重症急性胰腺炎并发肺损伤促/抗炎症因子的变化及大黄附子汤的干预研究

目的观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎并肺损伤（SAP-ALI）时血清促/抗炎症因子的影响。方法健康长白猪,体重25～30kg,13头,随机分成三组：对照组（n=4）、重症急性胰腺炎肺损伤组（模型组,n=4）、大黄附子汤治疗组（治疗组,n=5）。其中模型组采用主胰管内逆行注入4%牛磺胆酸钠（1ml/kg）诱导SAP-ALI模型。三组均于术后即刻、术后6h、12h、24h、48h、72h取血,ELISA法动态检测血清中促炎因子（TNF-α和IL-1β）、抗炎因子（IL-4）浓度变化,同时动态比浊法测定血清内毒素（LPS）含量。术后72h处死动物,计算肺组织湿/干重比,观察胰腺与肺病理形态学变化。结果模型组6～72h血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度及肺病理组织学评分均较对照组明显升高（P〈0.05）,IL-4浓度在术后24h开始较对照组逐渐升高（P〈0.05）。治疗组各时间点血清淀粉酶、内毒素、TNF-α、IL-1β浓度均较模型组明显下降（P〈0.05）,但血清IL-4浓度于术后12h出现明显升高,48h达到峰值。结论促炎因子（TNF-α、IL-1β）、抗炎因子（IL-4）及内毒素等共同参与了SAP-ALI的发病过程。大黄附子汤通过降低血清LPS水平,进而下调血清TNF-α及IL-1β表达,上调IL-4表达,减轻SAP-ALI的程度。     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜上皮细胞及线粒体结构和功能的影响

目的探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜上皮细胞(IEC)结构的保护作用及IEC线粒体功能的影响。 方法本研究为随机对照试验,将60只健康雄性SD大鼠(体重250～300 g),采用随机数字表法将大鼠分为对照组、重症急性胰腺炎组(SAP组)和大黄附子汤治疗组(大黄附子汤组),每组20只。每组再按建模后时间(6、12、24、48 h)分为4个亚组,每个亚组5只。SAP组和大黄附子汤组采用5%牛磺胆酸钠(0.1 mL/100g)胰胆管注射法诱导SAP模型,对照组开腹翻动胰腺数次后关腹。大黄附子汤组大鼠分别于术后0、15、30、45 h以大黄附子汤灌肠(10 mL/kg),对照组和SAP组在同时间点给予同体积0.9%氯化钠溶液灌肠。各组按各时间点处死动物,左侧股静脉取血测定血清淀粉酶和内毒素变化。采用分光光度计、荧光定量法检测IEC线粒体ATP合成酶、细胞色素C氧化酶(CcO)含量变化,光镜观察小肠上皮组织的形态学变化。 结果与SAP组相比,大黄附子汤可降低SAP后24 h、48 h的血清淀粉酶水平[24 h：(769.14±456.99) vs (1 399.85±623.40)U/L,P<0.01;48 h：(889.59±209.82) vs(1 562.00±316.19)U/L,P<0.001)。与SAP组相比,大黄附子汤组大鼠血清内毒素在建模后24 h、48 h均有不同程度下降[24 h：(108.78±22.16) vs(168.77±29.25)pg/mL,P<0.01;48 h：(242.90±45.12) vs(124.01±321.45)pg/mL,P<0.001]。与对照组相比,SAP后IEC线粒体ATP合成酶和CcO活性均降低且随病程推移呈递减趋势;经大黄附子汤治疗后IEC线粒体ATP合成酶活性高于同时相点的SAP组[12 h：(19.60±1.67)vs(13.60±2.88)nmol·min^－1·mg^－1 pro,P<0.05;24 h：(17.40±2.79) vs(11.2±2.78) nmol·min^－1·mg^－1 pro,P<0.05;48 h：(18.60±2.07) vs (11.2±1.92)nmol·min^－1·mg^－1 pro,P<0.01],且24 h、48 h线粒体CcO活性高于同时相点SAP组[24 h：(1.56±0.11)vs(1.06 ±0.18)μmol·min^－1·mg^－1;48 h：(1.04±0.31) vs(0.50±0.16)μmol·min^－1·mg^－1,P均<0.01]。SAP后12 h小肠上皮损伤指数开始升高(2.2±0.84 vs 0.60±0.55,P<0.01),且24、48 h持续性升高;大黄附子汤组可显著降低SAP后48 h小肠上皮损伤指数(1.2±0.45 vs 4.0±1.0,P<0.001)。 结论大黄附子汤能通过增强大鼠IEC线粒体ATP合成酶和CcO活性,改善IEC线粒体能量代谢和呼吸功能,保护SAP后肠屏障的完整性和功能,降低血清淀粉酶和内毒素含量,缓解SAP病情。     

