睾丸脱位合并腹股沟斜疝嵌顿(附1例报道及文献复习)

<正>睾丸脱位是一种罕见的疾病,1818年Claubry最先报道[1],至2008年国内文献报道70例,其中恶变4例[2]。随着车祸发生率上升,近年来其发病率有所提高,由于对该病的认识不足该病容易漏诊而延误治疗,应引起全科医师的重视。睾丸脱位多系创伤引起,非创伤性睾丸脱位更罕见,国内曾报道过     

显微外科治疗颞叶癫痫的疗效分析

目的评价外科治疗难治性颞叶癫痫的手术疗效。方法回顾性分析外科的治疗236例难治性颞叶癫痫患者的临床资料。结果随访2-15年,疗效按Enge]的标准评定,236例中,Ⅰ级159例（67．4％）,Ⅱ级34例（14．4％）,Ⅲ级25例（10．6％）,Ⅳ级18例（7．6％）,总有效率为92.4％,效果优良率为81．8％。无严重并发症及手术死亡病例。结论应用显微外科技术治疗难治性颞叶癫痫是一种安全、有效的方法;对致痫灶的精确定位和正确处理及减少并发症是提高疗效的关键。     

RNA干扰技术阻断EJ细胞中survivin基因的表达

目的:用真核转录载体pSilencer2.0构建针对survivin基因的重组真核转录载体,并转染膀胱肿瘤细胞系EJ,通过RNA干扰(RNAi)阻断EJ细胞中survivin基因的表达.方法:将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与psilencer2.0线性质粒以T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切、DNA测序鉴定后,用脂质体法转染EJ细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.结果:酶切及测序证实设计合成的DNA已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-SVV1、pSilencer2.0-SVV2重组载体有效地阻断了EJ细胞中survivin基因的表达,survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),其中pSilencer2.0-SVV2重组载体干扰效果更佳.结论:成功构建了针对survivin基因的真核转录载体pSilencer2.0-SVV1、pSilencer2.0-SVV2,两者均可有效地阻断膀胱癌细胞系EJ细胞中survivin基因的表达,pSilencer2.0-SVV2重组载体效果更佳,这为后继实验研究打下基础.     

GW112基因siRNA对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的影响

目的 构建靶向GW112 siRNA逆转录病毒载体并筛选特异高效的RNAi靶点,研究GW112基因沉默后对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的影响.方法 应用逆转录病毒载体psilencer 5.1-H1 Retro 构建针对GW112基因3个不同靶点的RNAi干扰载体-pSiRNA-GW112 (pSi405-GW112, pSi1066-GW112, pSi1480-GW112),将脂质体法转染PT67细胞包装的病毒感染SGC-7901细胞,嘌呤霉素筛选稳定克隆,RT-PCR鉴定病毒整合,Real-time PCR筛选高效抑制靶点,CCK-8法检测对细胞体外增殖的影响.Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 测序结果证实各干扰靶点的重组逆转录病毒载体pSiRNA-GW112构建正确.RT-PCR结果显示除亲本细胞外,经各靶点病毒上清感染的细胞均能扩增出510 bp的Puro抗性基因片段.Real-Time PCR分析表明与SGC-7901亲本细胞组相比,7901-Si405,7901-Si1066及7901-Si1480组GW112的转录水平分别只有SGC-7901组的(15.50±0.01)%,(32.40±0.01)% 与(57.00±0.02)%.而7901-Sc组GW112表达基本无变化.Si405, Si1066与 Si1480 靶点的抑制率分别为84.5%,67.6%及43.0%.沉默GW112后导致SGC-7901细胞体外增殖能力显著抑制(P<0.05),并伴随PCNA蛋白表达下调.结论 构建的重组逆转录病毒载体pSiRNA-GW112能显著抑制SGC-7901细胞的体外增殖能力,且这种增殖抑制与下调的PCNA表达有关.     

视频脑电图与发作期SPECT对痫灶定位的对比研究

Objective To investigate the value of ictal single photon emission computed tomography and VEEG in localization of epileptogenic foci for intractable epilepsy. Method The data of ictal SPECT and VEEG were reviewed from 48 patients with intractable epilepsy, all the results were analyzed and compared with each other. Surgical treatment were performed on 48 cases. Results The positive rate of ictal SPECT and VEEG localization was 94% and 96% respectively. The rate of complete coincidence of the two methods was 46% (22/48), partial coincidence was 29% (14/48). Comparing ictal SPECT with video EEG in the ratio of lateral and focal epileptic foci localization, twenty - seven of 48 patients had an Engel Class Ⅰ outcome after surgery and an additional ten patients had rare seizure (Engel Class Ⅱ), and eight patient had a decrease in seizure frequency (Engel Class Ⅲ) , no marked chang (Engel Class Ⅳ) in three patients. In Engel Class Ⅰ and Class Ⅱ outcome cases, there were 33 (out of 37) cases came from its coincidence of ictal SPECT and VEEG localization. Conclusions VEEG combined with ictal SPECT can increase the accuracy on localization of epileptogenic foci for intractable epilepsy.     

