CD 34 细胞体外诱导树突状细胞 (dendriticcells ,DCs)的可能性 ,并检测DCs的功能。方法　利用吸附单克隆抗体 磁珠分离系统 (MACS)获得脐血CD 34 细胞 ,体外以重组的人干细胞集落刺激因子 (hSCF)、人粒 巨噬细胞集落刺激因子 (hGM CSF)、人肿瘤坏死因子α(hTNF α)、人酪氨酸激酶受体家族III的配体 (hFL)诱生DCs。流式细胞仪检测DCs的表型 ,3H TdR掺入法检测DCs体外刺激同种异体T细胞增殖的功能 ,最后通过乳酸脱氢酶法检测DCs活化的T细胞对肿瘤细胞的杀伤性。结果　从人脐血分离到的CD 34 细胞 ,经hSCF、hGM CSF、hTNF α、hFL共同培养后 ,第 7天镜下即可见典型形态的DCs ,第 10天时明显增多 ,细胞表型检测见CD 1a 细胞的比例增加到 (2 8± 4) %(P <0 0 1) ,人类白细胞抗原DR(HLA DR)表达占 (94± 11) %。在三种不同的混和比例下 ,DCs均可刺激异源T细胞增殖 ,其中以DCs∶T细胞为 1∶5时增殖最明显。而且被激活的T细胞对三种不同组织来源的肿瘤细胞均产生了明显的杀伤性 (P <0 0 1)。结论　人脐血CD 34 细胞体外经细胞因子诱导培养 ,可生成大量具有典型功能的成熟DCs。     

小鼠Lewis肺癌移植瘤模型活体分子成像研究

目的建立能进行光学活体分子成像的lewis肺癌(LLC)移植瘤模型，探讨其在观察研究肿瘤的生长、转移、肿瘤血管生成及治疗效果等方面的价值。方法利用pLEIN-CMV-GFP逆转录病毒载体将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)报告基因转入小鼠Lewis肺癌(LLC)肿瘤细胞，体外稳定高效表达后，种植于小鼠双侧腹股沟，在不同时间利用光学活体成像仪成像，观察并用病理学证实。结果所有动物均成功制成荷GFP基因LLC移植瘤模型，GFP基因稳定高效表达，可见随肿瘤生长，绿色荧光团块增大。结论该模型稳定可靠，能够使我们利用光学分子成像的方法，实时、无创、连续地观察肿瘤生长，为研究肿瘤提供了新的思路和方法。     

白细胞介素-2基因导入肿瘤浸润淋巴细胞获得成功(简报)

1990年9月美国 NCI 批准了 Rosenbeng等应用导入 TNF 基因的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)治疗晚期黑色素瘤病人的研究方案,宣告了恶性肿瘤基因治疗的开始。这一疗法为将具有治疗作用的因子定向导入肿瘤局部有效地杀伤肿瘤提供了有前途的新的途径。基于应用淋巴因子激活的淋巴细胞(LAK)     

hB7-1重组腺病毒感染的肿瘤细胞的生物学特性

目的 在完成hB7-1 cDNA克隆并成功构建包含hB7-1基因的重组腺病毒rAdexl-B7－1的基础上,对经rAdexl-B7－1感染的B16细胞的体外生物学特性进行了研究。方法 以FACS、电镜等方法观察病毒感染前后B16细胞的变化。结果 ①重组腺病毒经KEK293细胞扩增、CsCl纯化后滴度可达10^10ＰＦＵ／ml,且２０ＭＯＩ的病毒可使９５％以上的Ｂ１６细胞被感染。②细胞动力学研究显示,rAdexl-B7-1对Ｂ１６的生长及集落形成能力无影响。③ＦＡＣＳ结果表明,rAdexl-B7-1细胞的增殖周期无影响。④扫描电镜及透射电镜结果表明,经rAdexl-B7-1感染的Ｂ１６细胞在表面形态及超微结构上出现变化。结论 重组腺病毒rAdexl-B7-1对Ｂ１６细胞的生长动力学无影响,对形态学有轻微影响。     

