己酮可可碱治疗重症酒精性肝炎疗效评价

目的评价己酮可可碱治疗重症酒精性肝炎的效果。方法64例重症酒精性肝炎患者随机分为治疗组（服用己酮可可碱）和对照组（服用安慰剂）,分别比较两组的GGT、AST、TBIL、PTA、MDF及总有效率。结果经过4周治疗,两组GGT、AST、TBIL、MDF均较治疗前显著下降,PTA较治疗前显著升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）,治疗组的变化幅度更大,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。总有效率治疗组81.8％,对照组58.1％,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论己酮可可碱治疗重症酒精性肝炎疗效确切。     

乙酰半胱氨酸治疗重症酒精性肝炎的疗效评价

目的 酒精性肝炎发病率逐年上升,乙酰半胱氨酸因其特殊的保肝特性,故本研究旨在探讨其治疗重症酒精性肝炎的疗效评价,为临床治疗提供依据。方法 将本院2008—2013年共58例重症酒精性肝炎患者按照随机数字表法分为治疗组(29例,给予乙酰半胱氨酸注射液8 g溶于10%葡萄糖注射液250 ml静脉滴注,1次/d)和对照组(29例,安慰剂为10%葡萄糖注射液250 ml静脉滴注,1次/d),分别比较2组的AST、TBIL、PTA、MDF及总有效率。结果 经过45 d的治疗,2组AST、TBIL、MDF均较治疗前显著下降,PTA较治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组AST、TBIL、MDF均显著低于对照组[依次为(41.64±16.67)比(61.62±17.48)U/L、(50.47±19.34)比(75.23±24.39)μmol/L、(31.26±12.47)比(44.13±11.48),P<0.05],PTA显著高于对照组[(74.24±21.48)比(60.46±18.03)%,P<0.05],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组总有效率(86.2%)高于对照组(55.2%),差异有统计学意义(χ2=6.740,P=0.009)。结论 在治疗重症酒精性肝炎方面,乙酰半胱氨酸可发挥较好的治疗效果,在临床治疗方面提供了有利的参考依据。     

HBVS-ecdCD40L融合基因构建及相应融合蛋白的二级结构预测

目的构建HBVS—ecdCD40L融合基因,并利用软件对其相应融合蛋白的二级结构进行预测。方法利用分子生物学技术将HBVS基因与人CD40L胞外段基因进行融合,构建融合基因及其真核表达载体,并利用蛋白质分析软件对相应融合蛋白二级结构水平的一些生物学特性进行预测。结果融合基因序列与设计一致,其相应氨基酸序列经软件分析,并与HBsAg和CD40L胞外段氨基酸序列分析结果比较,发现在二级结构上几乎无变化,亲水性和抗原性等生物学活性几乎未受影响。结论HBVS-ecdCD40L融合基因构建成功,软件分析表明融合过程未影响HBsAg和人CD40L胞外段的生物学活性,为进一步研究奠定基础。     

肝癌靶向性AGAP表达载体构建及生物信息学分析

目的：构建肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）特异性镇痛抗肿瘤肽（analgesic-antitumor peptide,AGAP）基因真核表达载体,利用计算机辅助分析和预测所表达蛋白质的理化和结构特征,为探索生物毒素靶向抗肝癌作用奠定基础。方法：提取东亚钳蝎总RNA,用RT-PCR法扩增出AGAP基因,与载体pGL3/AFP连接构建重组质粒,酶切及测序鉴定,并利用蛋白质分析软件对其表达的蛋白二级结构水平及一些生物学特性进行预测,并转染HepG2细胞检测其是否表达。结果：重组质粒所表达的目的多肽经软件分析,发现在二级结构上没有变化,亲水性、抗原性等生物学活性也未受影响,转染HepG2细胞后能成功表达。结论：人AFP基因顺式作用元件调控AGAP真核表达载体构建成功。     

镇痛抗肿瘤肽基因真核表达载体构建及其体外抗肝细胞癌作用

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)在我国的发病率及病死率均高.西医治疗肿瘤有起效快的优点,但往往有较大的副作用和局限性.我国传统中药中许多成分具有抗肿瘤作用,作为中药蝎毒成分之一的东亚钳蝎镇痛抗肿瘤肽(analgesic-antitumor peptide,AGAP)近来备受关注,将其与现代生物技术结合开发新的抗肿瘤药物具有很好的发展前景.本研究通过构建甲胎蛋白(AFP)启动子及增强子调控的AGAP真核表达载体,观察其对HCC的治疗作用,为蝎毒在肝癌基因治疗方面的价值提供实验依据.     

