神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的保护作用

目的　探讨神经生长因子偶联物 (NGF -Tf)对老年性痴呆 (AD)大鼠的影响 .方法　以手术切断大鼠双侧隔 -海马胆碱能通路的方法建立AD动物模型 ,每天从大鼠尾静脉注射NGF -Tf .通过水迷路试验观察大鼠的记忆和方向辨别能力 ;对海马和隔区行神经组织学检查 ;应用酶组织化学技术显示相应区域的ChAT ,采用计算机病理图像分析系统测定酶活性以判断其胆碱能功能状态 .结果　水迷路试验中 ,NGF -Tf组在 10s内抵达平台的正确反应平均数提高 (p <0 .0 5 ) .光镜下 ,NGF -Tf组隔区仅见轻微萎缩性改变 ,而模型组隔区萎缩性改变较明显 ,表现为神经元数目明显减少 ,细胞轮廓不清 ,有胶质细胞增生 ;正常对照组、NGF -Tf组和模型组的海马区未见明显病理性改变 .ChAT染色统计结果显示 ,正常对照组、NGF -Tf组大鼠的海马区及隔区IOD值与模型组比较 ,均有显著性差异 (p <0 .0 1) .结论　NGF -Tf能穿透血脑屏障 ,有效防止模拟AD病变的大鼠的基底前脑胆碱能神经元的变性和死亡 ,改善其记忆和方向辨别能力 ,促进其胆碱能神经元的功能恢复     

双抗体夹心-酶联免疫吸附法测定家兔血清中短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白的浓度及其药动学研究

目的:建立测定家兔血清中短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白(PBAP)浓度的方法,并考察其药动学特征。方法:取家兔随机分为低、高剂量组(短尾蝮蛇毒PBAP,0.4、0.8mg·kg-1)和阴性对照组(生理盐水),每组5只,耳缘静脉单次给予相应药物,给药前及给药后1、5、15、30、60、120、240、480min分别从颈总动脉取血,加入到短尾蝮蛇毒PBAP抗体包被酶标板(浓度为100μg·mL-1)中,以给药前的正常血清作为空白对照,用双抗体夹心-酶联免疫吸附(ELISA)法测定不同时间点血清中短尾蝮蛇毒PBAP的浓度,并用DAS2.0软件计算其药动学参数。结果:短尾蝮蛇毒PBAP检测浓度的线性范围为0.0024～10μg·mL-(1r=0.9703),平均回收率为98.78%,平均板内变异系数为7.96%,平均板间变异系数为10.94%;低、高剂量短尾蝮蛇毒PBAP的主要药动学参数分别为t1/2α(9.553±4.668)、(9.873±1.433)min,t1/2β(201.295±66.060)、(205.798±76.834)min,cmax(0.685±0.160)、(2.333±0.478)mg·L-1,AUC0～∞(27.114±2.781)、(61.625±11.631)mg·min·L-1。结论:ELISA法准确、灵敏、特异性强,可用于短尾蝮蛇毒PBAP在家兔血清中的药动学研究。     

α-银环毒素-转铁蛋白偶联物镇痛作用的研究

目的 研究α-银环毒素-转铁蛋白偶联物镇痛作用。方法 应用生物素-亲和素桥联作用，使-α-银环毒素（α-BGT）与转铁蛋白（transferrin)偶联，形成偶联物（Tf-α-BGT）。采用小鼠热板法测定Tf-α-BGT的镇痛作用以及阿托品，甲基阿托品对其镇痛作用的影响。用荧光示踪实验观察其在中枢神经系统（CNS）中的结合位点。结果 Tf-α-BGT可通过血脑屏障产生中枢镇痛作用，阿托品能部分拮抗其镇痛作用，甲基阿托品对其镇痛作用的影响无显著差异。结论 Tf-α-BGT经受体转运透过血脑屏障产生中枢性镇痛作用，该镇痛作用可能与AchR有关。     

定量检测内毒素的火箭电泳鲎试验法的建立及评价

用亚洲鲎血细胞溶解物中凝固蛋白原的抗血清建立的火箭电泳鲎试验法,适用于定量检测血中内毒素。该实验观察了标示灵敏度不同的鲎试剂与内毒素反应的曲线,以及保温时间和反应体积比对检测灵敏度的影响。采用氨甲酰化抗体免疫电泳系统和高压电泳技术,可缩短电泳时间2h,标示灵敏度为1.0Eu/ml、0.5Eu/ml和0.25Eu/ml的鲎试剂在本法的检测低限分别为0.06Eu/ml、0.03Eu/ml和0.007Eu/ml。检测不受样品色素或混浊的干扰。     

