Leprdb/db小鼠肾损伤机制探讨

  目的  探讨瘦素受体完全缺陷的Leprdb/db小鼠肾损伤机制。  方法  选取28周龄瘦素受体杂合缺陷的Leprdb/+（作为对照）与Leprdb/db雄性小鼠各10只,禁食8 h后,分别测量两组小鼠体质量、空腹血糖（FBG）和糖化血红蛋白（HbA1c）水平。小鼠经股动脉采血后处死。采用试剂盒检测血清中肌酐（CRE）、尿素氮（BUN）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH） 、丙二醛（MDA）的水平。酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）、单核细胞趋化因子-1（MCP-1)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平。取肾进行病理观察。Western blot检测肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）及核因子-κB（NF-κB）蛋白表达。提取肾组织细胞线粒体,Western blot检测线粒体中硫辛酸合成酶(lipoic acid synthase, LIAS)蛋白的表达水平。  结果  与Leprdb/+小鼠相比,Leprdb/db小鼠体质量、FPG、HbA1c、CRE、BUN水平均升高,差异有统计学意义（P<0.05）。病理观察发现,Leprdb/+小鼠肾细胞结构完整,而Leprdb/db小鼠肾小球体积增大,基底膜及毛细血管壁增厚,系膜细胞和系膜基质增多。与Leprdb/+小鼠相比,Leprdb/db小鼠血清中GSH水平降低,MDA和炎性因子MCP-1、IL-1β、TNF-α水平均升高,差异均有统计学意义（P<0.05）;Leprdb/db组小鼠肾脏线粒体内LIAS和肾组织中Nrf2蛋白表达量均降低,而NF-κB蛋白水平升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。  结论  28周龄Leprdb/db小鼠存在氧化应激和炎症反应,肾损伤机制可能与LIAS调控Nrf2和NF-κB有关。     

骨关节炎发病机理的实验研究

本实验运用基质组织化学和酶组织化学的方法,通过光镜、扫描电镜和透射电镜对木瓜蛋白酯诱发的实验性骨关节炎关节软骨形态变化进行观察,发现早期变性软骨细胞中溶酶体样结构大量增多,溶酶体酶活性增强,而软骨基质糖胺多糖成份明显减少,进而产生一系列早期骨关节炎特征性损害。结果表明：糖胺多糖的减少与溶酶体酶活性升高有关。因而认为溶酶体酶活性增高是骨关节炎病变发展的机制之一。随着骨关节炎研究不断取得进展,关节软骨中酶的活性变化在这一退行性疾病中的作用,引起愈来愈多学者的重视。但在这方面生物化学文献较多,而组织化学方面的研究报道尚不多见。我们试图运用基质组织化学和酯组织化学的方法,通过光镜,扫描电镜与透射电镜对木瓜蛋白酶诱发的实验性骨关节炎的关节软骨组织化学成份变化,组织结构和超微结构的变化进行观察,以便进一步阐明骨关节炎的发病机制。     

寒湿痹发病机理的实验研究

痹证是指由于风寒湿邪侵袭人体,闭阻经络,气血运行不畅所导致的以肌肉、筋骨、关节发生疼痛、麻木、沉重、活动受限为主要临床表现的病证。对于痹证的成因,祖国医学认为：“风寒湿三气杂至合而为痹也,其风气胜者为行痹,寒气胜者为痛痹,湿气胜者为着痹也。”不少学者强调了寒湿在痹证发病过程中的作用。南宋张从正指出：“此疾之作,多在四时阴雨之时,及太阴寒水用事之月,故草枯水寒为甚或濒水之地,劳力之人,辛苦失度,触冒风雨,寝处潮湿痹从外入”。^[1]我们通过中医研究院图书情报中心电子计算机检索了近几年有关痹证的文献,大量现代中医临床研究报道表明,在各种痹证中以寒湿痹较为多见。如杜善颖治疗220例痹证,^[2]其中与寒湿有关的痹证占总数的93.6%。严肃云治疗痹证116例,^[3]其中痛痹加着痹共69例,占总数的59%。陈三才对200例痹证病人进行病因调查,^[4]除去很难找到诱因的62人外,剩下137人中有94人是因寒湿发病的,占总数的68.4%。因此舒尚义认为寒湿痹是痹证的基本型,临床最为多见。^[5]国外学者也意识到寒湿对关节炎的影响,据统计80－90%的关节炎患者对天气变化尤其是寒冷和潮湿的影响较大。^[6]