带旋股外侧血管升支的臀中肌支大转子骨瓣转移治疗股骨头缺血性坏死

目的　为治疗股骨头缺血性坏死提供一种新的显微外科治疗方法。方法　在解剖学研究的基础上 ,设计旋股外侧血管升支的臀中肌支大转子骨瓣转移治疗股骨头缺血性坏死。结果　临床应用 1 7例 ,经过 1 5～ 3 5年 ,平均 2 6年随诊 ,疗效满意。结论　该方法损伤小 ,简便易行 ,可以为股骨头提供丰富的血运及诱导成骨因素 ,是一种治疗股骨头缺血性坏死的有效方法。     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺组织Toll样受体4／核转录因子-κB的影响

目的 探讨大黄附子汤治疗重症急性胰腺炎-急性肺损伤(SAP-ALI)的作用机制.方法 将128只SD大鼠随机分为假手术组、SAP-ALI组、大黄附子汤组和血必净组,每组再按处死时间点分为术后3、6、12、24 h 4个亚组,每个亚组8只.假手术组开腹后翻动胰腺数次,行空肠造瘘;SAP-ALI组采用胰胆管逆行注入牛磺胆酸钠1 ml/kg制模,行空肠造瘘;大黄附子汤组和血必净组于制模后0.5 h经空肠造瘘管分别注入大黄附子汤或血必净注射液2 ml,其他两组注入等量生理盐水.各组在处死大鼠前从心脏取血,用全自动生化仪检测血清淀粉酶水平,动态比浊法测定血清内毒素含量.处死大鼠后取肺脏,观察肺组织病理学变化、计算肺损伤评分和湿/干重(W/D)比值;用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测肺Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-KB p65(NF-KB p65)的表达.结果 SAP-ALI组各时间点血清淀粉酶、内毒素,肺损伤评分及W/D比值较假手术组均明显升高(P均<0.05);大黄附子汤组各指标均显著下降(P均<0.05).Western blotting结果显示,SAP-ALI组TLR4、NF-KB p65表达于术后3 h开始较假手术组升高,12 h达高峰(P均<0.05);大黄附子汤组TLR4于术后3 h、NF-κB p65于术后6 h表达较SAP-ALI组显著降低,12 h达峰值(P均<0.05).结论 TLR4/NF-κB信号转导通路在SAP-ALI早期炎症级联反应中发挥了重要作用;大黄附子汤通过降低血清内毒素水平、降低肺组织TLR4的活化、抑制下游NF-κB p65转导路径,从而减轻SAP-ALI的进程.     

腹腔复苏对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨腹腔复苏对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用。方法健康雄性SD大鼠40只,随机分成假手术组(Ⅰ组)、失血性休克组(Ⅱ组)、静脉复苏组(Ⅲ组)、PD-2液腹腔复苏加静脉复苏组(Ⅳ组)。Ⅰ组依次行右颈总动脉、右股静脉、左股动脉插管及全身肝素化;Ⅱ组在Ⅰ组基础上制备失血性休克大鼠模型;Ⅲ组在Ⅱ组基础上于造模后经右股静脉补入放出的血量及2倍量林格氏液进行静脉复苏;Ⅳ组在Ⅲ组基础上同时腹腔内注入30 mL2.5%PD-2液。各组分别于T0、T1、T2进行PaO2/FiO2值血气分析;T2时测定肺组织W/D比值,TNF-α、IL-1β、IL-10的含量,观察肺组织病理学结果。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组PaO2/FiO2值明显降低,Ⅲ组于T0、T2时下降明显,Ⅳ组T0时下降明显;与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组肺组织TNF-α、IL-1β、IL-10的含量和W/D比值均升高(P<0.01),与Ⅱ组比较,Ⅲ组和Ⅳ组降低,Ⅳ组肺组织IL-10含量升高(P<0.05或P<0.01)。与Ⅳ组比较Ⅲ组肺组织IL-10含量降低;肺组织病理学比较,Ⅱ组较Ⅰ组有明显损伤,Ⅳ组病理损伤最轻。结论 PD-2液腹腔复苏能够减轻失血性休克大鼠肺组织损害的程度,降低炎症反应,对肺损伤具有保护作用。     

