大鼠海马CA1脑区慢病毒载体注射方法学改进

目的：采用电极埋管的改进方式进行大鼠海马CA1脑区慢病毒载体注射的方法，并检测此方法的有效性和安全性。方法：45只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH)、生理盐水组(NS)和eGFP慢病毒注射组(eGFP)，每组15只。所有实验大鼠在脑立体定位仪下定位海马CA1组织，采用电极埋管的改进方式进行慢病毒注射。NS组给予生理盐水(2 μL)、eGFP组给予慢病毒(2 μL)，SH组只实行手术操作。注射病毒7、14和30 d后，分别处死大鼠并进行全脑冰冻切片，荧光显微镜观察eGFP慢病毒注射组的GFP绿色荧光表达水平和脑区分布。同时取相邻冰冻切片进行Nissl染色，检测eGFP慢病毒注射组的海马CA1脑区的损伤程度。结果：eGFP慢病毒注射成年大鼠海马CA1脑区7、14和30 d后，均可以成功检测到GFP在海马CA1脑区的表达，且表达水平和脑区分布均保持稳定，不随注射后切片时间的变化而变化。Nissl染色结果显示,神经元存活数目在eGFP慢病毒注射组与假手术组、生理盐水组比较均无显著性差异（P>0.05）。结论：成功建立了电极埋管的方式向大鼠海马脑区注射慢病毒的方法，并可在海马CA1脑区高水平表达其所携带的目的基因，为进一步的在成年大鼠海马CA1脑区进行基因操作奠定了基础。     

22例克林霉素不良反应抢救及护理

我院急诊病房于2006—07—09期间成功抢救22例静脉滴注克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液（欣弗）后发生不良反应患者，现将抢救和护理体会总结如下。     

复方金连片中金银花与连翘的薄层鉴别

复方金连片是由金银花、连翘等制成的中药复方制剂 ,主要用于各种流感及风热乳蛾的治疗 ,临床效果良好。为此 ,笔者对处方中的两种主药金银花和连翘进行了薄层色谱鉴别试验 ,现将试验结果报告如下。1　金银花的鉴别试验　　取本品 2片 ,除去包衣 ,研细 ,加甲醇 10 ml,置水浴上加热 ,充分振摇 ,放置 10分钟 ,滤过 ,滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品 ,加甲醇制成每 1m l含 0 .1mg的溶液 ,作为对照品溶液。照薄层色谱法 (中国药典 2 0 0 0年版一部附录VIB)试验 ,吸取上述溶液各 1μl,分别点于同一聚酰胺薄膜上 ,以醋酸为展开剂 ,展开 ,…     

桂枝茯苓丸治疗前列腺炎

桂枝茯苓丸原治疗妇人瘀血留结胞宫，致妊娠胎动不安、腹痛漏下之证。功效活血化瘀，缓消症块。笔者观其方义，辨证用于各科临床，屡获良效。     

中药治疗血管性头痛临证一得

血管性头痛是一种常见病、多发病。发作时患者突然感觉头痛难忍，并感到头皮血管跳动，甚者伴有恶心、呕吐，但头痛缓解后一如常人。头痛反复发作，为跳痛、胀痛、刺痛、抽痛。疼痛部位多在一侧或两侧前额太阳穴、后脑部或顶部。头痛前多伴头晕、头汗出、四肢发凉，甚则恶心、呕吐。     

关于3岁以下儿童微量元素水平的调查

目的 了解我地区3岁以下儿童体内锌、钙、铁、铜、镁元素的水平,提出预防及治疗方法.方法 于我院儿童保健科收治的3岁以下儿童共1428例,其中符合纳入标准儿童1038例,随机分为2组,所有儿童均抽血化验微量元素,并进行统计学分析.结果 种微量元素在男、女性别间比较差异无统计学意义.锌、钙、铁元素缺乏率在两年龄组间比较差异有统计学意义,镁和铜元素缺乏率在两年龄组间差异无统计学意义.结论 该地区3岁以下儿童微量元素处于较低水平.因此,应加强对家长的宣传教育,保证儿童对微量元素的需求.     

积极认知行为疗法对乳腺癌化疗患者生活质量的影响

目的 探讨乳腺癌化疗患者实施积极认知行为疗法(ACBT)对生活质量的影响.方法 采用随机数字表法将58例乳癌化疔患者分为两组,实验组28例采用化疗药物治疗同时联合ACBT治疗,对照组30例单纯采用化疗药物治疗.首次化疗第1天及治疗后6个月,采用生活质量核心问卷( QLQ - C30)评定两组患者干预前后的生活质量.结果 两组患者生活质量核心问卷中躯体功能、角色功能、情绪功能、认知功能、社会功能、疼痛、疲乏、恶心、呕吐、失眠、总的健康状况比较差异有统计学意义(P＜0.05),气促、食欲、便秘、腹泻症状比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在化疗药物治疗基础上联合ACBT治疗可提高患者的生活质量.     

延续护理对恶性黑色素瘤患者出院注射干扰素药物的影响

目的:探讨延续护理对恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)患者出院注射干扰素的影响。方法:回顾性分析36例出院后行干扰素持续治疗的MM患者的临床资料,统计治疗和护理结局,总结延续性护理干预方法。结果:36例患者均遵医嘱完成用药,用药期间出现发热11例,疲乏18例,干扰素注射部位硬结3例,心理不良情绪2例。结论:延续护理可提高MM患者出院后干扰素治疗依从性,降低用药不良反应对患者的影响。     

携带大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组慢病毒载体的构建及体外表达检测

目的 构建携带大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组慢病毒载体,并检测其体外表达目的 基因的能力.方法 应用基因克隆技术将大鼠BDNF基因克隆人慢病毒载体pFUW中,经过PCR、酶切和测序鉴定后,与包装质粒共转染293T细胞,制备并收集携带BDNF基因的慢病毒,重组病毒感染体外培养Hela细胞,利用实时定量PCR、蛋白质免疫印迹方法检测BDNF的表达情况,观察病毒转染效果.结果 PCR、酶切和测序鉴定,成功克隆了pFUW-BDNF重组子.所包装的重组慢病毒对Hela细胞的感染效率>90%,实时定量PCR、蛋白质免疫印迹方法可以检测到重组慢病毒感染Hela细胞后能高水平表达BDNF.结论 成功构建了携带BDNF基因慢重组病毒载体,并可在体外高水平表达其所携带的目的 基因,为将其进一步应用于神经系统损伤性疾病的治疗研究奠定了方法学某础.

Abstract：

Objective To construct lentiviral vector encoding the SD rat brain derived neurotrophic factor (BDNF) gene and examine its ability to express the BDNF gene in vitro. Methods The specific BDNF sequence was cloned into the plasmid of pFUW to construct the BDNF expression plasmid pFUW-BDNF. The recombinant plasmids were identified by DNA sequencing and restriction digestion. Then the packaging cell lines (293T cell) were cotransfected with the pFUW-BDNF together with the plasmids pLP1, pLP2 and pLP/VSVG by phosphate-calcium deposit method. The recombinant lentiviral vector was used to infecte the Hela cell, the expression of BDNF was detected by real-time quantitative PCR and western blot. Results The results showed the recombinant lentiviral vector carrying BDNF gene was constructed successfully and its infection efficiency in hela cell was above 90%. The recombinant lentiviral vector could up-regulated the expression of the BDNF gene. Conclusions The lentiviral vector carrying BDNF gene can enhance the expression of BDNF gene significantly,which lays the basis for its application in the treatment of the neurodamaged disease.