胶原抗体联合LPS建立C57BL/6小鼠关节炎模型

胶原抗体诱导性关节炎(CAIA)是一种新颖的关节炎小鼠模型,与胶原诱导性关节炎(CIA)模型相比,CAIA不需要7周以上才出现关节炎表型,对于CIA模型不敏感的品系也有较好的诱导效果.然而,使用的高剂量诱导剂,一方面给小鼠带来严重的不良反应,甚至出现死亡现象,另一方面也导致5-克隆胶原抗体混合物的不必要浪费.降低5-克隆胶原抗体混合物和脂多糖(LPS)的使用剂量,在避免模型小鼠死亡,节约5-克隆胶原抗体混合物的同时,成功高效诱发C57BL/6小鼠关节炎模型,为类风湿关节炎(RA)发病机制的研究提供了有效方法.     

成像流式细胞术在检测巨噬细胞吞噬肿瘤细胞中的应用

分别用Cytomics FC500型流式细胞仪和ImageStre-amX MarkⅡ成像流式细胞仪检测小鼠来源RAW264.7细胞转染对照组NC mimics和微小RNA-22 (miR-22) mimics之后吞噬鼠源胶质瘤细胞系GL261的百分比,并观察两种检测技术检测结果的相关性和一致性.结果 显示,两种流式细胞术测得的RAW264.7细胞(NC mimics组和miR-22 mimics组)吞噬GL261细胞的比例的相关性良好(R2＞0.8),两者结果差异有统计学意义(P＜0.05).Bland-Altman法分析两种检测技术测得RAW264.7细胞(NC mimics组和miR-22 mimics组)吞噬GL261细胞的比例偏倚较小,分别为4.289％和8.073％.与对照组NC mimics比较,miR-22 mim-ics组RAW264.7细胞吞噬肿瘤细胞能力增加(P＜0.05),成像流式细胞术还可获得吞噬过程的单个细胞图片.经典流式细胞术操作方便,速度较快,而成像流式细胞术建立在传统流式细胞术基础之上,实现了对细胞图像进行多参数量化分析,能获得全新的细胞形态统计.     

一种靶向HER2嵌合抗原受体CAR THP-1细胞系的构建

目的 获得稳定转染靶向人类表皮生长因子2(HER2)的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)。方法 构建靶向HER2的CAR慢病毒载体并感染人单核细胞白血病细胞系(THP-1)。通过分选流式细胞仪分选出含有绿色荧光标记的CAR THP-1细胞并在体外继续培养。将此靶向HER2的CAR THP-1细胞与HER2表达阴性(-)及阳性(+)的子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别共培养，通过成像流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬，通过流式细胞仪检测其对HER2表达阳性肿瘤细胞的靶向吞噬比例。结果 CAR慢病毒感染THP-1细胞效率较低；与癌细胞共培养后，流式细胞术及成像流式细胞术结果显示，CAR THP-1组与空载体组相比，CAR THP-1细胞对HER2阳性的Ishikawa细胞吞噬能力增强(P<0.01)。结论 通过构建CAR慢病毒载体并转染THP-1细胞，成功建立了靶向HER2的CAR THP-1细胞系，且其能通过特异性靶向吞噬HER2阳性Ishikawa细胞。