视网膜发育基因Six3表达载体的构建

目的:Six3在视网膜发育中起着关键性的调节作用,然而商品化的Six3 表达载体尚鲜见,本研究拟以 pBaBb-puro为骨架,构建Six3真核表达载体.方法:以新生乳鼠眼 cDNA 为模板,通过 PCR扩增出Six3 编码序列,经酶切后,用T4 DNA连接酶将其与pBaBb-puro进行连接,经过转化、筛选后,进行酶...     

BrdU标记小鼠视网膜祖细胞的研究

为了探讨BrdU(5-Bromo-2′-deoxyuridine)体外标记视网膜祖细胞(RPCs)的适宜浓度,将不同浓度BrdU(0.2、1、5和10μmol/L)与小鼠孕龄(E)17.5dRPCs共培养48h后,进行增殖或分化培养。用免疫荧光检测BrdU标记百分率及细胞分化潜能,用细胞计数法检测其增殖能力,用乳酸脱氢酶(LDH)法检测其细胞毒性。结果发现,0.2μmol/L BrdU不能明显标记RPCs,而1、5和10μmol/L 3种浓度BrdU均可有效标记RPCs,且三者的标记率相近(P>0.05),1μmol/L BrdU无明显细胞毒性,对RPCs增殖、分化亦无明显影响,而5μmol/L和10μmol/L Br-dU均能抑制细胞增殖,并引起LDH释放增加,说明有明显的细胞毒性,10μmol/L BrdU还会阻碍RPCs向MAP2+神经元方向分化,但对其向GFAP+或glutamine synthetase+神经胶质细胞分化无明显影响。本研究表明,1μmol/L BrdU既能有效标记E17.5RPCs,又无显著毒副作用,是较适宜的浓度。     

儿童尿路感染的病原菌分布及耐药性分析

目的探讨儿童尿路感染的病原菌分布及药敏情况,以指导临床治疗。方法对2014年1月—2015年12月在本院门诊及住院治疗的尿路感染病儿2 233例留取中段尿标本进行细菌分离培养,VITEK-2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验。个别菌株用药敏纸片法进行药敏补充试验,并对革兰阴性菌进行产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。结果判读均严格按美国临床实验室标准化委员会制定的标准进行。结果 2 233例病儿送检标本检出病原菌484株,检出率为21.7%(484/2 233)。包括革兰阳性菌165株(34.1%),革兰阴性菌305株(63.0%),白假丝酵母菌14株(2.9%)。其中检出大肠埃希菌共158株(32.6%),肺炎克雷伯菌36株(7.4%)。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为61.4%、61.1%;两种菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦的耐药率<10%。检出铜绿假单胞菌39株(8.1%),铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦的耐药率均<10%。检出的革兰阳性菌中屎肠球菌122株(25.2%),粪肠球菌33株(6.8%),两种菌对万古霉素、利奈唑胺耐药率均为0。结论儿童尿路感染病原菌的构成仍以革兰阴性菌为主,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离率较高,临床应根据药敏结果合理选择抗生素。     

氯通道在不同生长周期的鼻咽癌细胞迁移中的作用

目的：研究不同生长周期的鼻咽癌低分化上皮细胞（CNE-2Z）的迁移能力及氯通道在迁移过程中所起的作用。 方法： 运用血清饥饿法、化学药物双阻断法、有丝分裂药物阻断及摇落法分别将CNE-2Z细胞同步化至细胞周期的G1、S、M期，流式细胞仪检测其同步化效果。结合应用迁移小室和图像分析法，测定迁移率。台盼蓝活细胞染色法测定药物的细胞毒性。 结果： 不同生长周期的细胞迁移能力不同，G1期细胞迁移能力最强，随后是M期， S期迁移能力最弱。氯通道阻断剂（ATP、NPPB、tamoxifen）抑制CNE-2Z细胞迁移，但不同的氯通道阻断剂对不同生长周期CNE-2Z细胞迁移的阻滞效应不相同。 结论： CNE-2Z细胞的迁移能力与其所在的生长周期密切相关，氯通道在各期CNE-2Z细胞的迁移过程中起着重要作用。     

