NF2蛋白518位丝氨酸磷酸化状态对其分子内相互作用机制的结构生物学及生物化学研究

 目的  揭示NF2 (neurofibromatosis type 2)蛋白518位丝氨酸的磷酸化如何对其结构与功能进行调节。  方法  解析野生型NF2^WT(无模拟磷酸化突变)和突变型NF2^S518D(模拟518位丝氨酸被磷酸化的突变体)蛋白的晶体结构,进一步利用体外Pull-down实验及荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)实验检测了NF2的分子内相互作用。  结果  由于NF2的C-端在结晶过程中降解,未能观察到NF2^WT和NF2^S518D两种蛋白质构象的差异,结构分析发现NF2的N-端FERM(Four-point one,Ezrin,Radixin,Moesin)结构域与已有结构报道的FERM结构域具有相似的空间构象。体外Pull-down实验证明生化实验结果提示,相对NF2^WTC-端蛋白质而言,NF2^S518D的C-端蛋白质与NF2的N-端蛋白质结合更强。FRET实验在波长525 nm处,检测到全长NF2^S518D比全长NF2^WT产生更强的FRET信号。  结论  野生型NF2^WT处于“开放”状态而模拟磷酸化的突变型NF2^S518D处于“闭合”状态。     

复旦大学生物医学研究院表观遗传研究回顾

 一般认为,表观遗传学是研究由非基因序列变化造成可遗传性状的科学,其所涵盖的调控形式广泛参与细胞生命活动的各个过程,并且在许多疾病的发生发展过程中具有重要的调控作用。人类基因组计划之后,表观遗传研究的一系列发现让人们意识到遗传信息调控的复杂性和精细性,该领域成为21世纪生命科学与医学领域最为活跃的研究方向之一。复旦大学生物医学研究院(Institute of Biomedical Sciences,Fudan University,简称“IBS”)依托于上海医学院,自建院之初就将“医学表观遗传学”列入重点研究方向,经过12年的发展,该方向上已经产生了一大批在国际上具有高影响力的原创性成果。这些成果对提升我国在世界范围内表观遗传领域的影响具有重要意义,同时对复旦大学生物医学相关学科的建设和人才培养做出了重要贡献。本文主要对复旦大学生物医学研究院在表观遗传领域取得的一批具有代表性的研究成果进行了总结与回顾。     

分辨率革命——冷冻电子显微学在结构生物学研究中的进展

 冷冻电子显微学具有悠久的历史,近年来随着硬件设备的革命性技术突破和软件算法方面技术发展,已经成为结构生物学领域最为重要的研究方法,也代表了未来的发展方向。其中,单颗粒三维结构重构法在最近的几年发展迅速,极大地拓展了研究方法的适用范围,并不断刷新所解析结构的高分辨率记录,成为结构生物学及相关学科最为激动人心的研究领域。本文将针对冷冻电子显微学发展的历史,近期革命性技术突破,以及复旦大学在该领域的布局和进展做简要介绍。     

某风电扩建项目职业病危害控制效果评价

目的识别、分析风电项目职业病危害因素,对目前采取的职业病危害防护设施、措施进行分析与评价,并提出建议,为卫生行政部门审批建设项目提供可行的技术依据。方法采用现场调查法、检测检验法等方法进行评价。结果经现场调查、检测、分析,该项目除个别监测点粉尘和噪声超过国家职业卫生标准外,其他职业病危害因素均控制在国家职业卫生标准范围内。结论该建设项目职业卫生状况基本达到国家职业卫生标准,该企业的职业病危害控制措施基本有效,但应该加强个别工作场所粉尘和噪声的控制措施。     

