羊水中外切体的鉴定与其RNA浓度测定

【目的】 分离鉴定羊水中的外切体,并测定羊水外切体中RNA的浓度,探讨从羊水外切体中提取RNA的可行性,从而进一步为胎儿肾脏疾病产前诊断和胎儿肾功能监测寻找生物指标提供研究基础?【方法】 对8例妊娠22 ~ 30周并有产前诊断指征的孕妇分别采用常规羊膜腔穿刺术收集到羊水10 mL进行检测分析,通过多步离心法及蔗糖密度梯度离心法提取羊水中的外切体,采用透射电镜?流式细胞术及激光共聚焦对其进行鉴定,trizol法对分离到的外切体进行RNA提取,紫外分光光度计测定其RNA浓度?【结果】 透射电镜结果示微囊小体形态均一?大小相近,直径范围40~100 nm,呈外切体典型的杯状结构,由脂质双层膜包裹的扁平球体,其外周及内含物均可见负染效应;流式细胞仪上可见CD24阳性率为(92.23±3.8)%;共聚焦显微镜下进行检测,于胶珠表面可见到荧光带;紫外分光光度计测得的RNA浓度分别为28.67?30.02 ?37.57?21.08?49.41?24.57?24.24?26.77 ng/μL,平均浓度为30.29 ng/μL?【结论】 羊水中含有外切体,且其表面CD24分子阳性,说明其来源于胎儿肾脏?羊水中外切体含有RNA,由羊水中分离外切体并提取RNA可为进一步对胎儿肾脏疾病的产前诊断和胎儿肾功能的监测寻找生物指标提供基础材料?     

系列遗传学检测法评估真性胎儿染色体嵌合体的价值

目的探讨染色体核型分析、染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis, CMA)及荧光原位杂交(fluorescencein situ hybridization, FISH)技术在真性胎儿染色体嵌合体产前诊断中的应用价值。方法 2018年4月至2021年8月, 有明确产前诊断指征并在中山大学附属第一医院行羊膜腔穿刺术或/和脐静脉穿刺术产前诊断的单胎妊娠孕妇共4 071例, 其中产前诊断为胎儿真性染色体嵌合体的40例孕妇纳入回顾性分析。分析其染色体核型分析、CMA及FISH结果及嵌合染色体分布、嵌合比例及妊娠结局。采用χ2检验进行统计学分析。结果 (1)真性胎儿染色体嵌合体的检出率为0.98%(40/4 071)。(2)性染色体嵌合体占42.5%(17/40), 其他染色体嵌合体包括21、22、18、16、7、12、15、17和20号染色体及染色体平衡易位嵌合。(3)真性胎儿染色体嵌合体在羊水染色体核型分析中的检出率为77.4%(24/31);在羊水CMA中的检出率为76.7%(23/30);在脐血染色体核型分析中的检出率为10/19;在脐血CMA中...     