一种检测凝血酶、类凝血酶的新方法—纤维蛋白原平板法

目的：创建一种定量检测凝血酶（Thrombin）、类凝血酶（Thrombin-likeenzymes）活性的新方法—纤维蛋白原平板法。方法：采用纤维蛋白原作为底物，用琼脂糖与纤维蛋白原制作成纤维蛋白原平板，以凝血酶、类凝血酶标准品分别在该平板上的扩散反应，制作相应的标准曲线及回归曲线，并对凝血酶、类凝血酶活性作定量测定。结果：本法制作的凝血酶、类凝血酶检测标准曲线具有良好的线性关系（r=0.9994、r=0.9997）。结论：纤维蛋白原平板法可用于凝血酶、类凝血酶定量测定。具有操作简便、直观、稳定、敏感度高，不受检品浊度或颜色干扰且成本低廉等特点。     

菲牛蛭素体内外抗凝实验研究

目的:研究广西菲牛蛭中提取的两种菲牛蛭素--菲牛蛭素A(Bufrudin A,BA)和菲牛蛭素B(Bufrudin B,BB)在人体外及动物体内的抗凝作用.方法:观察菲牛蛭素在人体外及动物体内对部分活化凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响.结果:在体内外实验中,BA、BB均能明显延长活化部分APTT、PT及TT,但两者的三个指标有明显差异性,其中BA对TT的作用最显著,BB则对PT的作用更强.结论:广西菲牛蛭中的抗凝物质BA、BB在体内外均有较强的抗凝活性.     

短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白的酶学性质研究

目的:研究短尾蝮蛇毒磷脂结合抗凝蛋白(Phospholipid-binding anticoagulation protein,PBAP)的酶学性质.方法:通过对短尾蝮蛇毒PBAP精氨酸脂酶活性的测定,研究丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(Phenylmethanesulfonyl fluoride,PMSF)、胰蛋白酶、抑肽酶、二价金属离子(Ca2+、Mg2+、Co2+、Mn2+、Zn2+)、温度、pH、金属络合剂乙二胺四乙酸(Ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)对PBAP的影响.结果:丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF、胰蛋白酶对PBAP精氨酸酯酶有抑制作用.抑肽酶、Ca2+、M2+、Co2+、Mn2+、Zn2+、二胺四乙酸对PBAP精氨酸酯酶活性无明显影响,温度在20℃～90℃,pH在4.0～11.0的条件下,PBAP的精氨酸酯酶性质稳定.结论:丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF、胰蛋白酶对PBAP精氨酸酯酶有抑制作用,温度在20℃～90℃,pH在4.0～11.0的条件下,PBAP的精氨酸酯酶性质稳定.     

神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的保护作用

目的探讨神经生长因子偶联物(NGF-Tf)对老年性痴呆(AD)大鼠的影响.方法以手术切断大鼠双侧隔-海马胆碱能通路的方法建立AD动物模型,每天从大鼠尾静脉注射NGF-Tf.通过水迷路试验观察大鼠的记忆和方向辨别能力;对海马和隔区行神经组织学检查;应用酶组织化学技术显示相应区域的ChAT,采用计算机病理图像分析系统测定酶活性以判断其胆碱能功能状态.结果水迷路试验中,NGF-Tf组在10s内抵达平台的正确反应平均数提高(p<0.05).光镜下,NGF-Tf组隔区仅见轻微萎缩性改变,而模型组隔区萎缩性改变较明显,表现为神经元数目明显减少,细胞轮廓不清,有胶质细胞增生;正常对照组、NGF-Tf组和模型组的海马区未见明显病理性改变.ChAT染色统计结果显示,正常对照组、NGF-Tf组大鼠的海马区及隔区IOD值与模型组比较,均有显著性差异(p<0.01).结论 NGF-Tf能穿透血脑屏障,有效防止模拟AD病变的大鼠的基底前脑胆碱能神经元的变性和死亡,改善其记忆和方向辨别能力,促进其胆碱能神经元的功能恢复.     

可口革囊星虫多糖的提取及含量测定

目的建立可口革囊星虫中多糖的提取及其含量测定方法。方法用水提法提取可口革囊星虫多糖,用苯酚-硫酸比色法测定多糖含量,检测波长为490 nm。结果葡萄糖进样质量浓度在10.0～70.7μg/mL范围内与吸光度线性关系良好,r=0.998 8;可口革囊星虫中多糖含量为15.85%,方法平均回收率为94.61%,RSD=1.87%(n=6)。结论所建立的方法简便、准确、重现性好,可用于可口革囊星虫多糖含量的测定。     

“广西蛇药”治疗各种毒蛇咬伤506例临床疗效观察

我区位于亚热带,四季温度相差不大,较适合蛇类的生长和繁殖。夏秋季节毒蛇活动频繁,时有伤人,威胁人群健康。为了研制有效的蛇药,从1976年起,成立了“广西蛇药协作组”,将历年收集到的民间蛇药进行筛选,通过动物试验,将有效的几种草药组方,配成了“广西蛇药”。1977年开始应用于临床,至1979年10月止先后在南宁、河池、桂林、梧州、玉林等七个地区、三十个县市进行治疗观察。用“广西蛇药”治疗的患者506人。其中危重病人58例(银环蛇伤6、眼镜蛇伤27、金环蛇伤2、竹叶青蛇伤14、蝰蛇伤6、百步蛇伤2、眼镜王蛇伤1),除4例眼镜蛇伤、3