免疫抑制儿童感染新型冠状病毒Omicron变异株病毒清除时间的回顾性队列研究

背景：儿童新型冠状（新冠）病毒Omicron变异株流行期间，免疫抑制状态儿童新冠病毒清除时间定量分析研究较少。 目的：探讨新冠病毒Omicron株感染后免疫抑制和非免疫抑制儿童病毒清除的时间差别，为公共卫生政策制定和精准疫情防控措施提供临床数据。 设计：回顾性队列研究。 方法：以新冠病毒Omicron变异株感染住院患儿为队列人群，分为免疫抑制组和非免疫抑制组，免疫抑制分为绝对免疫抑制、相对免疫抑制和实施免疫抑制疗法，以免疫抑制组病例的性别、年龄和新冠病毒感染的分型与非免疫抑制组行1∶3匹配。以鼻咽拭子新冠病毒PCR检测拷贝数阈（Ct）值≥35为队列终点。 主要结局指标：新冠病毒清除时间。 结果：2022年4月12日至2022年5月12日在上海市新冠病毒感染定点收治医院符合本文共同纳入和排除标准的连续病例728例。免疫抑制组33例，其中绝对免疫抑制8例，相对免疫抑制23例，接受免疫抑制疗法2例（不包括绝对和相对免疫抑制患儿）。非免疫抑制组匹配后99例。2组临床症状、新冠病毒感染治疗和疫苗接种次数差异均无统计学意义。免疫抑制组和非免疫抑制组新冠病毒清除时间分别为（16.5±6.8）和（10.3±4.4）d，差异有统计学意义。免疫抑制组和非免疫抑制组新冠病毒感染轻型病例病毒清除时间分别为（14.0 ± 8.3）和（9.7 ± 3.1）d，普通型病例病毒清除时间分别为（18.3 ± 4.9）和（11.2 ± 5.9）d，差异均有统计学意义。2组单日病毒清除率在第9~14天时差异有统计学意义（P为0.005~0.039）。2组普通型病例单日病毒清除率在第10~15天时差异有统计学意义。免疫抑制组新冠病毒感染2周后核酸检测再次呈阳性3例（9%），临床分型均较前轻，3例均未接种新冠疫苗。 结论：Omicron株感染的免疫抑制患儿病毒清除时间较非免疫抑制患儿显著延长，主要反映在第9~14天，免疫抑制患儿病毒复阳风险高，提示需要更长的隔离时间和转阴后严格的病毒监测。     

甘草总黄酮微海绵的制备及体外释放度评价

目的:优选甘草总黄酮微海绵的制备工艺并考察其体外释放度。方法:利用类乳剂溶媒扩散法制备甘草总黄酮微海绵,以微海绵得率、包封率及分散系数为指标,通过星点设计-效应面法考察聚乙烯醇用量、药物与乙基纤维素的比例、搅拌速度对甘草总黄酮微海绵制备工艺的影响。利用紫外分光光度法测定甘草总黄酮微海绵的包封率,检测波长335 nm;建立HPLC同时测定甘草总黄酮中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A和光甘草定的含量,检测波长300 nm,流动相乙腈-甲醇-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱;利用透析法比较甘草总黄酮及甘草总黄酮微海绵中6个成分的体外释放度。结果:甘草总黄酮微海绵的最佳制备工艺为聚乙烯醇用量2.69%,药物-乙基纤维素(6∶1),搅拌速度1 100 r·min~(-1),搅拌时间4 h。8 h内甘草总黄酮中甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A和光甘草定的累积释放度分别为87.47%,86.83%,76.98%,78.48%,86.58%和56.58%,24 h内甘草总黄酮微海绵中这6个成分的累积释放度分别为91.45%,89.74%,77.57%,82.64%,87.74%和67.74%。结论:利用类乳剂溶媒扩散法制备的甘草总黄酮微海绵粒径大小均匀、工艺稳定且操作简便。甘草总黄酮微海绵具有明显的缓释作用。     

