楤木皂苷A在大鼠体内的组织分布研究

楤木皂苷A为太白楤木中的主要活性成分之一。该文通过建立SD大鼠主要脏器中楤木皂苷A的LC-MS/MS分析方法,同时口服灌胃楤木皂苷A 50 mg·kg~(-1),测定大鼠主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑)中的楤木皂苷A含量,探讨体内的组织分布特征。结果显示楤木皂苷A在SD大鼠主要脏器中的方法学考察符合要求,口服灌胃楤木皂苷A 50 mg·kg~(-1),在心、肝、脾、肺、肾、脑组织均有分布且在1 h或2 h时达到最大值。在给药后不同时间点楤木皂苷A的组织分布情况不同:给药20min各组织含量:肝心脾肺肾脑;给药1 h各组织含量:肝脾肾肺心脑;给药2 h各组织含量:肝肾心脾肺脑;给药4 h各组织含量:肾肝脾心肺脑;给药8 h各组织含量:脾心肝肾肺脑。提示楤木皂苷A主要分布于肝组织,这也与太白楤木常用于治疗肝脏疾病具有一定的相关性。另外,楤木皂苷A在脑组织中虽含量低但有明显分布,提示药物可能会透过血脑屏障,也为楤木皂苷A在脑组织的研究提供了依据。     

湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能及骨代谢的影响

目的观察湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢功能及骨代谢的影响。方法将48只成年雌性大鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组及湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组每天给予灌胃雷公藤多苷片(75 mg/kg),连续14 d,复制卵巢早衰模型。第15天起,戊酸雌二醇组给予灌胃戊酸雌二醇(1 mg/kg);湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组分别给予灌胃湖北海棠总黄酮(160、80、40 mg/kg),每日1次,连续给药21 d。观察各组大鼠:动情周期;卵巢指数、子宫指数;血清中雌激素(E2)、孕激素(P)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平变化;卵巢、子宫形态学变化;血清碱性磷酸酶(ALP)、骨碱性磷酸酶(BALP)活性、1,25(OH)_2D_3含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,检测卵巢组织中ERα的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢指数、子宫指数降低,血清中E2、P水平降低,FSH水平升高(P0. 05,P0. 01)。与模型组比较,戊酸雌二醇组和湖北海棠总黄酮治疗组血清生殖激素水平得到明显改善(P0. 05),卵巢内生长卵泡数量增多,子宫内膜增厚,血清中ALP活力、BALP含量降低,1,25(OH)_2D_3含量升高(P0. 05,P0. 01);血清中SOD活力增强,MDA含量降低;卵巢组织中颗粒细胞、基质细胞ERα的表达增强。结论湖北海棠总黄酮对卵巢早衰大鼠卵巢及骨质疏松具有一定的治疗保护作用,其作用机制可能与体内抗氧化能力、增强颗粒细胞内雌激素受体的表达密切相关。     

湖北海棠总黄酮对两种急性肝损伤小鼠模型的实验研究

目的研究湖北海棠总黄酮对小鼠急性化学性肝损伤和急性酒精性肝损伤的保护作用。方法将昆明小鼠120只随机分组,复制两种不同肝损伤模型,每种动物模型分为6组:空白对照组、模型组、阳性对照组(联苯双酯125mg·kg~(-1))、湖北海棠总黄酮高、中、低剂量组(1. 68、0. 84、0. 42g·kg~(-1)),每组10只,雌雄分开饲养,灌胃给药。急性化学性肝损伤模型小鼠,空白对照组、模型组灌胃等体积的生理盐水,阳性组给予联苯双酯,治疗组灌胃不同剂量湖北海棠总黄酮,连续7天,末次给药2h后,腹腔注射按0. 1mL·10 g~(-1),0. 1%的CCl_4橄榄油溶液。急性酒精性肝损伤模型小鼠,除空白对照组外,其余各组每日上午给予56°北京二锅头(10mg·kg~(-1))灌胃,下午给予湖北海棠总黄酮干预治疗,连续7天。所有实验组小鼠在末次给药后8h后取材,检测肝脏指数,血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量,HE染色治疗肝组织病理改变。结果在两种急性肝损伤模型中,与模型组比较,湖北海棠总黄酮不同剂量组均能够降肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平(P 0. 01),改善小鼠肝脏病理损伤。结论湖北海棠总黄酮对CCL4致急性肝损伤和酒精致急性肝损伤小鼠均具有明显的肝脏保护作用。     

单细胞凝胶电泳试验条件的优化与筛选

单细胞凝胶电泳实验是检测真核细胞DNA损伤程度的实验技术,由于其需要样品量较少,能在单个细胞水平检测DNA的损伤和修复,因此具有适用范围广、操作简便等特点,而被实验室广泛应用。本文对单细胞凝胶电泳实验操作中影响实验结果的因素进行分析、探讨及改良,期待其发挥更重要的作用。     

抗粘连口服液对腹腔粘连家兔胶原含量和TGF-β1表达的影响

目的:探讨中药抗粘连口服液对家兔腹腔粘连的影响。方法:30只新西兰家兔随机分为模型组、复方丹参注射液组、抗粘连口服液组分别进行腹腔药物注射。实验结束后取粘连组织做HE、Masson染色及TGF-β1免疫组化,并运用图像分析系统进行半定量分析。结果:抗粘连口服液可以显著改善腹腔粘连组织病理结构,减少胶原纤维的沉积,下调TGF-β1的表达。结论:抗粘连口服液能预防家兔腹腔粘连的形成。     

