大鼠嗅球嗅鞘细胞的体外分离培养及纯化

背景：差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的应用较多,细胞换液过程中使用含血清的培养基主要针对成纤维细胞的去除,而对神经元的去除作用不明显。 目的：根据神经元体外培养需要血清的特性,拟利用无血清培养基在体外建立一种分离培养嗅鞘细胞的简单方法。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-06/2009-01在哈尔滨医科大学动物实验中心完成。 材料：成年SD大鼠10只,由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。 方法：在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上,剪开大鼠颅骨,显露位于颅腔前方的嗅球,取出2只嗅球,在显微镜下去除嗅球表面的软脑膜和毛细血管及外周组织,保留富含嗅鞘细胞的嗅神经层和嗅球颗粒层,剪成1 mm3小块分离获取单细胞悬浮液,调整细胞密度至1×107 L-1,接种在用poly-l-lysine包被的培养瓶或培养板中,于37 ℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养,第3天用无血清DMEM/F12培养基换液培养。 主要观察指标：嗅鞘细胞的形态学观察、生长曲线分析、免疫荧光染色结果。 结果：培养前3 d细胞数目无明显增加,甚至减少;然后细胞数目逐渐增多,13 d细胞基本长满;传10代后细胞形态发生明显变化,胞浆内出现许多空泡,细胞增殖速度减慢或停止。纯化培养10 d后,培养板内双极和三极细胞均呈GFAP,NGFR p75阳性。 结论：在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上,利用无血清DMEM/F12培养基进行换液培养可使嗅鞘细胞迅速增殖,是一种效率较高的体外培养方法。     

脑胶质瘤诊疗方略

脑胶质瘤在临床上被称为恶性脑肿瘤，约占脑肿瘤的40％。每当患者及家属听到”恶性”二字时，往往非常恐惧，寝食难安，对正常的工作生活产生很大影响。其实脑胶质瘤大部分是可以治疗的，且疗效令人满意，特别是近年来随着科技的发展，脑胶质瘤的综合治疗越来越受到临床医师的瞩目。手术、温热治疗、放疗、化疗等组合治疗，使脑胶质瘤患者的生存率大大提高，死亡率明显下降。     

中医治疗周围性面瘫

周围性面瘫是我科临床常见病、多发病,针灸配合中药是治疗本病的方法之一,临床中已被广泛推广及应用,取得了很好的效果,王恩龙教授根据多年临床经验及面瘫的病因又将其分为发展期、静止期、恢复期,下面笔者将从面瘫的病因病机、面瘫的分型及针灸和中药等方面介绍王老师对周围性面瘫的分期治疗。     

大鼠脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性的改变及转移生长因子β_1的表达

目的　探讨大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障 (BBB)通透性的改变以及转移生长因子 β1(TGF β1 )在脑组织中的表达。方法　采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,通过测定脑组织中伊文氏蓝 (EB)含量及免疫组化法来观察TGF β1 的表达。结果　缺血 2h再灌注 3h ,BBB通透性开始增加 ,2 4h达高峰 ,72h后明显减弱。同时 ,TGF β1 在缺血再灌注 3h开始表达 ,2 4h达高峰 ,持续至 72h ,72h后逐渐减弱。结论　脑缺血后BBB的破坏与TGF β1 的表达密切相关 ,提示TGF β1 参与了BBB内皮细胞破坏的修复过程     

术后早期炎性肠梗阻的临床特点及保守治疗

目的探讨术后早期炎性肠梗阻的临床特点及治疗原则。方法回顾性分析17例术后早期炎性肠梗阻的临床特点及治疗结果。结果保守治疗14例，平均治愈时间21d，手术治疗2例，1例术后再次发生炎性肠梗阻。结论术后早期炎性肠梗阻一般不发生肠绞窄，宜采用保守治疗。     

局部注射骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤:运动功能有改善吗?

