浅析现代临床医学公共卫生教育发展与实践

随着我国经济的发展,人们健康水平进一步提升,然而全球化背景下公共卫生安全等非传统安全问题却凸显出来,成为新的安全威胁.这无疑对公共卫生从业者提出了更高的要求.目前,我国公共卫生人才培养还存在能力和结构方面的短板,因此导致社会岗位胜任力不足.而这一问题的根本在于课程设置和教学方法不符合时代快速发展的要求,在教学方法上相比...     

HIV-1慢性感染者CD8+Tscm异常免疫活化对T细胞耗竭的影响

目的 探讨HIV-1慢性感染者CD8+干细胞样记忆性T细胞(stem memoryT cell,Tscm)免疫活化水平的变化特点及其活化对CD8+T细胞功能耗竭的影响.方法 选取24例未经治疗的HIV-1慢性期感染者和41名健康对照者,采用流式细胞术分别检测健康对照者和HIV-1感染者CD8+Tscm的比例、CD8+Tscm的免疫活化水平、CD8+T细胞表面抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT、TIM-3和LAG-3)表达水平及CD8+T细胞功能(分泌细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的能力);分析CD8+Tscm的免疫活化水平与CD8+T细胞抑制性分子表达及CD8+T细胞功能的相关性.结果 与健康对照者相比,HIV-1慢性期感染者CD8+ Tscm的比例显著下降,CD8+ Tscm免疫活化水平(CD38+HLA-DR+CD8+ Tscm比例)显著升高.HIV-1慢性期感染者CD8+ Tscm免疫活化水平与CD8+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关.HIV-1慢性感染引起CD8+T细胞抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT和LAG-3)上调,但活化的CD8+Tscm仅与CD8+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平呈正相关.CD8+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平与CD8+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关.结论 HIV-1慢性感染引起CD8+Tscm的异常免疫活化,活化的CD8+ Tscm通过上调CD8+T细胞抑制性分子TIGIT抑制CD8+T细胞功能.     

干血斑样本用于HIV抗体检测方法学优化与应用

目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒(HIV)抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值(24)与低值(26)的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒(酶联免疫吸附试验法),对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时间分别进行组合后,进行干血斑(DBS)样本洗脱液中抗体OD值测定分析,从而选出最适宜、最方便用于HIV抗体检测的DBS洗脱条件。结果室温与4℃条件下洗脱样本差异无统计学意义(P=0.979,P=0.704);不同洗脱液体积对样本洗脱的影响差异无统计学意义(P=0.183);洗脱液组分对低值(26)样本的洗脱效果有统计学意义(P=0.033),其中以含0.5‰Tween20的PBS对样本洗脱的影响更为显著(P=0.02,P=0.004);洗脱时间对中值(24)与低值(26)样本均有显著影响(P=0.00,P=0.00),其中4小时和6小时为显著差异分界点。670份临床已知样本的检测应用中,试剂盒现成Cutoff值计算判定阳性样本时,存在2.63%的假阳性,无假阴性。结论用于DBS中HIV抗体最佳洗脱条件为:用300μL含有0.5‰Tween20的PBS在室温下(24±2℃)洗脱4~6小时。试剂盒Cutoff值不适用于DBS样本结果判定,需进一步研究设定用于该方法的Cutoff值。     

IFN-λs的信号通路及其功能研究进展

干扰素(interferon lambdas,IFN)是病毒感染等诱导产生,并具有抗病毒和抗肿瘤等作用的一种细胞因子.IFN与受体结合后可激活信号传导通路,发挥抗病毒和抗肿瘤作用.深入研究IFN的产生机制,抗病毒、抗肿瘤等作用将为其临床应用研究提供新思路.本文对近年来干扰素λ(IFN-λs)的信号通路及其功能研究进展综述如下.     

HIV-1早期感染者γδT细胞对储藏库细胞的细胞毒作用

目的探讨HIV-1早期感染者γδT细胞是否具有清除HIV-1储藏库的能力。方法入组HIV-1早期感染者16例,分离外周血单核细胞,体外采用唑来膦酸(5μmol/L)加IL-2(1 000 IU/m L)扩增γδT细胞。乳酸脱氢酶(LDH)法检测γδT细胞对储藏库细胞(J-Lat Full Length Clone10.6)的细胞毒作用;流式细胞计量术检测扩增前后γδT细胞的表型和储藏库细胞中GFP的荧光强度。结果唑来膦酸加IL-2在体外刺激γδT细胞快速且大量扩增(P0.001)。γδT细胞对储藏库细胞具有较强的细胞毒作用,储藏库细胞中GFP的平均荧光强度显著减弱(P0.05)。扩增后γδT细胞表现出细胞毒性NK细胞样表型,HIV-1感染者CD56+Vδ2T细胞的比例较健康对照显著增加(P0.05)。结论γδT细胞具有清除HIV-1储藏库的能力,基于γδT细胞的自体或异体过继免疫治疗有望成为清除储藏库,治愈HIV-1感染的一种新策略。     