蓖麻毒蛋白A链与抗表皮生长因子受体单克隆抗体偶联物的抗肿瘤效应

目的：将蓖麻毒蛋白（ricin）A链（RTA）与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）mab偶联形成免疫毒素（immunotoxin,IT）,并评价该偶联物的体外抗肿瘤作用。方法：从蓖麻籽中提纯RTA,采用N-琥珀酰胺-3-（2-吡啶二硫）丙酸酯[N—succinimidyl-3-（2-pyridyldithio）-propionate,SPDP]为偶联剂制备IT EGFR mab-RTA,以SDS-PAGE检测RTA的提取及IT的偶联,以DAB显色法检测IT对人肝癌HepG2细胞的结合能力,以间接ELISA方法测定IT的免疫反应性,以CCK-8法测定IT的体外抗肿瘤作用。结果：RTA从蓖麻籽中提取后,与EGFRmab成功偶联。IT基本保留了EGFRmab对HepG2细胞的结合能力和免疫反应性,及对HepG2细胞和LO2细胞表现了不同的体外细胞毒作用。结论：EGFR mab—RTA具有特异性抑制肝癌细胞增殖的作用,有望成为新型的抗肝癌药物。     

HBeAg特异性细胞免疫反应体外抗乙肝病毒作用

目的探讨体外HBeAg特异性细胞免疫反应对乙型肝炎病毒(HBV)mRNA表达及蛋白合成的影响。方法自正常人外周血单核细胞中诱导培养树突状细胞(DC),经不同浓度的HBeAg负载后与自身T细胞共同培养,诱导产生HBeAg特异性T细胞,同时设与无HBeAg刺激的DC共同培养的T细胞、单纯T细胞为对照组,作用于HepG2.2.15细胞系,逆转录PCR(RT-PCR)检测HepG2.2.15细胞内乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝核心抗原(HBcAg)的mRNA水平,酶联免疫法(ELISA)检测细胞培养上清中HB-sAg和乙肝e抗原(HBeAg)水平。结果经HBeAg刺激激活的T细胞可以有效地抑制HBsAg、HBcAg mRNA的表达(P0.05)及HBsAg、HBeAg的合成(P0.05),且随着HBeAg刺激浓度的升高,对上述指标的抑制率逐渐上升。结论HBeAg特异性细胞免疫反应可显著抑制HBV mRNA和蛋白的表达,为开发HBeAg相关的治疗性疫苗奠定理论基础。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因多态性及单倍型与溃疡性结肠炎易感性相关性研究

[目的]探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Trail) (G1525A、C1595T)基因多态性及单倍型与溃疡性结肠炎(UC)易感性的关系.[方法]收集252例UC患者和775例正常对照者(HC),采用直接测序法检测Trail (G1525A、C1595T)等位基因及基因型,并做单倍型分析.[结果]与HC组相比,UC组Trail GI525A变异等位基因(A)和基因型(GA+AA)的频率明显减低(35.52％ VS 55.94％,P＜0.01；41.27％ VS 79.74％,P＜0.01) ;Trail C1595T变异基因型(CT+TT)的频率UC组亦明显降低(70.23％ VS 80.52％,P＜0.01).单倍型分析发现Trail (G1525A、C1595T)完全连锁(D’=0.979,r2=0.810).与HC组比较,GC、GT单倍型UC组明显增高(46.56％VS 36.77％,P＜0.01；13.36％ VS 7.54％,P＜0.01)；而AC、AT单倍型明显降低(0.64％ VS 10.22％,P＜0.01；39.44％ VS 45.47％,P＜0.01).[结论]Trail(G1525A、C1595T)基因多态性及单倍型与UC易感性相关,此2位点基因变异对UC可能具有保护作用.     

胃镜和结肠镜检查患者焦虑情绪及影响因素研究

目的评估将要行胃镜检查和结肠镜检查患者的焦虑程度及其影响因素。方法纳入118例计划接受镇静后行胃镜和结肠镜检查的患者。患者进入内镜室前发放贝克焦虑量表,收集患者人口学统计数据,单因素和多因素Logistic回归分析胃镜和结肠镜检查患者焦虑情绪的影响因素。结果胃镜和结肠镜检查患者焦虑水平高于国内常模(P 0.01)。单因素分析显示,男性患者焦虑程度明显低于女性,不伴合并症患者低于伴合并症患者,大专以上教育程度患者焦虑程度低于教育程度为小学至高中的患者。多元Logistic回归分析显示,合并症和性别是接受胃镜和结肠镜检查患者焦虑情绪的主要影响因素。结论胃镜和结肠镜检查患者焦虑程度与合并症和性别有关,但与年龄和检查类别等因素无关。     

肝硬化患者双评分法评估PLT ALB PT水平比较

目的采用CTP及MELD两个评分系统探讨肝硬化患者血小板（platelet,PLT）、白蛋白（albumin,ALB）、凝血酶原时间（prothrombin time,PT）含量变化及临床意义,并了解评分系统优劣。方法101例肝硬化患者按Child—Pugh分级分为Child A级37例、Child B级18例、Child C级46例,按MELD评分分为〈18分和≥18分两组分别为69例和32例,另选正常对照组32例,检测其PLT、ALB、PT并进行对比分析,并对各水平做相关性分析。结果肝硬化患者Child—Pugh分级各组的PLT、ALB水平均低于正常对照组（P〈0．01）,而PT水平均高于正常对照组（P〈0．05）,肝硬化A级与C级患者的PLT水平差异有统计学意义（P〈0．01）,肝硬化各级患者的ALB水平差异均有统计学意义（P〈0．01）。MELD评分各组及对照组之间的PLT、ALB、PT水平差异均有统计学意义（P〈0．01）。PT与PLT、ALB之间还存在负相关（P〈0．01）。结论肝硬化患者检测PLT、ALB、PT水平变化有助于病情的判断。CTP及MELD两个评分系统在本院均适用,MELD更为灵敏。