神经生长因子对人巩膜成纤维细胞生长及胶原蛋白合成的影响

目的探索神经生长因子（NGF）对培养的人巩膜成纤维细胞（HSF）生长及胶原蛋白合成的影响。方法采用MTT比色法和流式细胞仪（FCM）分析技术，观察不同质量浓度NGF（10、25、50、100、200ng／ml）对HSF增殖和细胞生长周期的影响，氯胺T法检测胶原蛋白。结果NGF能促进HSF增殖，呈剂量依赖性，质量浓度为100ng／ml时作用最明显。NGF作用后，HSF的G0～G1期百分比降低，而S期百分比显著升高，增殖指数增高。NGF对HSF的胶原合成具有明显的促进作用，并呈剂量依赖性。结论外源性NGF可以促进体外培养的HSF增殖及胶原合成。     

上巩膜静脉电凝建立大鼠慢性高眼压模型

目的 建立大鼠稳定持久的慢性高眼压模型. 方法 健康成年Wistar大鼠40只,术前眼压(15.13±1.48)mmHg,用高频电刀上的单极电凝器阻断右眼12～6点处的3条巩膜上静脉(左眼为对照眼). 结果 术后1周,大鼠眼压升高为(25.72±3.54)mmHg,与术前相比,P<0.01;术后4周眼压为(24.52±3.15)mmHg,仍高于左眼的(15.53±1.54)mmHg,二者相比,P<0.01. 结论 上巩膜静脉电凝可建立稳定持久的大鼠慢性高眼压模型.     

玻璃体内注射康柏西普联合手术治疗伴玻璃体积血的新生血管性青光眼

目的　观察玻璃体内注射康柏西普联合手术治疗伴玻璃体积血的新生血管性青光眼的临床疗效。方法　收集２０１４年６月至２０１６年２月在我院就诊、经药物无法控制眼压并伴有玻璃体积血的新生血管性青光眼患者１６例（１６眼）,均玻璃体内注射康柏西普注射液０．５ｍｇ（０．０５ｍＬ）,于玻璃体内注药后５～７ｄ行玻璃体切割联合小梁切除术,部分晶状体混浊者行晶状体切除术,术后行广泛视网膜激光光凝术。玻璃体内注射后１周、１个月、３个月、６个月随访复诊,观察最佳矫正视力、眼压及新生血管消退情况。结果　术前最佳矫正视力（标准对数视力）为３．１８±０．４０,术后１周、１个月、３个月、６个月最佳矫正视力分别为３．１７±０．３６、３．６２±０．２９、３．８８±０．３７、３．９１±０．３９,差异有统计学意义（Ｆ＝１４．１１４,Ｐ＝０．０００）;术后１周与治疗前比较,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）;术后１个月、３个月、６个月与治疗前比较均明显提高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术前眼压为（４７．３９±７．０５）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）,术后１周、１个月、３个月、６个月眼压分别为（２８．７９±４．３５）ｍｍＨｇ、（２１．７６±３．３６）ｍｍＨｇ、（１９．９７±３．３０）ｍｍＨｇ、（１８．６１±３．２１）ｍｍＨｇ,差异有统计学意义（Ｆ＝１２９．０００,Ｐ＝０．０００）;术后１周、１个月、３个月、６个月与治疗前比较均明显降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。末次随访时,最佳矫正视力明显提高者１４眼,提高不明显者２眼;眼压完全控制者１４眼,眼压再次出现轻度升高者２眼。玻璃体内注药后５～７ｄ,１５眼虹膜及前房新生血管完全消失,１眼虹膜表面残留少许新生血管。随访期间所有患者未发生与玻璃体内注射康柏西普相关的眼部及全身并发症。结论　玻璃体内注射康柏西普联合玻璃体切割、小梁切除术及术后行广泛视网膜激光光凝术治疗伴玻璃体积血的新生血管性青光眼安全有效,能够有效控制眼压并能不同程度提高术后视力。     

Effects of blocking activation of IGF-1-Stat3 signaling pathway in guinea pig sclera fibroblast by AG490 on expression of MMP-2 and Integrinβ1