大黄附子汤对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺泡上皮屏障功能的影响

目的 探讨大黄附子汤对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺上皮屏障功能的影响及意义.方法 96只SD大鼠随机分为假手术组、重症急性胰腺炎肺损伤组(SAP-ALI组)及大黄附子汤组三组,每组32只.各组再按3,6,12,24 h时间点分为四个亚组,每个亚组各8只.假手术组开腹后行空肠造瘘,翻动胰腺数次后关腹;SAP-ALI组在假手术组基础上经胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠(1mL/kg),建立重症急性胰腺炎急性肺损伤模型;大黄附子汤组在SAP-ALI组基础上经空肠造瘘管注入大黄附子汤10 mL.各组按时间点分别于伤后3,6,12,24 h测定肺泡上皮通透性(AEP)、肺泡内液体清除率(ALCR)、总肺水量(TLW)和肺血管外肺水量(EVLW),同时测定血浆内毒素(ET)、血清淀粉酶含量,光镜下观察肺脏病理组织学变化.结果 与假手术组比较,SAP-ALI组大鼠术后3,6,12,24 h ALCR显著降低,TLW,EVLW及AEP呈明显升高趋势(P＜0.05或P＜0.01).与SAP-ALI组比较,大黄附子汤组对大鼠术后3,6,12,24 h ALCR均显著升高,TLW,EVLW及AEP呈明显降低趋势(P＜0.05或P＜0.01),且肺组织的水肿、出血、炎症程度及肺损伤学评分和肺湿/干重比均明显好转.结论 重症急性胰腺炎并急性肺损伤大鼠存在严重的肺泡上皮屏障功能障碍;大黄附子汤通过抑制内毒素过度释放,可降低炎症反应,改善肺泡上皮功能障碍,减轻肺损伤程度.

Abstract：

Objective To investigate effect of Dahuang Fuzi decoction on alveolaur epithelial barrier in rats with lung injury with severe acute pancreatitis. Method Ninty-six health SD rats were randomly divided into three groups: sham operation group, SAP-ALI group, Dahuang Fuzi decoction group, and then according to the time point of sacrifice after operation, each group was subdivided into 3,6,12,24 hour subsets ( each, n = 8). After the belly of a rat in the sham operation group was cut open, the pancreas was flipped several times,and then a stoma was made in the jejunum to form its fistula. In the SAP-ALl group,1 mL/kg sodium taurocholate was reversely injected into the pancreatobile duct to establish the model of SAP, and then the jejimum fistula was performed. The SAP-ALI model in Dahuang Fuzi decoction group was treated by injection of 10ml of Dahuang Fuzi decoctionon into the fistula respectively. Blood was collected from heart to detect serum amvlase and endotoxin (ET) levels before the rat being executed. The lung histopathologic changes, pulmonary injury scores and wet/dry weight(W/D) ratios were observed after the rats were executed. The alveolar liquid clearance rate(ALCR), total lung water content (TLW), extravascular lung water content(EVLW) and alveolar epithelial permeability (AEP) were examined in 3,6, 12,24 h after injury.Results There was continuous increase of AEP,TLW and EVLW,as well as progressive reduction of ALCR compared with sham operation group at 3,6,12,24 h after operation. Compared with SAP-ALI group, there was continuous decrease of AEP,TLW and EVLW, and elevated of ALCR at 3,6,12,24 h after operation.Conclusions Dahuang Fuzi decoction can significantly reduce alveolaur epithelial barrier and degree of lung tissue of SAP-ALI rats by inhibiting the elevation of LPS and inflammation reaction.     

