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1.
2.
背景 白内障的发生与氧化应激诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡有关,而BH3-only蛋白是凋亡机制启动的关键因素,其过程可能与c-Jun N末段激酶(JNK)通路激活有关,但氧化应激诱导的LECs凋亡与JNK通路的关系尚未完全阐明.目的 探讨JNK/c-Jun通路及其靶基因Bim与PUMA在氧化应激诱导的LECs凋亡中的作用.方法 将人LECs系HLEC-B3在含质量分数10%胎牛血清的DMEM培养基中培养和传代.将80%融合的细胞接种在24孔板并随机分为无H2O2或H2O2(50 μmol/L)处理4、8、12h组,Hoechst 33258染色观察细胞形态并计数细胞凋亡率,采用Western blot法检测各组HLEC-B3细胞中JNK/c-Jun通路的激活情况和Bim、PUMA蛋白的表达水平,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测c-Jun、Bim、PUMA mRNA在HLEC-B3细胞中的表达.在H2O2处理的细胞培养基中加入JNK/c-Jun通路抑制剂CEP11004或SP600125处理4h,以无H2O2或H2O2+DMSO处理的细胞分别作为阴性和阳性对照组,Hoechst 33258染色观察各组LECs的凋亡情况并检测JNK/c-Jun通路的激活情况和Bim、PUMA蛋白的表达.当培养细胞达60%融合时,将200 pmol/L的Bim或PUMA小分子干扰片段转染细胞24 h,然后用H2O2处理细胞采用Western blot法和RT-PCR法检测Bim、PUMA蛋白及其mRNA在HLEC-B3细胞中的表达.结果 H2O2处理HLEC-B3 4、8、12h后,其细胞凋亡率的总体比较差异有统计学意义(F=1909.433,P=0.000),H2O2处理HLEC-B3 4、8、12h细胞凋亡率分别为(4.30±1.15)%、(27.08±0.74)%和(46.59±0.91)%,与无H2O2处理组(2.74±0.21)%比较差异均有统计学意义(P=0.049、0.000、0.000).与无H2O2处理组比较,不同时间H2O2处理组JNK/c-Jun通路的激活和Bim、PUMA蛋白及其mRNA在HLEC-B3细胞中的表达强度均明显增加;加入CEP11004或SP600125后,上述因子表达下调,与DMSO培养组比较凋亡率显著下降,差异均有统计学意义(均P=O.000).转染Bim或PUMA小分子干扰片段后,H2O2处理HLEC-B3 12 h组的细胞凋亡率明显高于Bim基因敲除组和PUMA基因敲除组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 H2O2诱导JNK激活并引起Bim、PUMA和c-Jun蛋白及其mRNA表达上调,其作用呈时间依赖性;抑制JNK/c-Jun通路及干扰Bim或PUMA的表达能对H2O2诱导的人LECs的凋亡起保护作用. 相似文献
3.
目的探索神经生长因子(NGF)对培养的人巩膜成纤维细胞(HSF)生长及胶原蛋白合成的影响。方法采用MTT比色法和流式细胞仪(FCM)分析技术,观察不同质量浓度NGF(10、25、50、100、200ng/ml)对HSF增殖和细胞生长周期的影响,氯胺T法检测胶原蛋白。结果NGF能促进HSF增殖,呈剂量依赖性,质量浓度为100ng/ml时作用最明显。NGF作用后,HSF的G0~G1期百分比降低,而S期百分比显著升高,增殖指数增高。NGF对HSF的胶原合成具有明显的促进作用,并呈剂量依赖性。结论外源性NGF可以促进体外培养的HSF增殖及胶原合成。 相似文献
4.
目的观察连续玻璃体腔内注射Bevacizumab治疗糖尿病性黄斑水肿(DME)的临床疗效及安全性。方法患者46例56眼,经眼底检查、视网膜血管荧光造影(FFA)、光学相干断层扫描(OCT)确诊为糖尿病性黄斑水肿。患者年龄26~74岁,平均(56±9)岁。治疗前平均logMAR最佳矫正视力为1.012±0.42,黄斑中心凹厚度平均(576±136)μm,分别接受连续玻璃体腔内注射Bevacizumab 1.25 mg(0.05 ml)3~5次,平均(4±1)次,每次间隔1个月。治疗后随访6~12个月,平均(9±3)个月。对比治疗前后视力、眼压、黄斑中心凹厚度及FFA改变。结果 46例患者随访6~12个月,平均logMAR最佳矫正视力提高到0.65±0.44,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中36眼logMAR最佳矫正视力提高2行或以上,占64.29%。OCT示:黄斑中心凹厚度降低到(275±103)μm,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗过程中未发现严重不良反应。结论连续玻璃体腔内注射Bevacizumab 1.25 mg(0.05 ml)治疗糖尿病性黄斑水肿能明显改善视功能,减轻黄斑水肿,未发现严重不良反应。 相似文献
5.