抗HIV-1黏膜免疫作用及抗体保护机制的研究进展

AIDS是感染HIV而引发的疾病.HIV-1感染后导致免疫系统的严重损害,引起各种机会性感染和肿瘤的发生,最终导致死亡.据联合国艾滋病规划署估计,截至2016年底,全球HIV感染者约有3 670万人(3 080万～4 290万)[1].经阴道及经直肠黏膜的性传播途径是艾滋病的主要传播途径.黏膜免疫通过诱导黏膜和局部淋巴结产生免疫应答,包括分泌型IgA抗体的产生,在阻止HIV-1的感染过程中起着举足轻重的作用,现对其作用机制的研究进展综述如下.     

总HIV-1 DNA定量检测技术的建立

目的建立一种基于实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法的1型艾滋病病毒(HIV-1)总脱氧核糖核酸(DNA)定量检测技术。方法构建了同时包含HIV靶基因和内参基因的质粒标准品,设计了涵盖我国主要HIV流行亚型的特异性引物和Taqman水解探针,对引物亚型覆盖面、灵敏度、特异性等相关指标进行了分析,进行了批内和批间重复试验。结果该检测方法所设计的HIV特异性引物和探针序列高度保守,成功检测12种常见及稀有HIV亚型;扩增灵敏度可达4个拷贝/PCR反应管,特异度100%;加入了细胞定量体系,做到了在同一个PCR反应管中既定量了HIV DNA,又定量了细胞数;批内和批间差异性的变异系数均在20%以内。结论该检测方法可用于HIV储藏库检测,评估联合抗病毒治疗的效果,可以用于"窗口期"HIV感染的辅助诊断以及HIV阳性母亲的新生儿HIV感染的诊断。     

滤泡调节性T细胞与HIV感染疾病进展关系的研究

目的　探索滤泡调节性T细胞（follicular regulatory T cell, TFR）与HIV感染疾病进展的关系。方法　以2015—2019年于首都医科大学附属北京佑安医院门诊就诊及随访的47例HIV感染者（包括未治疗HIV感染者，抗病毒治疗免疫重建成功和免疫重建失败患者）及9例健康体检者作为研究对象。将CD3+CD4+CXCR5+Foxp3+的细胞定义为TFR，分析HIV感染者TFR数量与CD4+ T细胞计数及病毒载量的关系，并对比分析不同疾病阶段患者TFR数量的差异。结果　TFR数量与CD4+ T细胞计数呈正相关（r=0.567，P=0.002），与HIV载量呈负相关（r=-0.394，P=0.042）；HIV感染者的TFR数量明显低于健康体检者，免疫重建成功的患者TFR数量明显高于免疫重建失败的患者。结论　随着HIV感染疾病的进展，TFR数量逐渐降低。     

基于CD4~+T淋巴细胞计数标准的抗病毒治疗三十年的探索

"何时开始抗反转录病毒治疗(ART)"一直是一个国际指南不断探索的问题。在ART问世后的三十年里,这一研究经历了漫长的探索,并先后制定了不同的开始标准。2012-2015年,国际指南建议对所有HIV感染的成年人即时诊断即时治疗,不管其CD4~+T淋巴细胞(简称CD4细胞)计数是多少。这一倡议面临着许多挑战,从"CD4细胞为500个/mm3开始治疗"转变到"每个人都治疗",这不仅需要更多的检测和药物,还意味着需要更多的人去支持病人并帮助他们维持治疗,尤其是在低资源且发病严重的地区。因此,如何响应这一指南建议,在全球范围内实现普遍自愿测试和即时治疗,是今后一段时期内非常关键的问题。     

HIV感染基因治疗新思路

获得性免疫缺陷综合征,即AIDS是由HIV感染引起的一种严重危害人类健康的全球性传染病。目前随着抗病毒疗法的应用,HIV复制得到有效阻断,AIDS成为一种慢性可控的疾病,但该治疗方式无法彻底清除HIV,因此AIDS无法得到根治。随着对HIV感染机制研究的不断深入以及基因治疗技术的迅猛发展,诸如RNA沉默、DNA编辑等基因疗法为根治AIDS提供一种新的思路,上述这些新技术具有抑制或彻底清除宿主体内HIV的可能,且可以避免传统治疗手段带来的不良反应。本研究就这些相关基因治疗在应对HIV感染方面的最新研究进展加以总结和探讨。