组蛋白去甲基化酶JARID1B的表达纯化及酶活力分析

 目的 筛选能够大量表达、方便纯化且具有酶活性的组蛋白去甲基化酶JARID1B(jumonji AT rich interactive domain 1B)的截短体。方法 通过Bac to Bac系统制备含目的基因的杆粒(bacmid),转染Sf9昆虫细胞获得重组病毒基因组,并感染Hi5昆虫细胞表达目的蛋白,用Ni NTA亲和层析,离子交换层析和分子筛纯化目的蛋白。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometer,MALDI TOF)分析截短体的酶活力。结果 去除C 端两个PHD结构域的截短体JARID1B1 825能够在昆虫细胞Hi5中得以大量表达(1L细胞含10 mg蛋白),经Ni NTA亲和层析,阴离子交换层析和分子筛三步纯化,获得纯度大于90%的目的蛋白,MALDI TOF质谱分析显示JARID1B1 825仍拥有去组蛋白甲基化修饰的酶活性。结论 筛选到了能够大量表达、方便纯化且具有酶活性的JARID1B的截短体,对其后续的功能研究和药物开发具有重要的意义。     

经尿道前列腺电切术的护理配合

前列腺增生是中老年男性的常见病，多发病。随着社会老龄化的来临，前列腺增生越来越成为困扰他们的一大疾患。传统的治疗方法是“经膀胱前列腺摘除”，其缺点为开放性手术，刨伤大，术中出血多。经尿道前列腺电切术是目前常用的一种治疗前列腺增生的手术疗法。这种手术具有创伤小，出血少，并发症少，且操作时间短，病人恢复快等特点。目前，国际上已经把它作为手术治疗前列腺增生的“金标准”。我院自2000～2004年采取经尿道前列腺电切术，为426例患者解除了病痛，效果良好。现将护理在术中的配合做法介绍如下，供同行参考。     

大连市甘井子区医疗机构口腔诊疗用水质量检测情况分析

目的了解甘井子区医疗机构口腔诊疗用水供水装置消毒情况及水质的卫生质量,为卫生行政部门监督提供可行的技术依据。方法采用现场调查法、检测检验法等方法。结果经现场调查、检测、分析,23家医疗机构使用的水源水菌落总数均合格,手机机头水的质量较差,菌落总数的合格率仅为47.83%。结论口腔诊疗用水是医疗感染的薄弱环节,加强消毒管理,控制口腔诊疗用水微生物污染是医疗机构管理的关键环节。     

腹腔镜胆囊切除术与小切口胆囊切除术治疗老年胆囊结石的疗效比较

目的比较腹腔镜胆囊切除术与小切口胆囊切除术治疗老年胆囊结石的疗效。方法选取2012年1月~2014年1月收治的80例老年胆囊结石患者作为研究对象,均经B超、CT等检查确诊,年龄均为60岁及以上患者,排除合并其他系统严重疾病者及药物过敏史者。全部患者根据治疗方法不同分为腹腔镜组(LC组)和小切口组(MC组),每组40例,比较1)两组患者的手术时间、术中出血量及术后排气时间。2)两组并发症情况:包括腹腔内出血、胆漏、肠粘连、切口感染。结果 LC组患者的手术时间显著短于MC组,LC组的术中出血量显著少于MC组,LC组的术后排气时间显著快于MC组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。LC组1例患者术后出现腹腔内出血,可能与手术中操作失误造成;MC组术后2例出现腹腔内出血、1例出现胆漏、1例出现感染,两组并发症经对症治疗后均痊愈。LC组术后并发症的发生率显著低于MC组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜胆囊切除术较小切口胆囊切除术治疗老年胆囊结石更具有优势,值得临床广泛推广和应用。     

截分术在阻生齿拔除术中的应用

目的：探讨截分术在智齿拔除术中及术后的影响。方法：对临床206例阻生齿应用高速涡轮机截分后拔出，观察术后效果。结果：(1)术中有效时间减少，去除牙槽骨较少。(2)术后并发症如干槽症、出血、张口受限、颞颌关节疼痛等显著减少。结论：截分术在阻生齿拔除术中具有操作时间短，患者痛苦小等优点。