Epidemiological and pathogenic study on the outbreak of toxic shock syndrome and meningocephalitis caused by swine streptococcus

Objective: To reveal the relationship between the biological characteristics of pathogen and the pig-to-human spread of the epidemic and infectious disease in 1998 in East China. Methods: Epidemiological survey, pathological examination of pigs and patients, and pathogen isolation were performed. Results: The disease had a character of quick onset, serious symptoms, short course and high mortality. The clinical manifestations and pathological changes of the disease were high fever, sometimes with nausea, vomiting and diarrhea, then might develop to myositis, fascitis, DIC, multiple organ failure, shock and usually died in 2-3 d. Among 25 patients, 16 manifested clinically as streptococcal toxic shock syndromes and 9 streptococcal meningiocephalitis syndrome. The mortality was 81.25% and 11.11% respectively. Pathogenic bacteria isolated from diseased pigs and patients were found to have some common characteristics in morphology, staining and biological characters. Conclusion: The pathogen isolated from the blood of patients and pigs were identified as streptococci.     

应用噬菌体肽文库筛选McAb F3特异性结合肽

目的：应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽。方法：采用protein-A亲和层析纯化的F3单抗为筛选配基，对噬菌体展示的随机12肽文库进行生物亲和淘洗，夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性，并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果：通过3轮生物淘洗，能被抗体捕获的噬菌体克隆为91．7％（11／12）；ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽能与F3单抗特异性结合；序列分析表明7个阳性克隆氨基酸序列相同，均为－MHGPTKNQMWHT，同源性分析显示该序列与HTNV／SEOV M蛋白G2区第750－759位氨基酸有较高的同源性，结论：获得了具有良好结合活性的模拟表位肽，为基于表位水平的HFRSV（肾病综合征出血热病毒）特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要依据。     

酶联免疫吸附试验检测肾综合征出血热病毒抗原最佳条件探讨

本试验表明:以McAb为包被抗体,HRP-SPA为酶标结合物可以将非特异性反应降低接近于零,以患者血清为第二抗体可提变试验敏感性,以OPD或TMB为底物,每步作用60分钟或40分钟、每孔加样0.1ml或0.05ml,结果无明显区别。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的制备及其特异性研究

用陈株HFRSV免疫获得5株MbAb。B_9株具有血凝抑制和体内保护活性,F_3、H_(11)具有中和活性及体内保护活性。B_9株和大部分野鼠型HFRSV反应,与大部分家鼠型HFRSV不反应,F_3、H_7株与检测的24株HFRSV都反应。     

PCR和ELISA检测单纯疱疹病毒的比较

依据ＨＳＶ ＤＮＡ多聚酶基因核苷酸序列设计并合成一对引物，建立了ＰＣＲ方法。用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ平行检测ＨＳＶ－１，ＨＳＶ－２标准毒株感染的细胞，拟诊ＨＳＶ脑炎患者脑脊液（ＣＳＦ）及多种对照标本。结果表明，两方法特异性完全一致；ＰＣＲ检测阳性率高，比ＥＬＩＳＡ敏感近２０倍，更适用于ＨＳＶ脑炎的早期诊断。     

献血员、肝炎患者TTV DNA检测及部分TTV基因序列分析

目的了解献血员、肝炎患者中的输血传递病毒(TTV)感染状况及基因型别。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应（hemi-nestPCR）方法,对195份献血员血清、72份不同型别的肝炎患者血清进行了TTVDNA的PCR检测,并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果①在血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常,HBsAg及抗HCV阴性的99份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本36份,阳性检出率为36.3%;而在ALT正常的96份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本16份,阳性检出率为16.6%,明显低于ALT异常献血者。②在72例不同肝炎患者中,共检出39例TTVDNA阳性血清,总检出率为54.16%,在非甲-非庚型肝炎患者中TTVDNA阳性率为87.5%,而在明确诊断为甲-庚型肝炎的患者中TTVDNA阳性率为50%,两组相比差异显著（P<0.05）。对8株阳性株序列分析结果显示,测序的8个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60.4%～99.1%,氨基酸的同源性为55.4%～98.6%。经系统发育分析表明,这8个TTV分离株中有7株可分属于G1、G2两个基因型的5个亚型,而另1株为G1型的新亚型。结论①献血者中存在TTV感染,提示TTV可以导致感染个体的肝功能异常,TTV可能与HBV感染相似,亦存在“健康携带状态”。②非甲-非庚型肝炎患者的TTV感染率明显高于明确病原的甲-庚型肝炎患者,TTV感染与肝炎有关,可能是非甲-非庚型肝炎的病原之一。③8个TTV分离株中7个分属于G1、G2两个基因型中的5个亚型,另有1株为G1型的新亚型。     