RNAi靶向抑制suvivinn基因对膀胱癌EJ细胞凋亡和细胞周期的影响

用真核转录载体pSilencer 2.0.U6在膀胱癌细胞系EJ细胞内表达针对Survivin基因的短发卡状RNA(shRNA),以阻断细胞中Survivin基因的表达,观察Survivin基因沉默后对EJ细胞凋亡、细胞周期产生的影响.     

RNAi沉默survivin基因表达对膀胱癌EJ细胞增殖的影响

目的 通过RNA干扰(RNAi)阻断EJ细胞中survivin基因的表达,研究survivin基因沉默后对细胞生长和细胞凋亡的影响.方法 将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4 DNA连接酶连接,重组质粒经酶切、DNA测序鉴定后,用脂质体法转染EJ细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.MTT法检测细胞生长的影响,流式细胞仪检测转染后EJ细胞的凋亡变化.结果 酶切及测序证实设计合成的DNA片段已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-SVV1、pSilencer2.0-SVV2重组载体均能有效地阻断EJ细胞中survivin基因的表达,使survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),后者抑制效果更佳.转染后的EJ细胞生长速度明显变慢.转染pSilencer2.0-SVV2实验组细胞的凋亡增加了17.0%.结论 重组真核载体能有效抑制EJ细胞的survivin表达,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

Survivin在小鼠髓源性树突状细胞不同分化阶段中的差异性表达

目的:探讨不同分化阶段的树突状细胞(DC)sur-vivin的差异性表达。方法:制备骨髓细胞作为DC前体,以rmGM-CSF联合rmIL-4对前体细胞诱导培养,第5天时添加rmTNF-α继续孵育48 h以进一步刺激DC分化成熟。分别收集0、5、7 d的细胞(其中第5天的细胞为添加rmTNF-α前收集),扫描电镜观察DC形态、流式细胞术鉴定DC表型,RT-PCR、Western blot检测不同分化阶段DCsurvivin的表达。结果:扫描电镜下不同分化阶段的细胞均具有典型DC形态;流式细胞术分析表明,不同成熟阶段的DC均高表达小鼠髓源性DC相对特异性标志CD11c,经rmTNF-α刺激后的DC其细胞表面CD40、CD86、MHC-Ⅱ等分子呈高水平表达;RT-PCR、Western blot检测结果显示,随着DC的分化成熟,sur-vivinmRNA及蛋白的表达水平呈上升趋势。结论:不同诱导条件下,获得的DCsurvivin表达有差别,随着DC成熟,sur-vivin表达增加。     

GW112基因逆转录病毒载体的构建及在胃癌SGC-7901细胞的表达研究

目的 构建人GW112基因的逆转录病毒载体,并通过病毒介导其在人胃癌SGC-7901细胞的稳定表达.方法 采用DNA 重组技术构建并鉴定重组逆转录病毒载体pLEGFP-N1-GW112;以脂质体PT67细胞包装病毒,经病毒感染的SGC-7901细胞通过G418筛选及荧光定量 PCR 鉴定,建立GW112稳定过表达SGC-7901细胞株.结果 成功构建了pLEGFP-N1-GW112逆转录病毒表达载体,经病毒包装的重组转录病毒成功感染SGC-7901细胞,Real-Time PCR结果显示实验组中GW112基因是对照组细胞中的4.2倍.结论 逆转录病毒介导的GW112基因在胃癌SGC-7901细胞获得了稳定过表达,为进一步研究GW112在胃癌中的功能奠定了良好基础.     

结节性硬化症伴顽固性癫痫脑电图分析及术前定位

目的：探讨结节性硬化伴顽固性癫痫的脑电图特点及术前痫灶定位．方法：回顾性分析了37例（其中30例行手术治疗）结节硬化所致顽固性癫痫的多导多形式脑电图特点并结合临床、影像学及发作期ECT等综合定位．结果：局灶性放电（单灶）4例,一侧双灶7例,一侧多灶或双侧改变以一侧优势的17例,双侧镜灶1例,双侧双灶3例,双侧弥散性放电5例．28例患者可定侧,并与影像学检查、临床发作相一致．术中行皮质及深部电图探测,证实了术前定位．本组随访1—6年,平均3．5年．30例患者中有16例获得Ⅰ级（Engel分级）,7例获得Ⅱ级,5例为Ⅲ级,2例Ⅳ级．平均智商（IQ）从术前的55．4分提高到64．1分．结论：结节硬化伴顽固性癫痫EEG放电广泛,双灶或多灶性改变为主,大部分可通过多形式多导联脑电图定位,找出痫灶放电优势侧,并结合临床表现、影像学改变及发作期ECT等,找出原发痈灶并予以手术切除,可获得良好的治疗效果．