HL—60细胞凋亡小体体外负载树突状细胞的实验研究

目的：证实树突状细胞(Dendrmc cells,DCs)可通过吞噬凋亡小体获取抗原物质,探讨其在肿瘤免疫治疗中的意义。方法：利用吸附单克隆抗体-磁珠分离系统(MACS),从人脐血中分离出CD34^ 细胞,体外以重组hGM—CSF hSCF hTNF—α hFL诱导培养DCs,光镜观察诱生细胞的形态,流式细胞术(FACS)检测其表型。电镜观察和流式细胞仪检测三氧化二砷(As2O3)诱导凋亡的HL-60细胞,将凋亡的HL-60细胞与培养早期的DCs共育4～8h,电镜观察DCs吞噬凋亡小体的现象。结果：CD34^ 细胞经诱生后生成了大量具有典型形态和表型的成熟DCs;电镜下见凋亡的HL-60细胞内凋亡小体形成,流式细胞仪检测DNA含量,见亚二倍体峰形成。凋亡细胞与DCs共育后,电镜下见DCs吞噬凋亡小体的现象。结论：DCs可通过吞噬凋亡小体摄取抗原物质。     

人白细胞介素18和新城疫病毒HN基因嵌合表达载体的构建与表达

目的：构建人白细胞介素18（IL-18）与新城疫病毒（NDV）HN基因嵌合表达质粒。 方法：选用适当的限制性核酸内切酶将NDV的HN基因连接至真核表达质粒pVAX1 IL-18中IL-18基因的尾部,同时替换掉IL-18基因的终止子,构建表达IL-18 HN 嵌合基因的pVAX1 IL-18 HN质粒,经酶切鉴定正确后,通过脂质体介导转染HeLa细胞,应用Western blotting及血凝试验检测其表达情况。 结果：酶切鉴定证实正确地构建了pVAX1 IL-18 HN嵌合表达质粒,Western blotting和血凝试验检测结果表明,嵌合后的IL-18和HN基因均能够表达,且表达的HN蛋白具有较高的血凝活性。 结论：IL-18和HN基因嵌合后不影响二者的表达,而且表达的HN蛋白具有血凝活性。     

科学、医学与未来基因组学向改进医疗保健的转化

本文要点 至今,大多数常见病的遗传学基础仍然难以捉摸 如今,全基因组关联分析已揭示了人类DNA中有成千上万个区域,这些区域中的基因序列变异影响机体对常见病的易感性 常见的与疾病相关的单核苷酸多态性分布在多重的染色体区域里,     

补气化湿汤联合微创手术治疗结直肠癌82例

目的探讨自拟补气化湿汤联合微创手术治疗结直肠癌的临床疗效。方法回顾分析2008年1月至2011年5月施行82例中药联合微创手术及86例常规手术患者的临床资料,统计分析两组患者的一般资料、手术情况、病理结果及生存期等数据。结果中药联合微创手术组的生存率优于常规手术组,结果有显著差异。结论中药联合微创手术能有效治疗结直肠癌,远期疗效优于常规手术。     

足叶乙甙和某些辅助药物联合应用对人肺腺癌细胞的作用

目前,临床对肺腺癌的治疗正积极地寻找能提高治愈率,降低病死率行之有效的治疗方案。以往常用阿霉素治疗,但此药靠进口且价格昂贵。再者该药对患者的心脏具有急、慢性毒性作用,这样使其应用受到一定限制。Vp—16是新型抗代谢类抗癌药,主要用于白血病和小细胞肺癌治疗近年也有用Vp—16治疗晚期肺癌的报告,但各家方案不尽相同,有人主张单用Vp—16,有人主张联合维生素C或激素类药物,众说纷坛。为了证明Vp—16在治疗肺腺癌的效果及其同维生素C,地塞米松,IFN联合应用的结果,我们选用高、低转移类型     

转基因细胞SPC-A-1/IL-2的致突变性研究 *

目的：观察转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的致突变作用,为转基因肿瘤细胞作为瘤苗进行临床应用的安全性检测提供依据。方法：在人ＩＬ－２的ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ重组并完成ＰＡ３１７／ｐＬＩＬ－２ＳＮ包装体系的基础上,将ＩＬ－２基因导入人肺腺癌胸膜转移细胞系ＳＰＣ－Ａ－１中并得到ＩＬ－２基因的稳定表达,然后通过遗传毒理学实验技术对转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的ＤＮＡ及培养上清液进行体内和体外的致突变性实验研究。结果：转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２的ＤＮＡ及培养上清液均未显出致突变作用。结论：转基因细胞ＳＰＣ－Ａ－１／ＩＬ－２作为瘤苗应用可初步视为是安全可靠的。