嵌合式聚合酶链反应检测恙虫病立克次体DNA

嵌合式聚合酶链反应检测恙虫病立克次体ＤＮＡ郭恒彬，吴光华，唐家琪，李先富，于明明，张云，潘秀珍，李越希目前，国内实验室诊断恙虫病的主要方法是检测患者血清中抗恙虫病立克次体（Ｒｔ）的抗体和患者全血接种小白鼠分离Ｒｔ，这些方法均不能作出早期诊断：国外已采...     

广谱高特异性重组丙型肝炎病毒抗原的制备纯化及鉴定

利用逆转录PCR技术克隆了中国株HCV的核心蛋白基因和非结构3区蛋白基因,DNA序列无分析显示克隆的基因片段属HCV-Ⅰ型。将二个基因片段分别克隆至质粒表达载体内,构建了多株表达融合和非融合核心蛋白的工程菌及表达非结构3区蛋白的工程菌。建立了二种重组蛋白的纯化方法,     

东南沿海新发和再发自然疫源性疾病流行特点与防控措施

东南沿海地区是我国自然疫源性疾病的重要疫区,部队曾遭到血吸虫病、恙虫病、流行性出血热的严重威胁。近年来,又发现莱姆病、斑点热、广州管圆线虫病疫源地。登革热在停息50多年后,又再发并引起流行。部队在作战、行军、演习、国防施工中,有时要进入这些疾病的疫源地,不免受到感染或引起流行。因此,需要加强调查研究,在掌握流行特点的基础上,进一步提出具有针对性的防控措施,为保障部队健康服务。     

江苏地区献血者中TTVDNA的PCR扩增检测及部分基因序列分析

TTV是新发现的DNA病毒［1］，为了解TTV 的流行情况，笔者在不同人群中开展了TTV感染的分子流行病学调查。本文报告对江苏地区献血者进行TTV感染状况调查及对部分TTV感染株基因分析的结果。 1 材料和方法 1．1 标本采集 1999年5～10月期间，在南京市红十字血液中心参加献血的职业献血者和无偿献血者195人。其中96人为ALT正常献血者，99人为ALT异常献血者。采集静脉血2ml，分离血清，分装后置-20℃备用。     

恙虫病患者血清IgG抗体的动态观察

1987年9～11月江苏省东台市农村发生264例恙虫病暴发流行。为了解该批患者血清恙虫病立克次氏体IgG抗体的变化,我们收集了早期和恢复期患者血清,作IgG抗体的动态观察。材料与方法收集恙虫病患者早期(发病1周内)和恢复期(发病15～60天)血清,应用斑点法酶标染色     

用PCR检测现场单个小盾纤恙螨体内恙虫病立克次体的研究

恙虫病立克次体表面蛋白５６ＫＤａ基因编码区构建的群特异引物，采用嵌合式聚合酶链反应检测现场捕获的单个小盾纤恙螨幼虫体内Ｒ．ｔ的ＤＮＡ。共检测江苏省恙虫病疫区小盾纤恙螨幼虫６１只，结果２只幼虫提取的ＤＮＡ经扩增后见４８１￣５０７ｂｐ的ＤＮＡ扩增带，表明这２只幼虫携带有Ｒ．ｔ，其该种螨Ｒ．ｔ携带率为３．２７％，证明该法可用于单个恙螨幼虫体的Ｒ．ｔ的检测，对恙虫病疫区媒介恙螨的流行病学调查具有实用价值。     

盐城市2006-2010年恙虫病流行病学研究

目的研究2006-2010年盐城市恙虫病流行病学及病原学特点,探讨防制对策。方法系统收集恙虫病疫情,检测病人血液中恙虫病东方体及进行相关分子生物学研究,开展人群及动物恙虫病血清流行病学调查。结果盐城市2006-2010年共报告399例恙虫病病例,各县(市)均有疫情发生。每年疫情始于10月,11月为高峰,终于12月。病人以中老年为主。从1例病人血液中分离出恙虫病东方体,经分子技术测定及目的基因同源性比较,基因型别属Kawasaki。15岁以上人群血清抗恙虫病东方体IgG阳性率为1.85%,牛的血清阳线率为3.40%。结论盐城市各县(市)均发现恙虫病疫源地,疫情将持续流行,病原体基因型别未发生变化。     

应用噬菌体肽文库筛选McAb F3特异性结合肽

目的：应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽。方法：采用protein-A亲和层析纯化的F3单抗为筛选配基，对噬菌体展示的随机12肽文库进行生物亲和淘洗，夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性，并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果：通过3轮生物淘洗，能被抗体捕获的噬菌体克隆为91．7％（11／12）；ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽能与F3单抗特异性结合；序列分析表明7个阳性克隆氨基酸序列相同，均为－MHGPTKNQMWHT，同源性分析显示该序列与HTNV／SEOV M蛋白G2区第750－759位氨基酸有较高的同源性，结论：获得了具有良好结合活性的模拟表位肽，为基于表位水平的HFRSV（肾病综合征出血热病毒）特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要依据。     

江苏恙虫病立克次体抗体阳性血清分型的研究

本文报告江苏恙虫病疫区收集的抗恙虫病立克次抗体阳性血清：病人８８份，野鼠４份，各种标本接种的小白鼠２６份，共１１８份血清，采用间接免疫荧光法和斑点法酶标染色分型的结果，１１８份血清均与Ｇｉｌｌｉａｍ型立克次体呈阳性反应，５１份（４３．２％）血清与Ｋａｒｐ、Ｋａｔｏ两型有交叉反应，但反应最终滴度均低于Ｇｉｌｌｉａｍ型的１个稀释度以上，证明江苏恙虫病立克次体流行株以Ｇｉｌｌｉａｍ型为主。斑点法酶标染色