左房黏液瘤脱落致腹主动脉栓塞并发急性肾功能不全一例

患者,男,29岁,以"突发下肢无力伴尿少11 h"入院.患者11 h前劳动后突发下肢无力,左下肢疼痛,伴胸闷、尿少,就诊于当地医院行腹部血管彩超示腹主动脉栓塞,后来院行CTA检查可见腹主动脉血栓形成,双侧肾动脉平面以上堵塞(图1).患者既往近3年偶有阵发性心悸,未在意.入院体格检查T 36.8℃,P 86次/min,R 26次/min,BP 130/75 mmHg,神志清楚,心肺未见明显异常,腹软,腹部压痛明显,无反跳痛及肌紧张,左下肢皮肤暗紫,右下肢皮肤苍白,皮温凉,双下肢动脉均未触及搏动.     

急诊医学教学中两种教学方法实施效果的比较研究

目的 比较以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)结合智能化计算机模拟教学与传统的以授课为基础学习(lecture-based learning,LBL)两种教学方法在急诊医学教学中的应用效果.方法 以大连大学医学院2006级五年制临床医学专业1班和2班49名学生为研究对象,1班25名学生为对照组,2班24名学生为实验组.两组学生在年龄、性别、基础文化程度、专业知识掌握等方面差异无统计学意义.针对心肺脑复苏章节的急诊教学,对照组采用LBL教学方法;实验组采用PBL结合智能化计算机模拟教学方法.教学结束后,采用问卷调查、理论及操作技能考核等主客观评价方法共同评价教学效果.结果 与对照组学生比较,实验组学生在教学中能够主动提出问题,积极参与讨论,发言踊跃,课堂气氛活跃.调查结果显示,学生对PBL结合智能化计算机模拟教学方法满意度高于LBL教学方法.比较两组学生的考试成绩,无论是理论测试还是操作技能考核,实验组学生的成绩均明显优于对照组学生(P<0.05).结论 PBL结合智能化计算机模拟教学比LBL教学更能够增加学生学习的兴趣,加深学生对知识的理解和记忆,增进团体协作精神,并且能够更好地培养学生急诊医学思维和解决临床问题的能力,显著提高了急诊医学的教学效果.

Abstract：

Objective To evaluate the application effects of problem-based leaning (PBL) combined with intelligent simulation teaching and lecture-based learning (LBL) in course of cardio-pulmonary-cerebral resuscitation of emergency medicine. Methods Using 49 undergraduate students of grade 2006, five-year clinical medicine in Medical School of Dalian University as the object of research, and class 1 (n=25) for control group, class 2(n=24) for experimental group. The students of control group were taught by traditional LBL teaching method, and experimental group were taught by PBL combined with intelligent computer simulations teaching method. The teaching effect was evaluated by using the results of questionnaire survey and theory examination skills and operating skills together. Results Compared with controls group, the students of experimental group were able to question actively and participate in discussions, spoken enthusiastically, and active atmosphere. The results of students' questionnaires showed that satisfaction of students for PBL combined with intelligent simulation teaching method were better than LBL teaching method. Test scores, either in theory or skills assessment test experimental results are better than control group (P<0.05). Conclusions Compared with traditional LBL teaching method, PBL combined with intelligent simulation teaching method can increase students' interest in learning, deepen understanding and memory of the knowledge, enhance team spirit and bring up ability to emergency medicine clinical thinking and solving practical problems, and improve the teaching effect of emergency medicine greatly.     

