抗辐射生物药物的研究进展

核能与核技术的应用给人类带来巨大便利的同时,也大大增加了人们遭受辐射损伤的潜在性风险。抗辐射药物可减少电离辐射损伤引起的发病率和死亡率,长期以来人们致力于抗辐射药物的研究与开发,关于低毒性和保护效果好的辐射防护剂研究倍受关注,并且筛选出了一批具有良好抗辐射作用的候选药物。其中,生物制品类抗辐射药物作为急性辐射综合征预防或治疗药物展现了良好的应用前景,本文主要对近年来进展较快的生物制品类抗辐射药物的研究现状进行综述。     

兔血浆中纳曲酮LC-MS/MS分析方法的建立及其在纳曲酮-3-O-辛酸酯药动学研究中的应用

目的建立快速灵敏的液相色谱-串联质谱法,研究纳曲酮-3-O-辛酸酯在兔体内的药动学。方法纳曲酮辛酸酯进入体内后可快速水解为纳曲酮,因此纳曲酮-3-O-辛酸酯在兔体内的药动学参数可基于纳曲酮的血浆样品浓度检测而获得。血浆样品预处理采用甲基叔丁基醚液液萃取方法,以纳洛酮为内标。采用Agilent Zorbax SB-C18(100 mm×2.1 mm,3.5μm)型色谱柱,以甲醇/0.1%甲酸水溶液(50∶50,V/V)作为流动相,流速0.2 mL·min^-1;正离子多反应监测模式:纳曲酮(m/z 342.2→324.1),内标纳洛酮(m/z 328.1→310.2);选用12只新西兰大耳白兔,分别im给予等摩尔剂量的纳曲酮和纳曲酮-3-O-辛酸酯,于给药前及给药后不同时间点取血,所得的血药浓度数据采用非房室模型计算主要药动学参数。结果血浆内源性物质均不干扰样品峰,建立的LC-MS/MS体内分析测定方法的绝对回收率>76%,线性范围为0.5~100μg·L^-1(r²>0.999)。兔im给予纳曲酮1.0 mg·kg^-1后纳曲酮的主要药动学参数为:Tmax为(6.7±2.6)min,Cmax为(681±153)μg·L^-1,T_1/2为(40.0±7.5)min,AUC0-t为(25850±4642)μg·min·L^-1,MRTtn为(43.7±6.1)min。兔im给予等摩尔剂量的纳曲酮辛酸酯1.2 mg·kg^-1后,纳曲酮的主要药动学参数为:Tmax为(240.0±120.0)min,Cmax为(61.3±10.6)μg·L^-1,T_1/2为(295.7±133.0)min,AUC0-t为(30650±6775)μg·min·L^-1,MRTtn为(406.1±5.0)min。结论本研究建立的LC-MS/MS方法灵敏度高,适用于纳曲酮-3-O-辛酸酯的药动学研究。与im等摩尔剂量的纳曲酮相比,纳曲酮-3-O-辛酸酯的达峰时间和半衰期显著延长,达峰浓度显著降低。     

不同粒径石杉碱甲纳米粒的制备及其在小鼠体内分布特性研究

目的研究不同粒径石杉碱甲纳米粒在小鼠体内的分布情况。方法以聚乳酸-羟基乙酸（PLGA）为载体材料,采用乳化溶剂挥发法制备不同粒径的石杉碱甲纳米粒;采用小动物活体成像技术研究不同粒径纳米粒在小鼠体内的分布情况。结果制备了粒径从43．1nm到316nm的石杉碱甲纳米粒,载药量从0．11％到2．42％。不同粒径纳米粒在小鼠体内的动态分布研究表明,粒径为50nm左右的纳米粒可以分布于全身各个器官,并能透过血脑屏障,且能起到缓释的效果;粒径为100～300nm左右的纳米粒主要分布于肝脏,且较难透过血脑屏障。结论该研究为进一步开发高效、低毒的石杉碱甲新型制剂提供了重要参考。     

