三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡分子机制的研究进展

三氧化二砷（As2O3）俗称砒霜，是传统中药毒药，中国古代曾用来治疗牛皮癣、梅毒、风湿病及一些恶性肿瘤，但由于毒性较大。限制了它的广泛应用。自20世纪70年代初，哈尔滨医科大学第一附属医院使用砷剂（As2O3）治疗急性早幼粒白血病（APL）获得满意疗效，且未出现严重不良反应，使人们重新重视As2O3的抗恶性肿瘤作用，拉开了世界范围内的大量相关系列研究。众多的研究表明，     

抗菌肽Melectin对急性败血症患者铜绿假单胞菌临床分离株的体外抗菌活性分析

目的 研究Melectin对急性败血症临床分离株铜绿假单胞菌(PA)的体外抗菌活性.方法 随机收集安徽理工大学第一附属医院急性败血症临床PA分离株,其中铜绿假单胞菌的多重耐药菌(Extreme-drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDRPA)10株,非耐药铜绿假单胞菌(Non-E...     

腹泻患者细菌分离及药敏480例分析

目的了解本地区腹泻患者的菌群分布及其药敏特征,指导临床治疗腹泻,合理使用抗菌素。方法采用常规粪便培养方法,对分离菌做生物化学鉴定、血清学分型和药物敏感试验。结果480例腹泻患者粪便培养,检出的细菌中,致病菌占69%,其中肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）占检出菌19.6%（包括O126：K71、O164：K？、O152：K？、O28ac：K73）,伤寒沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌分别为9株和4株,志贺氏菌占29%,条件致病菌占31%,真菌为10株。同时对检出菌做药敏试验：头孢唑啉、头孢哌酮、阿米卡星、诺氟沙星、环丙沙星的敏感率均在75%以上。结论感染性腹泻的病原体以致病菌为主,条件致病菌有上升趋势,治疗腹泻抗生素应以药敏结果为指导。     

人载脂蛋白M野生型和突变型表达载体的构建及鉴定

目的: 构建人载脂蛋白M (APoM)野生型和突变型原核表达载体PGEX-KG-APoM及真核表达载体PcDNA3.1(+)-APoM。方法: Trizol法抽提HePG2细胞总RNA,RT-PCR扩增APoM全长基因,将基因片断重组到PMD18-T质粒中构建PMD18-T-APoM重组质粒载体,转化到大肠埃希菌JM109后筛选阳性克隆,提取质粒酶切和测序鉴定。采用Sited-directedMutagenesis定点诱变试剂盒对APoM基因进行体外定点诱变,DNA测序鉴定定点诱变成功与否。用双酶切方法分别将APoM野生型和突变型基因定向连接到原核表达载体PGEX-KG和真核表达载体PcDNA3.1(+)中,构建野生型和突变型PGEX-KGAPoM重组体和PcDNA3.1(+)-APoM重组体,分别转化到大肠埃希菌DH5α内,提取质粒酶切鉴定和测序鉴定。结果: 成功克隆了APoM并构建了野生型和突变型原核表达载体和真核表达载体。结论: 通过RT-PCR,定点诱变及基因重组技术成功构建野生型和突变型重组表达质粒PGEX-KG-APoM和PcDNA3.1(+)-APoM,为进一步研究APoM的功能奠定了基础。     

肝细胞癌中载脂蛋白M,肝受体同系物1和肝细胞核因子1α表达的相关性分析

目的：探讨肝细胞癌（HCC）组织和癌旁组织中载脂蛋白M（apoM）、肝受体同系物1（LRH-1）和肝细胞核因子1α（HNF-1α）的表达并分析3者之间的相关性。方法：采用RT-PCR和免疫组化分别检测17例原发性肝细胞癌和相应癌旁组织中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA的表达及apoM和HNF-1α蛋白的表达。结果：apoM、LRH-1和HNF-1αmRNA及apoM和HNF-1α蛋白在癌组织中的表达均明显高于癌旁组织（P均〈0.01）。LRH-1、HNF-1αmRNA和apoMmRNA表达均呈正相关关系（依次为r=0.463,P〈0.01;r=0.356,P〈0.05）。结论：肝细胞癌中apoM的表达和LRH-1及HNF-1α表达密切相关,LRH-1和HNF-1α可能是apoM表达的重要调节因子。     

基于PDTX模型研究原发性肺癌顺铂耐药与ERCC1IGFBP5 表达水平的关系*

目的:构建PDTX（patient-derived tumor xenografts）肺癌模型,探索ERCC1、IGFBP 5 的表达水平与原发性肺癌顺铂耐药的关系。方法:取新鲜切除的84例肺癌组织移植于裸鼠（BALB/c）的皮下,构建PDTX 模型,分析一代成瘤率与临床病理参数关系。三代移植瘤接受顺铂化疗,采用免疫组织化学方法检测敏感组和耐药组ERCC1、IGFBP 5 的表达情况。结果:移植瘤一代成瘤率32.14%（27/ 84）,二代成瘤率88.89%（24/ 27）,三代成瘤率95.83%（23/ 24）,能否一代成瘤与肿瘤的大小、分化、分级、病理类型相关;此模型移植瘤在传代中能够保持亲代肿瘤的结构特征。ERCC1 在耐药组表达高于敏感组,而IGFBP 5 在耐药组表达低于敏感组。结论:构建了肺癌组织块移植瘤模型,其能够保持亲代癌种的结构特征,是研究肺癌发生和探索肿瘤耐药机制的理想模型。原发性肺癌顺铂耐药性与ERCC1、IGFBP 5 的表达水平相关。      

幽门螺杆菌基因多态性及其致病机制研究进展

幽门螺杆菌是一种全球范围内的慢性感染性致病菌,除导致慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等胃肠疾病外,还与慢性心血管疾病,肝脏及胆道疾病密切相关.研究表明,其基因结构多态性差异是导致不同临床表现的主要原因,近年来对Hp毒力因子及其基因多态性研究取得长足进展,本文对其主要的毒力基因多态性及可能的致病机制进行综述.     