足阳明经穴针刺对家兔离体胃窦平滑肌细胞舒缩活动与胞内三磷酸肌醇含量的影响

目的:探讨针刺血清足三里、天枢、梁门等足阳明经穴针刺血清对家兔离体胃窦平滑肌细胞舒缩活动及胞内三磷酸肌醇含量的影响。方法:实验于2003-07/12在广州中医药大学和广州中医药大学附属第二医院完成。将45只家兔随机分为5组,每组9只。生理盐水组:耳缘静脉滴注0.9%氯化钠溶液剂量为10mL/kg;阿托品模型组:耳缘静脉滴注以生理盐水配制的2.5mg/100mL的阿托品;足阳明经穴组、足少阳经穴组、足太阳经穴组均先静滴阿托品(滴注方法同阿托品模型组),在滴完阿托品总量的一半时,开始分别电针双侧足阳明经穴(足三里、天枢、梁门、四白)、足少阳经穴(阳陵泉、带脉、日月、阳白)、足太阳经穴(承筋、背下点、背上点、攒竹)30min,待电针完毕后,颈动脉采血6mL离心15min,取上清,制备成“针刺血清”。另取家兔10只,手术取胃,分离胃窦平滑肌,经Ⅱ型胶原酶消化后制备胃窦平滑肌细胞悬液,以“针刺血清”与家兔胃窦平滑肌细胞作用,用戊二醛固定后测定细胞长度和细胞内三磷酸肌醇含量。结果:进入细胞长度分析的家兔为43只,进入三磷酸肌醇含量分析家兔为45只。①细胞长度比较:足阳明经穴组明显低于足少阳经穴组犤(42.05±7.85,77.33±9.80)μm,(P<0.01)犦;足太阳经穴组明显高于生理盐水组犤(75.88±9.14,64.58±6.59)μm,(P<0.05)犦。②三磷酸肌醇含量比较:足少阳经穴组明显低于组阳明经穴组犤(33.15±7.45,48.96±8.89)pmol/106,(P<0.01)犦;阿托品模型组明显低于生理盐水组犤(31.65±7.69,40.84±9.82)pmol/106,(P<0.05)犦。结论:足阳明经穴针刺血清能使离体胃窦平滑肌细胞产生明显的收缩效应,其收缩效应的产生与升高细胞内的三磷酸肌醇含量有关。     

B超显象观察针刺足阳明经下肢段穴位对胃窦面积的影响

目的通过B超显象观察针刺足阳明经下肢段穴位对胃窦面积的影响，而探讨足阳明经与胃的相关性．方法选用足阳明经下肢段伏兔、梁丘、足三里、上巨虚、冲阳、内庭6个穴组，每组15例，每例均接受经穴及左右旁开1cm对照点的观察．刺激方法为针刺手捻针，观察记录方法为B超显示屏上直接观察，同步用日产日立录像机记录，观察过程为针前记录3min,针刺中记录3min，将记录的信号输入到计算机中每Zs采样一次，6min共捕获图象180幅，以象素为单位，计算鲁窦的面积、上下径、前后径、统计学处理采用配对t检验，组间比较用方差分析及Q检验（方差不齐时采用秩和检验）结果针刺足三里、上巨虚、冲阳、内庭4个穴位后都能使胃窦面积明显增大，与针前比较P值分别＜0．05和0．01，而针刺穴位左右对照点则作用不明显．针刺足三里、冲阳2穴后能使胃窦上下径明显增大，与针前比较P＜0．05．对胃窦前后径的变化起作用的穴位只有足三里1穴．结论针刺足阳明经下肢段穴位对胃运动功能确有特异性影响     

电针足三里和阳陵泉穴对家兔胃胆运动及脑肠肽的影响

目的:研究经脉-脏腑相关理论及经穴对相应脏腑的特异性作用．方法:静脉滴注阿托品造成家兔(n=50)胃和 Oddi括约肌运动抑制状态,观察电针家兔足三里穴及阳陵泉穴对胃电及Oddi括约肌肌电的影响并检测血浆和胃窦平滑肌及Oddi括约肌组织中胃动素(MTL)胆囊收缩素(CCK)的含量．结果:静滴阿托品后家兔胃电和Oddi括约肌肌电慢波高活动相平均振幅(P=0．001和快波平均振幅(P=0．028,P=0．001)明显降低;慢波平均频率变化不明显．电针足三里穴和阳陵泉穴对家兔胃电(P=0．020,P=0．0001及Oddi 括约肌肌电(P=0．021,P=0．001)平均振幅有不同程度的兴奋作用,表明经脉-脏腑之间既有直接相关又有间接相关．电针足三里穴和阳陵泉穴可升高胃窦平滑肌、Oddi括约肌组织及血浆中MTL(P=0．000)、CCK((P=0．001)含量．电针足三里穴对胃窦平滑肌和血浆MTL (P=0．020,P=0．001)及血浆CCK(P=0．001)含量升高最显著,差异有显著性意义．Oddi括约肌MTL及胃窦平滑肌、Oddi括约肌CCK以电针阳陵泉穴明显．提示MTL和CCK是参与针刺调整消化道运动的重要脑肠肽物质．结论:电针足三里和阳陵泉穴可促进胃和 Oddi括约肌运动,其机制之一可能为针刺影响外周MTL、CCK的释放,进而调整消化道运动．这种经穴对相应脏腑的调整作用具有相对特异性．     

