人参皂苷Rh2对LoVo细胞迁移和转移能力的影响及机制研究

【目的】探讨人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力的影响。【方法】通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度Rh2对Lo Vo细胞增殖的影响,并确定用于研究抑制Lo Vo细胞迁移和转移功能作用的Rh2浓度和作用时间。设置空白对照组及Rh2实验组(5、10、20、40、60μmol/L),通过划痕试验,对Lo Vo细胞划痕加药处理24 h后,观察不同浓度Rh2对细胞迁移的影响。采用Transwell法观察不同浓度Rh2对细胞转移的影响。采用Western blot检测不同浓度Rh2对CD44、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)、E-Cadherin和β-catenin表达水平的影响。【结果】MTT结果显示:0~40μmol/L Rh2处理Lo Vo细胞24 h对其生长无明显影响。随Rh2作用时间的延长和浓度的增加,Rh2对Lo Vo细胞抑制作用逐步增强。划痕试验和Transwell结果表明:随着Rh2浓度增加,其对Lo Vo细胞迁移和转移能力的抑制作用增强,20μmol/L以上浓度的Rh2处理Lo Vo细胞24 h与空白对照组比较具显著抑制作用。Western blot结果表明:随着Rh2浓度的升高,CD44、MMP2蛋白表达水平下降,TIMP2、E-Cadherin和β-catenin蛋白表达水平上升。【结论】人参皂苷Rh2对人结肠癌Lo Vo细胞迁移和转移能力有抑制作用,其抑制作用具有时间和浓度依赖性。     

神经节苷脂GM1对新生大鼠缺氧缺血性脑病的作用研究

目的探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)及其后的癫痫发作是否具有保护和预防作用以及可能作用机理,为临床应用GM1治疗HIE提供理论依据. 方法建立新生大鼠HIE模型,用组织化学方法和免疫组织化学方法观察缺氧缺血后脑损害的形态学改变、兴奋性氨基酸Glu阳性(Glu-IR)神经元和抑制性氨基酸GABA阳性(GABA-IR)神经元表达和GM1对上述变化的影响. 结果盐水处理组与GM1治疗组相比病变较重, Glu-IR神经元和GABA-IR神经元数目减少与GMI治疗组差异有显著性意义. 结论 GM1能够在一定程度上减轻新生大鼠缺氧缺血后病损灶,保护Glu-IR神经元和GABA-IR神经元,尤其是对GABA-IR神经元的保护作用,提示GM1对新生大鼠缺氧缺血后的癫痫发作具有一定的预防作用,但尚需进一步探讨研究.     

针刀疗法对缺血缺氧性脑损伤幼鼠胶质纤维酸性蛋白表达的影响

[目的]观察针刀疗法对缺血缺氧性脑损伤幼鼠胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.[方法]选用7日龄新生SD大鼠随机分为针刀组、模型组、假手术组,针刀组于造模后2、9、16 d各治疗1次,造模后第17天通过悬吊试验观察缺血缺氧性幼鼠随意运动,并采用苏木精-伊红(HE)及免疫组织化学染色观察缺血缺氧性幼鼠脑组织的病理变化和GFAP表达.[结果](1)悬吊试验评分结果显示:模型组评分显著降低,与假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.05),表明模型组随意运动有异常;针刀组与假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05),表明针刀组随意运动接近正常.(2)HE染色显示:模型组病侧脑组织神经细胞水肿、变性、坏死显著,针刀组上述病理变化有所减轻.GFAP免疫组织化学染色显示:模型组出现GFAP阳性细胞增生,染色较深,染色范围较广;针刀组GFAP阳性细胞增生减轻,染色变浅,染色范围亦变小;假手术组未见GFAP阳性细胞增生,染色浅,染色范围分布稀疏.定量分析结果显示:模型组阳性细胞面密度显著升高,与假手术组比较差异有统计学意义(P＜0.05);针刀组阳性细胞面密度显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05),表明针刀组GFAP表达较模型组显著减少.[结论]针刀疗法能够改善幼鼠缺血缺氧性脑损伤引起的随意运动障碍,减轻中枢神经细胞损伤和GFAP阳性细胞增生,下调GFAP表达.     

黄芩苷对巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β的影响

【目的】观察黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。【方法】体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,取生长良好的细胞进行接种。模型组加入LPS(终浓度为0.1μg/mL或5μg/mL)或重组抵抗素(终浓度为100 ng/mL);中药组加入不同浓度黄芩苷(终浓度为50、100μmol/L),预处理1 h,后加入LPS或抵抗素。24 h后吸取上清,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组IL-1β和抵抗素浓度,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测抵抗素mRNA表达。【结果】与正常组比较,LPS组促进了巨噬细胞分泌抵抗素,抵抗素mRNA表达上调,LPS和重组抵抗素均促进了巨噬细胞产生IL-1β(P<0.05或P<0.01)。黄芩苷高、低剂量组均可显著抑制IL-1β和抵抗素的浓度,且抑制抵抗素mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】黄芩苷可明显降低促炎因子产生的炎症反应,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