~(125)I-相思子毒素P_2在小鼠体内的血药浓度及其生物利用度

目的研究相思子毒素P2(abrinP2)在小鼠体内的血药浓度和生物利用度,为发展相思子毒素新型抗癌药打下基础。方法 ICR小鼠静脉(2.1μg.kg-1)和灌胃(87.5、43.8和21.9μg.kg-1)给予125I-相思子毒素P2(125I-abrinP2)。给药后不同时间内取血,分离血浆,用同位素示踪法检测血浆中的放射性;然后采用三氯乙酸(TCA)沉淀法检测沉淀中的放射性,PKS软件分析房室模型和计算各种参数,并根据灌胃和静脉给药的药-时曲线下面积(AUC0～∞)之比计算绝对生物利用度。结果相思子毒素P2在0.01～50μg.L-1浓度范围内线性关系良好,样品在血浆中的回收率大于85%,日内变异系数(RSD)小于5%。小鼠单次静脉注射2.1μg.kg-1相思子毒素P2的药代动力学参数分别为吸收半衰期(T12Ka)0.46h、消除半衰期(T21Ke)8.63h、药-时曲线下面积(AUC0～∞)为16.84μg.h.L-1;小鼠单次灌胃给予剂量分别为21.9、43.8、87.5μg.kg-1的125I-abrinP2后,吸收半衰期分别为1.26、1.15、0.55h;消除半衰期分别为46.21、46.21、46.19h,AUC0～∞分别为41.42、67.17、119.27μg.h.L-1。结论相思子毒素P2的血药浓度数据拟合为二室模型,在低、中给药剂量范围内符合线性动力学规律。低、中、高剂量灌胃给药的绝对生物利用度分别为24.6%、19.5%、16.7%。     

糖尿病动物模型的研究进展

建立理想的糖尿病模型对于深入研究糖尿病的病因、发病机理、治疗及预防至关重要。为此，国内外学者对糖尿病动物模型进行了大量的研究。     

含磷毒剂体外药效学评价方法建立

目的 含磷毒剂主要是通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)发生毒害作用,本文旨在建立一种在体外快速测定AChE 活性的方法,为有机磷毒剂中毒及解救时AChE活性检测奠定基础。方法 以动物全血红细胞作为AChE的来源,利用硫代乙酰胆碱与巯基显色剂DTNB反应形成黄色化合物的原理,用分光光度法在412 nm处比色定量测定AChE活性。首先利用还原型谷胱甘肽能提供巯基,其显色效应相当于硫代胆碱,故用谷胱甘肽进行DTNB法测定AChE活性标准曲线的绘制;其次进行了DTNB法测定全血样品AChE活性的方法学研究,主要包括对全血进行20, 40和60等不同倍数的稀释后测定AChE活性、使用兔、豚鼠、比格犬及猴等不同动物全血红细胞作为AChE的来源进行AChE活性的测定,同时对不同批次全血样品及同一批次血样不同时间的AChE活性进行测定,验证DTNB法测定AChE活性的方法的可行性;最后选择兔全血红细胞作为AChE的来源,对有机磷毒剂如沙林及梭曼进行了体外药效学评价,梭曼终浓度为6.25 nmol·L^-1～0.4 μmol·L^-1,沙林终浓度为6.25 nmol·L^-1～4 μmol·L^-1,以不同浓度沙林及梭曼的负对数对兔子全血AChE抑制百分率的对数作图,求出沙林及梭曼抑制动物全血AChE的量效曲线,计算得到其IC₅₀值和IC₉₀值。结果 以吸光度值（标准管吸光度值-零管吸光度值）为纵坐标,AChE活性为横坐标作图,即得谷胱甘肽标准曲线,标准曲线方程为Y=0.0029＋0.1218X,r＝0.9999,结果表明,该检测方法在AChE活性为0～10.8 mmol·L^-1的范围内保持线性。选取兔全血40倍稀释后作为AChE的来源进行实验,通过对不同动物批内及批间AChE活性进行测定并统计得出,批内差异为0.44%～0.67%,批间差异为1.03%～2.27%。表明该方法批内及批间差异较小,均不超过10%,可以进行有机磷类化合物的体外药效学评价。不同浓度沙林及梭曼对兔全血AChE活性抑制的量效关系表明其作用强度的顺序为：梭曼＞沙林,该实验结果与文献报道相符合。梭曼对兔全血AChE量效曲线图表明,其量效曲线方程为：Y= 372.69-45.53X,R=-0.9930;梭曼对兔全血AChE活性抑制的IC₅₀值和IC₉₀分别为83 nmol·L^-1和0.62 μmol·L^-1。沙林对兔全血AChE量效曲线图表明,其量效曲线方程为：Y= 284.45-3905X,R=-0.9679;沙林对兔全血AChE活性抑制的IC₅₀值和IC₉₀分别为1.2 μmol·L^-1和15 μmol·L^-1。结论 该方法能够快速测定不同动物全血红细胞AChE的活性,实验结果可靠,重现性好,可用于多种有机磷毒剂体外药效学评价。由于红细胞中AChE全部存在于细胞膜表面,因此,本测定方法不需将红细胞溶解就能够直接测定AChE活性,能够减少制备酶原的过程,适于快速完成体外AChE活性的分析测定。     