HPLC同时测定甘蒲祛斑凝胶中甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A的含量

目的: 建立同时测定甘蒲祛斑凝胶中甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A含量的方法。方法: 采用高效液相色谱法,Agilent HC-C₁₈色谱柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相0.05%磷酸水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~4 min,80%A;4~18 min,80%~65% A;18~22 min,65%~62% A;22~25 min,62% A,25~30 min,62%~55% A;30~35 min,55% A,35～45 min,55%~50% A;45~50 min,50%~55% A;50~60 min,55%~80% A),柱温30 ℃,流速0.8 mL·min^-1,检测波长276,368 nm。结果: 甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A的线性范围分别为0.050 4~0.403 2 (r=1),0.039 4~0.315 2 (r=1),1.638~8.192 μg (r=0.999 9);甘草素平均回收率为98.81%,RSD 1.7%;异甘草素平均回收率为99.16%,RSD 1.2%;甘草查尔酮A平均回收率为97.68%,RSD 1.0%。结论: 该方法简便、灵敏度高、专属性强,可用于甘蒲祛斑凝胶中3种指标性成分的含量测定。     

艾灸促进胃黏膜细胞HSP70表达上调对细胞凋亡线粒体信号转导途径的影响

目的:探讨艾灸预处理抑制细胞凋亡、保护胃黏膜损伤的机制.方法:32只健康Wister大鼠随机分为4组,即捆绑组(A组)、模型组(B组)、艾灸穴位组(C组)和艾灸非穴组(D组),每组8只.艾灸穴位组和艾灸非穴组大鼠艾灸预处理8 d,捆绑组和模型组大鼠只捆绑,不艾灸.除捆绑组外,其余各组采用无水乙醇灌胃法制备大鼠急性胃黏膜损伤模型.采用Western blot法检测大鼠胃黏膜细胞色素C(Cyt-C)的表达,免疫组织化学方法检测大鼠胃黏膜HSP70、胃黏膜细胞凋亡、凋亡活化因子1 (Apaf-1)、Caspase-9和Caspase-3的表达.结果:与A组相比,B组大鼠胃黏膜HSP70表达,胃黏膜细胞凋亡指数(AI),胞质Cyt-C、Apaf-1、Caspase-9和Caspase-3含量明显增加(2.93±0.29vs 2.51±0.22,3.52±0.77vs 2.25±0.53,1.63±0.36vs 0.75±0.23,4.32±0.67vs 3.44±0.86,4.05±1.01vs 3.76±0.82,3.55±0.86vs 2.35±0.71,P＜0.01或0.05).与B组相比,C组大鼠胃黏膜HSP70表达(3.93±0.36)明显增加(P＜0.01),而细胞凋亡指数(1.53±0.45),胞质Cyt-C(0.97±0.26)、Apaf-1(2.244±0.49)、Caspase-9(2.43±0.73)、Caspase-3(1.97±0.61)均显著降低(P＜0.01).与C组相比,D组大鼠胃黏膜HSP70表达(3.35±0.34)显著降低(P＜0.01),而凋亡指数(3.06±0.81),Cyt-C(1.45±0.29),Apaf-1(3.16±0.66),Caspase-9(3.33±0.76),Caspase-3(2.98±0.86),显著升高(P＜0.01或0.05).结论:艾灸通过上调大鼠胃黏膜细胞HSP70表达,继而作用于凋亡线粒体信号转导途径相关靶点,由此抑制胃黏膜细胞凋亡,达到保护胃黏膜损伤的作用,且这种保护作用具有一定的穴位特异性.     

新生猪胰岛移植治疗糖尿病病人的临床研究

目的:评估新生猪胰岛移植治疗1型糖尿病方法的安全性和有效性.方法:所有22例病人均接受经肝动脉新生猪胰岛移植治疗,移植后病人接受多种免疫抑制治疗方案;第1组14例病人使用环孢菌素、骁息和甲基强的松龙,没有接受猪C肽检测;第2组2例病人只使用环孢菌素和骁息,第3组6例病人的免疫抑制方案是OKT3、他克莫司、西罗莫司和甲基强的松龙.在移植治疗前和移植后1年,病人进行了血糖、外源性胰岛素用量、糖化血红蛋白、猪内源性反转录病毒(PERV)和肝功能的评估,第2组和第3组的8例病人接受了血清猪C肽检测.6例病人在移植后4～6年进行了复查.结果:第1组14例病人移植后胰岛素用量减少和HbAlc水平降低.第2组2例病人在移植后代谢指标没有变化,猪C肽检测阴性.第3组的6例病人在移植3个月以后,胰岛素用量均减少,HbAlc正常,6例病人血清均检测到有意义的猪C肽.其中2例病人接受了第2次新生猪胰岛移植,1例病人短暂脱离胰岛素治疗7d.所有病人在移植后均未出现严重不良反应,没有PERV感染的证据.6例病人在新生猪胰岛移植4～6年后接受检查,此6例病人均在接受移植治疗1年后停止免疫抑制治疗,复查时6例病人均接受胰岛素治疗.其中4例病人严格限制糖的摄入,2例病人为自由饮食;这2例病人中,有1例出现2次酮症,有轻度糖尿病视网膜病变;1例出现1次由于急性胃肠炎导致的酮症;其余4例均未出现任何并发症.6例病人再次接受PERV检测均为阴性.结论:异种胰岛可以在人体内存活并发挥其功能,没有发现严重不良反应.