Objective To explore the effect of Blocking activation of IGF-1-Stat3 signaling pathway in guinea pig sclera fibroblast (GSFs) by AG490 on expressions of MMP-2, Integrinβ1. Methods Cultured GSFs were divided into four groups: group A( control group: only DMEM without IGF-1 ), group B (only IGF-1 group), group C( IGF-1 + PBS group), group D( IGF-1 +25 μmol/L AG490 group). The expressions of Stat3, p-Stat3, MMP-2, Integrinβ1 protein induced by IGF-1 and inhibited by AG490 in GSFs were detected by Western blot. The levels of Stat3, MMP-2 and Integrinβ1mRNA were detected by RTPCR. Results Compared with Groups A and D, Stat3, p-Stat3, MMP-2 protein expression in groups B and C were expressed at higher level ( tpr = - 32. 324, - 26. 284, - 32. 876, - 26. 345, - 68. 668, - 58. 724,- 187.481, - 58. 842, - 110. 264, - 120. 256, - 121. 345, - 120. 286; tmRNA = - 31. 554, - 31. 178,- 31. 286, - 31.198, - 12. 076, - 14. 969, - 11. 896, - 14. 546, P ＜ 0. 05 ), but the expression levels were not obviously different between groups B and C (tp = -32.720, -32. 816, -68.668, -187.481,- 110. 264, - 121. 345; tmRNA = - 0. 692, - 0. 579, P ＞ 0. 05 ), which were similar to mRNA level. The Integrinβ1 protein and mRNA were expressed in groups A, B, C and D but no significant difference among them respectively (Fpr =0.214;FmRNA = 0.045,P ＞0.05). Conclusions Activation of Stat3 signaling pathway may be involved in up-modulating the expression of MMP-2 in GSFs, and not affect the Integrinβ1protein and mRNA changes. The results reveal that Stat3 signaling transduction pathway may play a critical role in sclera remodeling by means of modulating MMP-2 expression.     

胰岛素样生长因子Ⅰ对豚鼠巩膜成纤维细胞增殖的影响☆

目的：研究表明，体内一定浓度的生长因子是保证眼球正常发育的必要条件，过少或过量都会引起巩膜的异常改变。实验拟进一步验证胰岛素样生长因子Ⅰ对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞生长的影响。 方法：实验于2006-09/2007-03在郑州大学基础医学院省肿瘤病理学重点实验室完成。①实验材料：出生3 d内3色豚鼠后部巩膜组织由郑州大学基础医学院动物实验中心提供；实验用胰岛素样生长因子Ⅰ 为Sigma公司产品。②实验过程及评估：采用器官组织块培养法获取原代巩膜成纤维细胞，选取传3，4代的豚鼠巩膜成纤维细胞用于实验；采用倒置相差显微镜下观察细胞形态并采用免疫化学染色法进行细胞鉴定；应用四甲基偶氮唑盐比色法和流式细胞仪分析技术,观察不同质量浓度胰岛素样生长因子Ⅰ (0.1，0.5，5，10，50 μg/L )对体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和细胞生长周期的影响。 结果：①巩膜成纤维细胞鉴定：倒置相差显微镜下观察,细胞透亮呈梭形，在细胞密度较低时细胞排列成网状,密度较高时呈束状；波形蛋白染色阳性。胞浆内可见棕黄色阳性反应产物, 证实所培养的细胞为巩膜成纤维细胞。②体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和细胞生长周期：0.5，5，10 μg/L的胰岛素样生长因子Ⅰ能促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(F = 84.510，P =0.000 < 0.05)，最佳质量浓度为10 μg/L。流式细胞仪结果显示, 胰岛素样生长因子Ⅰ处理48 h后,与对照组比较，巩膜成纤维细胞G0~G1期百分比降低（78.2%下到64.5%，P < 0.05）,而S期百分比显著升高（10.4%上升到16.4%，P < 0.05）,增殖指数百分比增高（27.8%增高到56.5 %，P < 0.05）。 结论： 在一定浓度范围内外源性胰岛素样生长因子Ⅰ可以促进体外培养的豚鼠巩膜成纤维细胞增殖。     

近视眼Lasik术后视网脱离

该研究回顾经Ｌａｓｉｋ连续治疗的 1 5 5 4眼(878例近视 )。患者平均年龄 3 3 0 9± 8 6岁(2 0～ 60岁 )。术前均行全面详细检查 ,排除曾行眼部手术、青光眼、角膜病和眼外伤的病例。术前平均屈光度为 -1 3 5 2± 3 3 8Ｄ (-8 0 0Ｄ～ -2 7 5 0Ｄ) ,最佳矫正视力≥ 0 1 ,眼前段正常。在Ｌａｓｉｋ治疗之前 ,对具有视网膜脱离倾向的 2 1 7眼先行氩激光光凝 ,其中 ,1 0 9眼有格子样变性 ,77眼有萎缩性裂孔 ,3 1眼有瓣撕裂。玻璃体后脱离有 42 3眼 (2 7 2 2 % )。术后平均随访 3 0 3 4± 1 0 2 7个月 (1 6～ 5 4个月 )。该组Ｌａｓｉｋ…     