相思子蛋白P2小鼠灌胃给药后的组织分布

目的 相思子蛋白P₂（abrin P₂）是由豆科藤本植物相思（Abrus Precatorius）种子中分离纯化出的一种植物蛋白毒素,对于多数肿瘤具有显著的杀伤作用。但由于其为蛋白类毒素,易产生抗体,从而降低抗癌效果;且其自身具有较大的毒性,注射途径多次给药较难控制给药剂量。为了降低abrin P₂对机体的毒性和免疫原性,同时也为了避免注射给药产生的一些弊病,对abrin P₂灌胃给药后在小鼠体内的组织分布进行了研究。方法 本文采用同位素示踪法结合三氯乙酸沉淀法对abrin P₂在小鼠各组织匀浆中的回收率和稳定性进行了研究。并采用单次ig给予abrin P₂ 43.8和170.0 μg·kg^-1后,分别测定组织中abrin P₂及代谢物总含量（abrin P₂T）、TCA沉淀部分的abrin P₂含量（代表大部分原型药物,abrin P₂P）,为abrin P₂新型抗肿瘤药的研发及临床治疗提供参考依据。结果 abrin P₂在小鼠各组织匀浆中的回收率均大于80%,abrin P₂在肝、肾、骨骼肌中,于25℃和4℃放置6 h基本不变。小鼠分别ig给予abrin P₂ 43.8和170.0 μg·kg^-1后组织分布研究表明,小鼠灌胃给予43.8 μg·kg^-1时,abrin P₂T和abrin P₂P在各组织中的含量,除消化系统外,脾、肺、肾、子宫中相对较高,其他组织中含量相对较少,脑中最少。小鼠ig给予abrin P₂ 170.0 μg·kg^-1后,除消化系统外,abrin P₂T和abrin P₂P含量较多的组织分别为子宫、肾,心、肺、脾,其中abrin P₂T在心中含量较多,而abrin P₂P在肺中含量较多。总体来说,给药后1~3 h内,abrin P₂T的含量在多数组织中达到顶峰,之后迅速下降,18 h后下降平缓,大部分组织在72 h仍可检测到少量abrin P₂T的存在。在abrin P₂P中,大多数组织在1~3 h内abrin P₂P的含量达到顶峰,之后迅速下降,在9 h内逐渐平缓,24 h后,在大多数组织中已经检测不到abrin P₂P的存在。结论 abrin P₂分布的靶向组织可能是脾、子宫和肾。脑中abrin P₂P和abrin P₂T分布最少,表明,abrin P₂不易通过血脑屏障。小鼠ig给予abrin P₂P和abrin P₂T在各组织中不同时间段含量的差异表明,abrin P₂进入体内后,体内各种因素会导致其大量的分解。ig给予abrin P₂ 43.8和170 μg·kg^-1,在各组织中的分布不尽相同,提示,abrin P₂在治疗靶器官的肿瘤上可能会更加有效,在治疗不同器官肿瘤时,可选择不同的给药剂量。     

石杉碱甲聚乳酸-乙醇酸纳米粒的制备、表征及其小鼠活体成像脑靶向分布

目的 制备石杉碱甲（HupA）聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）纳米粒,并研究其分布特性.方法 以PLGA为载体材料,采用乳化溶剂挥发法,正交实验优化HupA-PLGA纳米粒的制备工艺;透射电子显微镜观察纳米粒形态;激光粒度仪测定平均粒径、粒径分布和Zeta电位;HPLC法测定纳米粒的包封率;并通过小动物活体荧光成像实验对纳米粒在小鼠体内的分布特性进行研究.结果 优化条件下制备的纳米粒呈圆形,大小较为均一,平均粒径为（46.49±1.37）nm,多分散指数值为0.31±0.01,Zeta电位为（-38.3±1.56）mV,包封率为（28.45±1.52）％,且工艺重现性好.小动物活体成像实验结果表明该纳米粒可以通过血脑屏障到达脑组织,且具有很好的缓释作用.结论 以PLGA为载体的HupA纳米粒具有较小的粒径、良好的缓释性能并能提高脑内药物浓度水平.     

基于膜电位检测原理的γ-氨基丁酸A型受体药物高通量筛选模型

目的 利用膜电位检测原理,构建一种靶向γ-氨基丁酸A型受体(GABAAR)的药物高通量筛选模型.方法 采用α1β2γ2L-GABAAR-CHO细胞株构建GABAAR药物高通量筛选方法;分别以工具化合物的50％激动效应浓度(EC50)和EC80浓度下的激活值(ASV)和Z′因子作为判定指标,对缓冲液反应体系、激动剂GAB...     

一朵大大的花儿

生了儿子后,我的身材一下子由苗条形转向了圆桶形,我也由一个自信的人转向了要为自己的外表形象操心的人.但没想到一次普通的乘车经历,让我重新认识了自己,也学习了一种值得称道的亲子教育方法.