开启生物化学大门的钥匙——浅谈生物化学绪论教学

重视绪论教学,用这把钥匙为初学者开启一扇生物化学大门,为生物化学的学习建立良好开端,使学生学好生物化学,不断迎接生物化学的发展和挑战。     

神经节苷脂GM1对新生大鼠缺氧缺血性脑病的作用研究

目的 探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂（GM1）对新生大鼠缺氧缺血性脑病（HIE）及其后的癫痫发作是否具有保护和预防作用以及可能作用机理，为临床应用GM1治疗HIE提供理论依据。方法 建立新生大鼠HIE模型。用组织化学方法和免疫组织化学方法观察缺氧缺血后脑损害的形态学改变，兴奋性氨基酸Glu阳性（Glu-IR)神经元和抑制性氨基酸GABA阳性（GABA-IR）神经元表达和GM1对上述变化的影响。结果 盐水处理组与GM1治疗组相比病变较重，Glu-IR神经元和GABA-IR神经元数目减少与GMI治疗组差异有显著性意义。结论 GM1能够在一定程度上减轻新生大鼠缺氧拭岂血后病损灶，保护Glu-IR神经元和GABA-IR神经元，尤其是对GABA-IR神经元的保护作用，提示GM1对新生大鼠缺氧缺血后的癫痫发作具有一定的预防作用。但尚需进一步探讨研究。     

不同时窗针刺对脑瘫幼鼠海马CA1区神经元及脑组织神经生长因子表达的影响

目的 :观察针刺在不同时期介入对缺血缺氧性脑瘫幼鼠的治疗作用 ,并探讨其神经生化机制。方法 :7日龄新生大鼠随机分为A、B、C、D 4组 ,A、B组分别于造模后 48h、7d开始针刺 ,C为模型组 ,D为假手术对照组 ;7、14、2 1d时进行行为测试 ,2 1d时观察各组死亡率 ,测定脑重量 ,并观察脑大体和海马CA1区神经细胞的损伤状况以及脑组织神经生长因子 (NGF)的表达情况。结果 :①针刺可提高动物的存活率 ,以A组最明显 ,死亡率较C组下降 2 1.8%。缺血缺氧后 7d ,模型组大鼠前肢功能明显下降 ,至 2 1d时 ,A、B、C 3组前肢功能均显著改善 ,A组基本接近正常水平 ,但C组仍差于D组。缺血缺氧后 2 1d ,A、B、C组左脑半球呈程度不等的萎缩 ,各组左大脑重量有显著性差异。 4个组右侧海马CA1区锥体神经元数无显著差异 ,左侧则差异显著。②造模后2 1d ,各组NGF表达存在程度上的差异 ,A组NGF呈强阳性表达的数量最多 ,其次为B组、C组。PBS空白对照组结果为阴性。结论 :①针刺可早期介入治疗脑瘫 ,提高存活率 ,改善前肢功能 ,增加脑重 ,促进大脑发育 ,但头针在早期宜慎用。②针刺提高缺血缺氧后海马神经元密度 ,增加NGF的长时程阳性表达 ,这可能是其治疗缺血缺氧性脑瘫的重要机制之一。     

神经节苷脂GM1及其脑保护机制

神经节甘脂是一组含有唾液酸的鞘糖脂,神经节甘脂ＧＭ１（即单唾液酸四已糖神经节甘脂）是哺乳类神经节甘脂的主要种类。神经节甘脂ＧＭ１具有一定的脑保护作用,关于探讨其脑保护作用及可能机制的研究很多,本文仅就目前较为公认的脑保护机制作一简述。     

不同时窗针刺对窒息脑瘫幼鼠脑组织bFGF表达的影响

目的：探讨针刺在不同时期介入对窒息脑瘫幼鼠的治疗作用及其神经生化机制。方法：7日龄新生幼鼠28只随机分为4组：模型＋早期针刺组（A组），模型＋晚期针刺组（B组），模型组（C组）。假手术对照组（D组）。A、B组分别于造模后24h、8d开始针刺；动态观察其行为学改变，于21d时处死，测定脑组织碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达情况。结果：造模后幼鼠前肢功能明显下降。至21d时，A、B、C3组前肢功能均显著改善。A、B组基本接近正常水平，C组差于D组。造模后21d，D组幼鼠在皮层、纹状体、海马仅有轻微的bFGF免疫反应，C组幼鼠见稍增强的bFGF阳性表达，而A、B组均见较多量的bFGF强阳性表达，尤以A组为明显，各组间差异有显著性意义（P〈0．001）。结论：针刺早期介入对脑瘫的治疗有肯定作用。增强的bFGF长时程阳性表达，可能是针刺治疗窒息性脑瘫的重要机制之一。     

能量周期之你我他

对不少人来说,早上起床的确是件非常痛苦的事情,但到了晚上他们却变得很精神。另外一些人则完全相反,他们一到晚上就开始犯困。他们喜欢早起,感觉人特精神,做事效率也高。是不是早起困难就懒惰,而早睡早起就勤劳呢？