旱獭葡萄膜炎病例调查

我所1935年由内蒙海拉尔引进蒙古旱獭(MarmotaSibirica Radde)70只,做为乙型肝炎动物模型。除实验利用及病亡外,现剩41只。1989年1月发现有31只发生眼内葡萄膜炎。一、检查方法及发病率;1989年3月20日至4月13日,对这批旱獭进行系统的眼科检查,包括眼外常规检查、眼底检查及裂隙灯眼前段及玻璃体检查。     

应激活化蛋白激酶信号通路及其靶基因对氧化应激诱导的人晶状体上皮细胞凋亡的影响

背景 白内障的发生与氧化应激诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡有关,而BH3-only蛋白是凋亡机制启动的关键因素,其过程可能与c-Jun N末段激酶(JNK)通路激活有关,但氧化应激诱导的LECs凋亡与JNK通路的关系尚未完全阐明.目的 探讨JNK/c-Jun通路及其靶基因Bim与PUMA在氧化应激诱导的LECs凋亡中的作用.方法 将人LECs系HLEC-B3在含质量分数10％胎牛血清的DMEM培养基中培养和传代.将80％融合的细胞接种在24孔板并随机分为无H2O2或H2O2(50 μmol/L)处理4、8、12h组,Hoechst 33258染色观察细胞形态并计数细胞凋亡率,采用Western blot法检测各组HLEC-B3细胞中JNK/c-Jun通路的激活情况和Bim、PUMA蛋白的表达水平,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测c-Jun、Bim、PUMA mRNA在HLEC-B3细胞中的表达.在H2O2处理的细胞培养基中加入JNK/c-Jun通路抑制剂CEP11004或SP600125处理4h,以无H2O2或H2O2+DMSO处理的细胞分别作为阴性和阳性对照组,Hoechst 33258染色观察各组LECs的凋亡情况并检测JNK/c-Jun通路的激活情况和Bim、PUMA蛋白的表达.当培养细胞达60％融合时,将200 pmol/L的Bim或PUMA小分子干扰片段转染细胞24 h,然后用H2O2处理细胞采用Western blot法和RT-PCR法检测Bim、PUMA蛋白及其mRNA在HLEC-B3细胞中的表达.结果 H2O2处理HLEC-B3 4、8、12h后,其细胞凋亡率的总体比较差异有统计学意义(F=1909.433,P=0.000),H2O2处理HLEC-B3 4、8、12h细胞凋亡率分别为(4.30±1.15)％、(27.08±0.74)％和(46.59±0.91)％,与无H2O2处理组(2.74±0.21)％比较差异均有统计学意义(P=0.049、0.000、0.000).与无H2O2处理组比较,不同时间H2O2处理组JNK/c-Jun通路的激活和Bim、PUMA蛋白及其mRNA在HLEC-B3细胞中的表达强度均明显增加;加入CEP11004或SP600125后,上述因子表达下调,与DMSO培养组比较凋亡率显著下降,差异均有统计学意义(均P=O.000).转染Bim或PUMA小分子干扰片段后,H2O2处理HLEC-B3 12 h组的细胞凋亡率明显高于Bim基因敲除组和PUMA基因敲除组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 H2O2诱导JNK激活并引起Bim、PUMA和c-Jun蛋白及其mRNA表达上调,其作用呈时间依赖性;抑制JNK/c-Jun通路及干扰Bim或PUMA的表达能对H2O2诱导的人LECs的凋亡起保护作用.     

Monovision的概念及其矫正老视的应用

Monovision（MV）概念已经有几十年的历史，应用于老视的矫正也有三十多年了，主要以接触镜应用最为广泛，近些年来随着屈光手术的广泛开展，应用MV技术设计手术矫正老视渐渐受到手术医生的青睐。     

晶状体和玻璃体切除术后二期后房型人工晶状体植入术疗效观察

目的 评价晶状体和玻璃体切除术后二期后房型人工晶状体植入术的疗效。方法 对42例晶状体和玻璃体切除术后3个月至6年的眼外伤患者行人工晶状体植入术。采用颞下方平坦部巩膜灌注，最大限度地利用残存的晶状体前囊为依托的二期后房型人工晶状体植入术。术后随访3个月以上。结果 无严重远期并发症，所有患者均达到或超过术前最佳矫正视力。术后裸眼视力0．2～0．4者10眼，0．5～0．9者28眼，≥1．0者4眼。结论 晶状体和玻璃体切除术后二期后房型人工晶状体植入术安全可靠，是目前矫正晶状体和玻璃体切除术后屈光不正的较好方法。