病损宫颈标本单纯疱疹病毒抗原检测结果的分析

本文以抗单纯疱疹病毒(HSV)型共同性单克隆抗体力捕捉抗体,用ELISA双抗体夹心四步法检测200份宫颈分泌物标本中HSV抗原。其中42(21％)份标本获得阳性结果。宫颈癌、宫颈炎、宫颈糜烂与无病损宫颈标本的阳性检出率有显著性差异;不同程度宫颈炎、宫颈糜烂组之间,不同年龄组宫颈炎、宫颈糜烂标本之间阳性检出率无统计学差异。200份标本同时进行病毒分离作为对照,24份标本因污染未获得结果,其中28份(16％)标本获得阳性结果,二种方法的符合率为93％。     

猪链球菌引起人中毒性休克综合征和脑膜脑炎的流行病学调查及病原学研究

目的 本研究拟本明1998年华东地区一种与病死猪有接触史的人的急性传染病病原体的生物学特征与疾病流行的关系。方法 流行病学调查,并对病死猪及死亡患者进行病理检查,分离病原及其实验研究。结果 该病具有起病急、病情重、病程短、病死率高等特点。临床及病理表现为：起病多似感冒有高热、四肢疼痛、有时有呕吐、腹泻等,迅速发展为肌炎、筋膜炎、DIC、多脏器功能衰竭、休克,多于2～3d内死亡。25例患者中,临床表现为中毒性休克综合征的16例,链球菌性脑膜脑炎综合征的9例,两者的病死率分别为81.25%和11.11%。从猪和病人标本分离的病原体,其形态、生染色性、生物学特征均一致。结论 患者血和病猪脏器中分离的病原菌鉴定结果证明两者均为链球菌。     

恙螨体内汉坦病毒核酸的基因芯片检测

目的 建立快速、灵敏、特异的汉坦病毒基因芯片诊断方法。方法 根据发表的汉坦病毒属(HV)76-118株和R22株S基因核苷酸序列，设计引物和探针，制备寡核苷酸芯片。用CV3标记核苷和引物，运用不对称PCR技术制备单链荧光标记核苷酸片段，并与芯片上的寡核苷酸探针杂交，荧光扫描仪检测并分析信号。结果 研究制备的基因芯片能够检测汉坦病毒HTN型和SEO型病毒核酸的特异性荧光信号。结论 HV的基因芯片检测具有特异、灵敏、快速的优点。基因芯片的制备和检测技术的建立，可为肾综合征出血热等传染病的诊断和预防提供理想的方法。     

不同人群TTV检测及阳性标本核苷酸序列分析

目的了解不同人群TTV感染状况及基因型别，探讨TTV传播途径。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应方法，对献血者、肝炎病人、幼儿及母婴配对等4组人群血清进行TTV DNA的PCR检测并对部分阳性株进行序列测定及分析。结果(1)在457份被检血清中检测出TTV DNA阳性111份，总阳性率24．29％。在血清转氨酶(ALT)正常的96份献血者血清标本中TTV DNA阳性检出率为16．6％，而在ALT异常、HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中，TTV DNA的阳性检出率为36．3％，明显高于ALT正常献血者。(2)在72例不同肝炎病人血清中，TTV DNA阳性检出率为54．16％；在非甲一庚型肝炎病人中TTV DNA阳性率为87．5％，高于甲一庚型肝炎的病人中TTV DNA阳性率。(3)110份体检幼儿血清中，共检出TTV DNA阳性14份，总检出率为12．73％。(4)一对母婴配对血清的TTV DNA同时阳性且序列相同。(5)12个阳性株序列分析结果显示：11株分属于G1、G2 2个基因型的5个亚型，而另1株与Gla、Glb的同源性为74．8％～80．2％。结论(1)献血者人群中存在TTV感染，TTV可以导致感染个体的肝功能异常。(2)TTV感染与肝炎有关，可能是非甲一庚型肝炎的病原之一。(3)TTV可能存在血源途径外的其它传播选径；TTV存在母婴垂直传播途径。