干扰肝细胞核因子-1α对HepG2细胞载脂蛋白M及胆固醇相关代谢酶表达的影响

目的 检测肝细胞癌和癌旁组织中肝细胞核因子(HNF)-1α、肝受体同系物(LRH)-1与载脂蛋白(apo)M表达的相关性,探讨HNF-1α对apoM、apoA-Ⅰ和胆固醇合成与转化关键酶表达的影响.方法 RT-PCR检测人肝细胞癌组织和癌旁组织中HNF-1α、LRH-1、apoM的表达水平.采用小干扰RNA(SiRNA)在人肝癌细胞株HepG2细胞中干扰HNF-1 α表达后,RT-PCR检测apoM、apoA-Ⅰ及羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、胆固醇7 α-羟化酶1(CYP7A1)、法尼醇X受体(FXR)、小异源二聚体伴侣(SHP)-1的变化情况;Western blot检测apoM在蛋白水平的变化情况.对不同数据进行单因素方差分析、配对t检验或直线相关分析.结果 HNF-1 α、LRH-1、apoM mRNA在人肝细胞癌组织中明显高于癌旁组织(t值分别为-7.075,-8.803,-7.167,P值均＜0.01);HNF-1α和LRH-1与apoM的mRNA表达水平呈正相关(r=0.353,P＜0.01;r=0.523,P＜0.01).干扰HNF-1α后,与阴性对照相比,apoM、FXR、SHP-1 mRNA水平分别下降47.4%(F=77.627,P＜0.01)、47.9%(F=76.363,P＜0.01)、65.2%(F=365.772,P＜0.01),apoM蛋白水平下调54.3%(F=43.482,P＜0.01);HMGCR、CYP7A1 mRNA水平分别升高101.1%(F=218.666,P＜0.01)、138.5%(F=171.926,P＜0.01);而对apoA-Ⅰ无明显影响(F=0.170,P＞0.05).结论 HNF-1 α可提高apoM的表达水平,并通过促进胆固醇代谢关键酶的表达和抑制胆固醇代谢相关抑制因子的生成而促进胆固醇的转化,对心血管疾病具有保护作用.

Abstract：

Objective To determine wether there were connections among hepatocyte nuclear factor1 alfa (HNF-1α),liver receptor homolog-1 (LRH-1),apolipoprotein M (apoM) and to investigate the effects of HNF-1 αt in HepG2 on the expressions of apoM,apolipoprotein A-Ⅰ (apoA-Ⅰ) and the key enzymes in cholesterol metabolism and biotransformation.Methods The mRNA expressions of apoM,LRH- 1 and HNF- 1 α were detected by RT-PCR.HNF- 1 α was interfered and RT-PCR was used to detect the changes of apo M,apo A-Ⅰ,Cyp7Al,farnesoid X receptor (FXR) and small heterodimer partner-1 (SHP-1).Western blot was used to detect the change of apo M protein.Results The expressions of apoM,LRH-1 and HNF-1αmRNA were obviously higher in HCC tissue than that in para-cancer tissue (the vaule of tis -7.167,-7.075,-8.803,P ＜0.01 respectively).HNF-1 α and LRH-1 positively correlated with the expression of apoM (r = 0.353,P ＜0.01;r = 0.523,P ＜ 0.01 respectively);RT-PCR and western blot results showed that the expressions of apoM,FXR and SHP-1 mRNA,could be obviously suppressed by HNF-1 α interfering as compared to the negative controls by 47.4%,47.9%and 65.2% (P ＜ 0.01) respectively,and the expression of apoM protein also decreased by 54.3% (F = 43.482,P ＜ 0.01).The expressions of HMGCR and CYP7A mRNA increased by 101.1% and 138.5% (P ＜ 0.01) respectively as compared to the negative control.But there is no effect on expression of apoA-Ⅰ mRNA (F = 0.170,P ＞ 0.05).Conclusions HNF-1 α could promote cholesterol biotransformation by increasing the expression of apoM and the key enzymes in cholesterol metabolism and decreasing inhibiting factor.So HNF-1 α provided protection against cardiovascular disease.     

细胞色素P450 1A1基因多态性与宫颈癌的相关性

 目的 探讨细胞色素P450 1A1(cytochrome P4501A1,CYP 1A1)基因MspⅠ酶切位点多态性及Ile/Val多态性与宫颈癌遗传易感性的关系。方法 采用聚合酶链式反应限制性片段长度多态性分析(PCR restriction fragment length plogymorphism,PCR RFLP)和等位基因特异性PCR(allele specific PCR,as PCR)检测宫颈癌患者(病例组,n=176)和同期体检女性健康人群(对照组,n=112)CYP 1A1基因MspⅠ酶切位点多态性和Ile/Val多态性。结果 比较病例组和对照组CYP 1A1基因MspⅠ酶切位点基因型及等位基因T和C频率分布,差异无统计学意义(P=0.09);比较两组间CYP 1A1 Ile/Val多态性发现,病例组3种基因型Ile/Ile、Ile/Val、Val/Val频率分布分别为19.3%、68.8%、11.9%,等位基因Ile、Val频率分布分别为53.7%、46.3%,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.04)。结论 细胞色素CYP 1A1基因MspⅠ位点多态性与宫颈癌发病易感性无关联性,CYP 1A1基因Ile/Val多态性与宫颈癌发病易感性有关联性。