快速肥达反应的实验研究与临床应用

本研究采用微波、离心等方法处理肥达反应的抗原抗体反应体系 ,旨在改进其反应条件 ,以期达到快速、敏感诊断肠热症的目的。1　材料与方法1 1　诊断菌液　伤寒菌Ｏ、Ｈ ;副伤寒菌Ａ、Ｂ购自卫生部上海生物制品研究所。批号分别为 0 0 0 40 1及 0 0 0 3 0 1。在有效期内按说明要求使用。1 2　抗体　①试验血清 :动物免疫血清用传统肥达反应法检测效价为 1 :80 0。②临床考核血清 :1 5份非肠热症患者(据临床症状、细菌培养、生化反应检测均阴性 )血清 ;1 7份肠热症患者 (据临床症状、细菌培养、生化反应检测均阳性 )血清 ,收集于当地医院检…     

对单项HBsAg阳性长期意义的观察

目的：探讨单项ＨＢｓＡｇ阳性的长期意义。方法：选择两年内未经药物治疗及ＨＢＶ疫苗接种的原单项ＨＢｓＡｇ阳性者血清，分别用ＥＬＩＳＡ法或ＰＣＲ法检测ＨＢＶＭ或ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：检出五项ＨＢＶＭ，１２组ＨＢＶＭ组合类型，６８例ＨＢＶ－ＤＮＡ。ＨＢＶ－ＤＮＡ总阳性率为４９．２７％。结论：部分单项ＨＢｓＡｇ阳性可能转化为慢性乙肝。单项ＨＢｓＡｇ不能简单解释为无症状携带者。ＰＣＲ法较ＥＬＩＳＡ法更敏感、准确地反映ＨＢＶ在体内的复制。     

用光镜直接从培养细胞中检测细胞凋亡的研究

目的：观察细胞培养中凋亡细胞的形态。方法：取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，与台盼蓝混合制成悬液片，用光镜观察。结果：可见凋亡细胞核形态改变及凋亡小体。结论：光镜下依据典型凋亡细胞形态变化可确认凋亡。     

用通用引物PCR检测HBV DNA的研究

本文设计一对ＨＢＶ亚型通用的ＰＣＲ引物，用于检测血清ＨＢＶ ＤＮＡ。ＰＣＲ扩增后，产物经２％琼脂糖凝胶电泳分析与ＥＩＡ法有较高的阳性符合率。阳性扩增条带单一清晰，扩增产物的分子量可靠，可测出８０ｆｇ／ｍｌ的微量ＨＢＶ ＤＮＡ。本法准确、敏感，可用于临床常规检测ＨＢＶ ＤＮＡ。     

AO/EB双重荧光染色检测细胞凋亡的研究

目的：检测细胞培养中凋亡细胞的形态及数量。方法：取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，用ＡＯ／ＥＢ染色后荧光镜观察。结果：荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光，伴有核结构的变化，晚期凋亡细胞发橙红色荧光并伴有凋亡小体的形成。结论：ＡＯ和ＥＢ双重荧光染色后，荧光镜检在细胞凋亡检测中既可定性，又可定量。     

小鼠胸腺实质内凋亡细胞分布的观察

目的：探讨非生理条件对细胞凋亡的影响。方法：采用ＨＥ和ＤＮＡ染色的方法，在４℃组织培养条件下观察了小鼠胸腺实质内凋亡细胞的分布。结果：胸腺皮质、髓质内均有发生典型核形态改变的细胞，其细胞核的形态大小不一，具有这种核形态改变的细胞随体外培养时间的延长而增多。结论：体外非生理环境培养可诱导胸腺实质内各种细胞凋亡和坏死     

光学及荧光显微镜在细胞凋亡检测中的应用

为观察细胞培养中细胞凋亡的形态及数量，取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，用光镜或吖啶橙（ＡＯ），溴化乙淀（ＥＢ）染色后荧光镜观察，光镜下可见凋亡小体，荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光，伴有核结构的变化，而晚期凋亡细胞发橙红色荧光并有凋亡小体的形成。结果表明：光镜下需出现典型形态变化时凋亡才能确认，ＡＯ和ＥＢ双重荧光染色后荧光镜检在细胞凋亡检测中即可定性，又可定量。     

用单克隆抗体BA法快速检出细胞培养物中的支原体

口腔支原体是实验室细胞培养物的主要污染源之一.为解决支原体的快速诊断问题,1987年我们建立了7株分泌抗口腔支原体单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株.进而我们应用McAb-BA(biotin-avidin)法检查了7株细胞培养物,其中4份阳性,3份阴性,获得了满意结果.     

53株肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的　监测某院肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药性及其产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)菌株的检出率。方法　收集、分离、鉴定肺炎克雷伯菌。用K B纸片扩散法进行药敏试验 ,双纸片协同试验检测产ESBLs菌株。结果　共分离到 5 3株非重复肺炎克雷伯菌 ,其中产ESBLs株 2 6株 ,占 4 9.0 6 %。 5 3株肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的总耐药率依次为 :氨苄西林 98.1 1 % ,哌拉西林 73.5 8% ,四环素 6 9.81 % ,氯霉素 6 7.92 % ,复方新诺明6 7.92 % ,头孢唑啉 6 0 .38% ,庆大霉素 5 4 .72 % ,头孢呋辛 5 2 .83% ,奥格门丁 4 9.0 6 % ,头孢噻肟 4 9.0 6 % ,萘啶酸4 9.0 6 % ,阿米卡星 4 1 .5 1 % ,氨曲南 37.74 % ,环丙沙星 32 .0 8% ,头孢他啶 1 0 .0 0 % ,亚胺培南为 0。产ESBLs株的耐药率均较高 ,大都 >6 0 % ,与非产ESBLs株的耐药率比较 ,除氨苄西林、亚胺培南、四环素、氯霉素外 ,对其他抗菌药物的耐药率差异均有显著性 (P <0 .0 0 5 )。结论　亚胺培南是治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的首选药物。应采取措施控制肺炎克雷伯菌导致的医院感染流行及产ESBLs菌株的产生     

医院感染肺炎克雷伯菌的染色体和质粒DNA指纹图分析

目的 建立肺炎克雷伯菌重复序列聚合酶链反应技术(rep-PCR)，并应用于临床菌株流行病学调查。方法 对临床分离的39株医院感染肺炎克雷伯菌进行质粒图谱分析，并采用NaI裂解——玻璃粉吸附法提取其染色体DNA后行rep-PCR分型。结果 39株临床分离菌株产生了不同的rep-PCR带型，聚类分析显示，可分为6型，以1，2，3型为主。质粒图谱分析可将其分为4型，以1型为主，该型仅含有一种质粒。结论 (1)rep-PCR具有不需已知核酸序列，分型能力强，分辨效果好，简便快捷等优点，是进行分子流行病学的有效工具。(2)引起太和医院近两年肺炎克雷伯菌医院感染的传染源主要有3个，各型之间存在严重的交叉感染。