背景:目前研究多为骨髓间充质干细胞的体外培养及细胞移植对颅内疾病的治疗,对植入细胞在损伤脊髓中的成活、分化、迁移、结构重建等了解有限.目的:探讨局部骨髓间充质干细胞移植在脊髓损伤修复中的作用和骨髓间充质干细胞替代治疗的可行性.方法:成年健康雌性SD大鼠随机分为细胞移植组和对照组,建立SD大鼠脊髓横断损伤模型,伤后即刻分别向损伤区局部移植大鼠骨髓间充质干细胞悬液或无钙镁磷酸缓冲液.在术前和术后1 d,1周,2周,3周,4周和8周进行BBB评分,观测大鼠的运动功能,并于移植后1周免疫组织化学染色法观察BrdU标记的骨髓间充质干细胞在脊髓损伤处的存活情况,移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测.结果与结论:移植后第1～8周细胞移植组BBB评分均高于对照组;术后1周免疫组织化学染色结果显示在细胞移植组大鼠脊髓远端检测到BrdU阳性细胞,术后4周脊髓损伤处发现有神经纤维.证实通过损伤后立即局部注射的方式将骨髓间充质干细胞移植进大鼠脊髓损伤区,细胞可在损伤区存活;存活的骨髓间充质干细胞可分化为神经元,在损伤局部形成神经元通路,从而促进脊髓神经纤维传导功能的恢复,并促进高位脊髓损伤后大鼠后肢运动功能恢复.     

微粉化反式肉桂酸的反溶剂重结晶法制备与表征

目的以乙醇做溶剂,超纯水作为反溶剂,HPMC作为表面活性剂制备反式肉桂酸(TCA)微粉,通过单因素分析法,对TCA微粉颗粒大小和形貌的主要影响因子(沉积时间、药物质量浓度、溶剂与反溶剂比、表面活性剂用量、搅拌强度)进行考察。方法分别利用透射电镜(TEM)、激光粒度分析方法、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、质谱分析(LC-MS)、X射线衍射(XRD)、差示扫描(DSC)、溶出度对所得TCA微粉进行了表征。结果获得的TCA纳米粒为球形,平均粒径为130 nm;纳米化后的TCA质量分数由99.0%提高至99.8%,溶出速率是原药的1.67倍。结论采用反溶剂重结晶法制备TCA超微粉,能够提高TCA在水中的溶解度和分散性,为进一步的制剂开发提供基础。     

经眉弓锁孔入路治疗颅内病变(附290例分析)

目的总结经眉弓锁孔入路治疗颅内病变的手术经验。方法回顾性分析近10年来收治的290例颅内病变的手术经验。病变位于鞍区279例,颅前窝9例,第三脑室2例。均行经眉弓锁孔入路病变切除术。结果病变全切除214例(73.8%),次全切除76例(26.2%)。206例术前视力障碍病人中,术后1周内视力有所改善158例(76.7%)。术后出现暂时性尿崩24例(8.3%);脑脊液鼻漏5例(1.7%),经保守治疗后恢复。107例功能性腺瘤病人中,术后1周内分泌恢复正常水平56例(52.3%),其余均有不同程度的下降。1例无功能垂体腺瘤病人术后第5天死于心肌梗死。对180例病人术后随访1年,复发15例。结论经眉弓锁孔手术是一种安全、有效的微创手术,值得进行深入研究和广泛应用。     

温热疗法对人胶质瘤细胞的治疗效果观察

目的 研究温热疗法对人胶质瘤细胞的治疗效果。方法 将人胶质瘤细胞NP2、U251、T98G肿瘤细胞分别以37℃(对照组)，42℃、43℃、44℃(治疗组)加温2h，小同时间点用WST-1assay方法洲定细胞生存率，分析杀肿瘤细胞效果。结果 43℃、44℃加温1h以上时，均取得了显的杀肿瘤细胞效果。结论 为温热疗法作为脑胶质瘤新的临床治疗方法提供了实验依据。     

疤痕切除及分离粘连治疗开颅后引起癫痫的病例分析

本组对21例因各种开颅手术后发生的癫痫采取手术方法治疗。全组病例病程4～11年，均为癫痫大发作类型，发作频率从每日数次到每日1～2次不等。脑电图检查21例均有局灶性异痫样放电．多为棘、尖波或棘慢波．并且癫性灶区和上次手术区相一致。我们认为发生癫痫的原因与手术后疤痕形成和疤痕与硬膜粘连有关．而以疤痕与硬膜粘连为主．所“必须彻底切除疤痕，同时彻底分离疤痕与硬膜粘连．才能得以治愈。