小儿人毛滴虫性肠炎误诊2例

2例人毛滴虫性肠炎患儿临床分别因误诊为“肠痉挛”,“菌痢”而影响治疗 ,现报道如下。1　临床资料例 1,男 ,10岁。因反复发作性脐周腹痛 15 d就诊 ,伴纳差、消瘦、便秘 ,近 3d未排大便。曾诊为“肠痉挛”服解痉药物治疗无改善。追问病史 ,患儿系久居农村 ,有饮用沟渠中污水史。实验室检查 :血常规未见异常 ,经灌肠后做大便镜检见大量人毛滴虫滋养体而确诊。给予口服甲硝唑 10 mg/ kg.d1次顿服 ,用药1周后症状消失 ,大便镜检滴虫明显减少 ,治疗 2周后大便镜检未查见滴虫。随诊 1月无复发。例 2 ,男 ,7岁 ,因腹泻 10余天就诊。大便为黄稀粘液…     

渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖

目的:研究渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖的关系。方法:用MTT法检测在不同渗透压培养条件下低分化鼻咽癌细胞(CNE－2Z)的增殖能力,流式细胞仪测定细胞周期分布,活细胞图像分析测量细胞容积,台盼蓝拒染法检测细胞存活率。结果:高渗(370、440mOsmol/L)培养增大细胞容积和促进细胞增殖,细胞容积分别增大8.7%、27.8%,增殖率分别提高22.2%和33.9%;而低渗(160、230mOsmol/L)培养减小细胞容积和抑制增殖,细胞容积分别减小12.8%和4.1%,增殖率分别降低34.0%和15.6%;细胞容积与细胞增殖率呈正相关。非等渗长期培养条件下,细胞周期各时相分布没有显著差异。低渗培养降低细胞生存率。结论:胞外渗透压、细胞容积与鼻咽癌细胞增殖密切相关,低渗培养可能通过减小细胞容积、促进细胞死亡而抑制细胞增殖。     

ICU铜绿假单胞菌耐药性和消毒剂-磺胺耐药基因的检测及分析北大核心CSCD

目的了解医院ICU铜绿假单胞菌临床分离菌株的耐药特征,检测分析铜绿假单胞菌消毒剂-磺胺耐药基因的携带情况,为指导临床合理应用抗菌药物和合理调整消毒剂的使用提供参考依据。方法选取医院2015年6月-2016年6月ICU病房送检的住院患者包括血、尿、痰、胸腹水及分泌物等各类标本,共获得不重复患者的菌株105株,采用VITEK-2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定及药敏试验。结果 105株铜绿假单胞菌对头孢替坦、头孢唑林、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因耐药率高,均>95.0%;105株铜绿假单胞菌检测qac E△1-sul1基因阳性43株,阳性率40.95%。结论 ICU铜绿假单胞菌的耐药情况已非常严重,应加强对铜绿假单胞菌的耐药性监测,根据药敏结果合理使用抗菌药物,减少耐药株的产生;分离的铜绿假单胞菌qac E△1-sul1基因携带率较高,医院常用消毒剂对铜绿假单胞菌的灭菌效果良好,重症监护室应进一步加强耐消毒剂基因菌株的监控,并根据耐消毒剂情况合理调整消毒剂的使用,尽量避免应用季铵盐类和双胍类消毒剂,严格执行消毒隔离措施,控制医院感染的发生。     

青岛市不同群体献血者部分化验指标检测分析

自1998年10月开始实施《献血法》以来,青岛市除机采血小板外,临床用血已百分之百来自无偿献血。自1999年4月至2000年4月,共有50641人参加无偿献血。采集后血液全部用两种不同厂家试剂进行初、复检,按照卫生部《供血者体格检查标准》进行ALT、HBsAg、抗-UW、抗-HIV、梅毒检测,其结果分析如下:     

EB病毒感染与婴儿肝炎综合征的临床研究

目的探讨EB病毒(EBV)感染在婴儿肝炎综合征(IHS)发病中的作用。方法选取45例HIS患儿为研究组,40例健康婴儿为对照组。采用ELISA法检测研究组和对照组血清EBV衣壳抗原(VCA)IgM抗体,采用PCR法检测研究组和对照组外周血单核细胞及咽分泌物中的EBV DNA,并进行比较分析。结果研究组45例患儿中有7例血清VCA-IgM抗体阳性,阳性率为15·6%;对照组40例婴儿血清VCA-IgM抗体均为阴性,两者间差异有统计学意义(P<0·05);研究组与对照组的外周血单核细胞EBV DNA的阳性率间差异有统计学意义(P<0·05),咽分泌物EBV DNA的阳性率间差异亦有统计学意义(P<0·01)。结论EBV感染是IHS的重要病因,由EBV感染导致的婴儿肝脏损害应引起临床高度重视。