大黄附子汤对急性坏死性胰腺炎大鼠小肠黏膜屏障功能的保护作用

目的 探讨大黄附子汤对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠小肠黏膜屏障功能的影响及意义.方法 将60只SD大鼠按数字表法随机分为假手术组(19只)、ANP组(21只)和大黄附子汤治疗组(20只).经胰胆管逆行注入4%牛磺且酸钠1 ml/kg体重建立ANP模型,同时行空肠造瘘.治疗组于制模后0.5 h经空肠造瘘管注入大黄附子汤2 ml,隔4、8 h再注入2 ml;其他两组注入等容积生理盐水.术后24 h经腹主动脉取血,测定血淀粉酶、内毒素、D-乳酸含量及二胺氧化酶(DAO)活性.取胰腺、小肠组织行病理学检查,测定肠上皮损伤指数,观察小肠黏膜超微结构改变.结果 假手术组大鼠血淀粉酶、内毒素、D-乳酸含量及DAO活性分别为(152±32)U/L、(6.95±2.10)pg/L、(3.96±1.08)μg/ml和(14.26±2.67)μg/ml,ANP组分别为(1549±93)U/L、(40.48±3.41)pg/L、(12.34±1.23)μg/ml和(80.28±3.54)μg/ml,治疗组分别为(655±49)U/L、(19.55±2.50)pg/L、(6.75±1.36)μg/ml和(20.69±7.53)μg/ml,ANP组较假手术组明显升高,而治疗组较ANP组显著降低,但仍高于假手术组(P＜0.05或＜0.01).ANP组小肠黏膜厚度、绒毛高度分别为(389.44±29.87)μm、(16.52±3.73)μm,显著低于治疗组的(501.95±45.38)μm、(27.82±5.17)μm,更显著低于假手术组的(658.72±57.49)μm和(35.49±6.43)μm;而肠上皮损伤指数为3.72±0.65,显著高于治疗组的2.12±0.37和假手术组的0.85±0.24.同时,大黄附子汤治疗后小肠黏膜组织学和超微结构改变亦均较ANP组明显减轻.结论 大黄附子汤可明显减轻ANP大鼠小肠黏膜屏障功能损害的程度.     

大黄附子汤改善重症急性胰腺炎大鼠肠道动力障碍的机制研究

目的:通过观察大黄附子汤对重症急性胰腺炎(Severe acute pancreatitis, SAP)致肠道动力障碍大鼠血清胃动素、回肠Cajal间质细胞及胃动素受体的影响,探讨大黄附子汤改善肠道动力障碍的作用及机制。方法:清洁级雄性Sprague-Dawley大鼠,18只,随机（随机数字法）分为对照组、SAP组及大黄附子汤治疗组（n=6）。采用逆行胰胆管注射4％牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。对照组开腹后,找到胰腺轻微翻动数次后关腹;SAP组在造模后12、24 h分别给予2 mL生理盐水（37℃）灌肠;治疗组在造模后12、24 h分别给予2 mL大黄附子汤（37℃）灌肠。于造模48 h后,各组大鼠取腹主动脉血,测定血清内毒素及淀粉酶含量,使用酶联免疫吸附法测定血清胃动素水平;取胰腺、回肠组织行苏木精伊红染色观察病理变化;采用免疫组织化学法检测回肠平滑肌组织中Cajal间质细胞(interstitial cells of cajal, ICC)表达蛋白c-kit及胃动素受体(Motilin receptor, MTL-R)蛋白的表达。结果:与对照组相比,SAP组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著增高[(504.98±88.81) pg/mL vs. (17.76±5.01) pg/mL; (532.28±66.53) U/L vs. (69.45±3.61) U/L,均 P<0.05],而血清胃动素水平显著降低[(195.4±6.7) ng/L vs. (301±8.10) ng/L, P<0.05],ICC表达蛋白c-kit及MTL-R免疫组织化学评分降低( P<0.05);与SAP组相比,大黄附子汤治疗组大鼠血清内毒素、淀粉酶水平均显著降低[(189.9±38.23) pg/mL vs. (504.98±88.81) pg/mL; (294.23±25.66) U/L vs. (532.28±66.53) U/L,均 P<0.05],而血清胃动素水平显著升高[(264.2±8.3) ng/L vs. (195.4±6.7) ng/L, P<0.05],同时c-kit及MTL-R免疫组织化学评分升高( P<0.05)。 结论:大黄附子汤通过促进胃动素的分泌、提高ICC细胞的活性及MTL-R的表达而改善SAP大鼠肠道动力障碍。