川芎嗪对肝纤维化大鼠Fas和FasL表达的影响

目的观察川芎嗪对肝纤维化大鼠Fas和FasL表达的影响。方法将36只SD大鼠随机分为正常组、模型组、川芎嗪组，采用CCl4制备肝纤维化模型，用免疫组化法观察川芎嗪对Fas和FasL表达的影响。结果川芎嗪可降低肝纤维化大鼠Fas和FasL的表达，川芎嗪组与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论川芎嗪可有效防治大鼠肝纤维化，其作用机制可能是通过下调Fas、FasL蛋白的表达，抑制肝细胞的凋亡实现的。     

太白楤木总皂苷对小鼠急性酒精性肝损伤的干预作用

目的 探讨太白楤木总皂苷对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及其机制。方法 将健康昆明小鼠60只随机分为空白组（生理盐水）、模型组（生理盐水）、阳性对照组（联苯双酯,125mg/kg）、太白楤木总皂苷高、中、低剂量组（400、200、100mg/kg）,每组10只,雌雄分开饲养,灌胃给药。除空白组外,其余各组每日上午给予56°北京二锅头（10mg/kg）灌胃,下午给予干预治疗,连续7天。末次给药8h后,检测小鼠肝脏指数,血清及肝组织中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量,肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量,HE染色观察肝组织病理改变。结果 与模型组比较,太白楤木总皂苷不同浓度治疗组均能够降低酒精性肝损伤小鼠血清及肝组织中ALT、AST水平（P<0.01）,升高肝组织SOD活性（P<0.01）,降低MDA含量（P<0.05）;肝组织HE染色显示,太白楤木总皂苷可明显减轻小鼠肝损伤的病变程度。结论 太白楤木总皂苷对急性酒精性肝损伤小鼠具有一定的保护作用,其作用机制可能与对抗自由基生成,抑制氧化应激来实现抑制抗氧化应激有关。     

太白楤木总皂苷诱导人白血病K562细胞凋亡的研究

目的 探讨太白楤木总皂苷对人白血病K562细胞增殖的抑制作用及其作用机制.方法 MTT法检测不同浓度的太白楤木总皂苷处理后K562细胞的增殖抑制率,倒置显微镜下观察细胞形态学变化,荧光显微镜下观察细胞核的变化,免疫组化法检测NF-κB、Casp3蛋白的表达.结果 太白楤木总皂苷对K562细胞的增殖有抑制作用,呈时间和剂量效应;倒置显微镜及荧光显微镜观察显示K562细胞随太白楤木总皂苷作用浓度增加发生形态学改变,出现凋亡小体;免疫组化法检测显示太白楤木总皂苷可以抑制NF-κB的表达,升高Caspase-3.结论 太白楤木总皂苷对K562细胞增殖有显著的抑制作用,并促进K562细胞凋亡,可能与下调NF-κB的表达和上调Caspase-3表达相关.     

太白楤木总皂苷对K562细胞增殖抑制及其作用机制的研究

目的 以人慢性髓系白血病细胞株K562细胞为模型,研究太白楤木的体外抗肿瘤活性及其作用机制.方法 MTT法检测太白楤木总皂苷对K562细胞的增殖抑制作用;单细胞凝胶电泳检测K562细胞DNA损伤;流式细胞术检测K562细胞细胞周期的改变.结果 太白楤木总皂苷对K562细胞增殖具有抑制作用,并呈时间-剂量依赖性;能显著诱导K562细胞DNA损伤;促进凋亡的发生;细胞周期阻滞于S期.结论 太白楤木总皂苷能抑制K562细胞的增殖,诱导凋亡发生,其机制可能与通过诱导K562细胞DNA损伤来改变细胞周期时相的分布有关.     

促红细胞生成素对压力超负荷大鼠心肌NADPH氧化酶表达的影响

 目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对压力超负荷大鼠心肌NADPH氧化酶的影响。方法:36只SD雄性大鼠,腹主动脉结扎复制压力超负荷心肌肥大模型。动物随机分成3组：模型组;假手术组： 除不缩窄腹主动脉外,其余操作同腹主动脉缩窄组;重组人促红细胞生成素（rhEPO）治疗组（EPO治疗组）：术后给予rhEPO,腹腔注射4 000 U/kg,每周2次。8周后采用心动超声和血流动力学评价心功能; Masson染色观察心肌纤维化程度;实时定量PCR法和Western blotting法检测NADPH氧化酶2（Nox2）和Nox4 mRNA及蛋白表达的变化;Western blotting法观察心肌炎症因子CD45、F4/80和转化生长因子β（TGF-β）的表达变化。结果:与模型组比较,EPO治疗组左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）、左室收缩末压（LVESP）及左室内压最大上升和下降速率（±dp/dtmax）明显升高( P<0.01),左室收缩末内径（LVESD）、舒张末内径（LVEDD）及左室舒张末压（LVEDP）下降(P<0.01);同时,EPO可降低压力超负荷所致的心肌纤维化程度 (P<0.01),降低心室肌中 Nox2、Nox4 mRNA和蛋白的表达 (P<0.05 或 P<0.01)及心肌炎症因子CD45、F4/80、TGF-β蛋白的表达。结论: EPO可抑制压力超负荷所致大鼠的心肌纤维化,改善心功能,其机制可能与降低NADPH氧化酶活性,抑制心肌氧化应激水平,减少心肌炎症反应有关。