颈项透明层增厚胎儿的产前诊断及预后分析

【目的】 研究颈项透明层（ＮＴ）增厚与胎儿染色体异常、宫内ＴＯＲＣＨ感染、严重结构畸形和其他严重异常的关系,了解其在评估胎儿预后中的价值。 【方法】 对１３５例妊娠早期（１１～１３＋６周）ＮＴ≥２．５ ｍｍ且行产前诊断的单胎病例进行回顾性分析,统计胎儿染色体核型、ＴＯＲＣＨ－ＤＮＡ／ＲＮＡ、地中海贫血基因检测结果,随访胎儿超声筛查结构异常情况及妊娠结局。按ＮＴ厚度将其依次分为５组,２．５～２．９、３．０～３．４、３．５～４．４、≥４．５ ｍｍ为第１～４组,颈部水囊瘤为第５组。采用Ｆｉｓｈｅｒ确切概率法分析率的差异,采用Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ检验比较几种常见染色体异常胎儿的ＮＴ值是否有差异。【结果】①１３５例ＮＴ增厚胎儿中,染色体核型异常３６例（２６．７％）;结构异常３２例（２３．７％）,其中严重心脏畸形１１例（８．１％）,重型α地中海贫血７例（５．２％）,未发现ＴＯＲＣＨ宫内感染。妊娠结局：随访率９７％（１３１／１３５）,产前诊断术后无自然流产及宫内感染,死胎３例,引产５１例,活产７７例。②五组ＮＴ增厚胎儿中,染色体异常发生率分别为１０．３％（４／３９）、１３．９％（５／３６）、２８％（７／２５）、５６％（１４／２５）及６０％（６／１０）,严重心脏畸形发生率分别为０％（０／３９）、５．６％（２／３６）、８％（２／２５）、２０％（５／２５）及２０％（２／１０）,结构异常的发生率分别为７．７％（３／３９）、１９．４％（７／３６）、２４％（６／２５）、４４％（１１／２５）和５０％（５／１０）,检出重型α地中海贫血例数分别为１例、４例、１例、１例和０例。五组胎儿染色体异常、结构异常及心脏畸形的发生率差异均有统计学意义（分别Ｐ ＜ ０．００１、Ｐ ＝ ０．００３及Ｐ ＝ ０．０１４）,而且发生率均随ＮＴ增厚而升高。③３９例ＮＴ临界增厚组（即第一组）进行早孕期染色体非整倍体联合筛查后高风险１７例,低风险２２例,经产前诊断确诊后高风险组发现４例染色体异常,低风险组未发现染色体异常。统计学分析发现ＮＴ临界增厚组染色体非整倍体联合筛查高风险和低风险组染色体异常发生率差异有统计学意义（２３．５％ ｖｓ ０％,Ｐ ＝ ０．０２９）。④检出的主要染色体异常包括２１三体综合征１１例、１８三体综合征８例和Ｔｕｒｎｅｒ综合征７例,其ＮＴ值中位数值分别为４．０（２．６ ～ ８．０）ｍｍ、８．０（２．６ ～ ８．８）ｍｍ和１２（６．０ ～ ２６）ｍｍ,差异有统计学意义（Ｐ ＝ ０．００３）。【结论】 ＮＴ增厚与胎儿染色体异常、严重心脏畸形和重型α地中海贫血等多种异常有关。随着ＮＴ值的增加,胎儿染色体异常、结构异常及心脏畸形的发生率升高。在常见的２１三体综合征、１８三体综合征及Ｔｕｒｎｅｒ综合征的染色体异常胎儿中,其ＮＴ值厚度不同且呈增厚趋势。对ＮＴ增厚（ＮＴ≥３．０ ｍｍ）胎儿可直接行产前诊断;对ＮＴ临界增厚（２．５～３．０ ｍｍ）胎儿,建议行妊娠早期染色体非整倍体联合筛查后根据风险值决定是否行侵入性产前诊断。     

122例胎儿肾盂扩张与染色体非整倍体的关联性分析

【目的】探讨胎儿肾盂扩张在染色体非整倍体产前诊断中的价值,为临床咨询提供指导。【方法】对入选的122例超声诊断为肾盂扩张且行产前介入性诊断(羊膜腔穿刺或脐静脉穿刺)的胎儿,回顾其染色体核型分析结果,了解妊娠结局。【结果】1)122例胎儿染色体核型中,87.7%(107/122)核型正常,4.9%(6/122)核型异常,7.4%(9/122)染色体核型多态性。2)Ⅰ组:孤立性肾盂扩张(67例);Ⅱ组:合并一个其他超声软指标(34例);Ⅲ组:合并两个或两个以上其他超声软指标(7例);Ⅳ组:合并胎儿结构畸形(14例)。4组中,染色体核型正常者分别为63例(94%)、28例(82.4%)、7例(100%)、9例(64.3%);染色体核型多态性分别为3例(4.5%)、6例(17.6%)、0例、0例;染色体核型异常分别为1例(1.5%)、0例、0例、5例(35.7%,唐氏综合征3例,其他异常2例)。3)成功随访胎儿107例,其中男孩87例,女孩20例,男:女=4.35∶1。11例终止妊娠,96例活产新生儿,早产4例,足月产92例,顺产35例,剖宫产61例,平均出生孕周为39.1周。10例新生儿出生后因肾积水无缓解或进行性加重行手术治疗。【结论】孤立性肾盂扩张不应直接作为产前诊断指征,但肾盂扩张合并其他超声软指标或者合并胎儿结构畸形,应建议行产前诊断,排除染色体非整倍体,胎儿生后应密切随访泌尿系统功能,绝大多数肾盂扩张胎儿预后良好。     

胎儿脊髓脊膜膨出宫内开放性手术的评价

随着产前超声诊断技术的提高,越来越多的胎儿结构畸形在出生前被明确诊断,部分胎儿结构畸形随着病情进展,在胎儿期可继续加重或引起其他重要器官的继发性损害,导致胎儿或新生儿严重功能缺陷或死亡.这类结构畸形若能在胎儿期得到适当矫正,可解除或缓解病情的进展,以争取出生后进一步治疗的时机或使生命得以延续并减少后遗症.