我所1935年由内蒙海拉尔引进蒙古旱獭(MarmotaSibirica Radde)70只,做为乙型肝炎动物模型。除实验利用及病亡外,现剩41只。1989年1月发现有31只发生眼内葡萄膜炎。一、检查方法及发病率;1989年3月20日至4月13日,对这批旱獭进行系统的眼科检查,包括眼外常规检查、眼底检查及裂隙灯眼前段及玻璃体检查。 相似文献
6.
该研究回顾经Lasik连续治疗的 1 5 5 4眼(878例近视 )。患者平均年龄 3 3 0 9± 8 6岁(2 0~ 60岁 )。术前均行全面详细检查 ,排除曾行眼部手术、青光眼、角膜病和眼外伤的病例。术前平均屈光度为 -1 3 5 2± 3 3 8D (-8 0 0D~ -2 7 5 0D) ,最佳矫正视力≥ 0 1 ,眼前段正常。在Lasik治疗之前 ,对具有视网膜脱离倾向的 2 1 7眼先行氩激光光凝 ,其中 ,1 0 9眼有格子样变性 ,77眼有萎缩性裂孔 ,3 1眼有瓣撕裂。玻璃体后脱离有 42 3眼 (2 7 2 2 % )。术后平均随访 3 0 3 4± 1 0 2 7个月 (1 6~ 5 4个月 )。该组Lasik… 相似文献
7.
目的:研究表明,体内一定浓度的生长因子是保证眼球正常发育的必要条件,过少或过量都会引起巩膜的异常改变。实验拟进一步验证胰岛素样生长因子Ⅰ对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞生长的影响。
方法:实验于2006-09/2007-03在郑州大学基础医学院省肿瘤病理学重点实验室完成。①实验材料:出生3 d内3色豚鼠后部巩膜组织由郑州大学基础医学院动物实验中心提供;实验用胰岛素样生长因子Ⅰ 为Sigma公司产品。②实验过程及评估:采用器官组织块培养法获取原代巩膜成纤维细胞,选取传3,4代的豚鼠巩膜成纤维细胞用于实验;采用倒置相差显微镜下观察细胞形态并采用免疫化学染色法进行细胞鉴定;应用四甲基偶氮唑盐比色法和流式细胞仪分析技术,观察不同质量浓度胰岛素样生长因子Ⅰ (0.1,0.5,5,10,50 μg/L )对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和细胞生长周期的影响。
结果:①巩膜成纤维细胞鉴定:倒置相差显微镜下观察,细胞透亮呈梭形,在细胞密度较低时细胞排列成网状,密度较高时呈束状;波形蛋白染色阳性。胞浆内可见棕黄色阳性反应产物, 证实所培养的细胞为巩膜成纤维细胞。②体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和细胞生长周期:0.5,5,10 μg/L的胰岛素样生长因子Ⅰ能促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(F = 84.510,P =0.000 < 0.05),最佳质量浓度为10 μg/L。流式细胞仪结果显示, 胰岛素样生长因子Ⅰ处理48 h后,与对照组比较,巩膜成纤维细胞G0~G1期百分比降低(78.2%下到64.5%,P < 0.05),而S期百分比显著升高(10.4%上升到16.4%,P < 0.05),增殖指数百分比增高(27.8%增高到56.5 %,P < 0.05)。
结论: 在一定浓度范围内外源性胰岛素样生长因子Ⅰ可以促进体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖。 相似文献
8.
本文对1227例共1395只眼的 B 型超声诊断进行分析。其中眼内异物占20.29%;玻璃体积血15.56%;视网膜脱离12.76%;玻璃体机化膜形成10.25%;无晶体眼8.24%,视网膜母细胞瘤3.15%;眼球萎缩实变2.80%。较少见疾病有巩膜后葡萄肿、晶体后纤维增生、品状体脱位、玻璃体囊虫病、原始玻璃体残留组织增生症等。白内障术前计算人工晶体屈光力286例(20.50,6),用 SRK-Ⅱ公式测算所需人工晶体屈光力平均值为+18.01D。分析了主要病种年龄、性别构成与临床发病特点的关系,并对 SRK-Ⅱ公式的实用价值及少见疾病的声象特征进行了讨论。 相似文献
9.
10.
为开发计算机技术在眼外伤临床医疗和科研方面的应用,选择1981~1991年本院眼科住院病人11985例中的眼外伤患者4210例作为研究对象,运用系统科学的方法和计算机应用技术,设计调查表格,浓缩病案,把有用的临床资料信息代码化输入计算机,建立数据库。编制相应的软件系统,按临床科研的需求进行信息资料处理与加工。结果:该系统储存数据符号约400000个,完成图表100多个。初步研究中设计科研课题10余项,撰写有关学术论文10多篇。结果表明:系统的建立如同架设临床科研计算机之间的多功能桥梁,并可拓展到临床多学科、多病种,为医学专家和计算机人员开辟新的合作领域。 相似文献