成人肝细胞微粒体乙基吗啡N-脱甲基酶活性及酶动力学研究

目的观察成人肝细胞微粒体乙基吗啡N-脱甲基酶(EDM)的活性水平、酶动力学特征及乙醇和头孢噻肟对酶动力学的影响。方法肝组织除去筋膜和血红蛋白,加磷酸盐缓冲液4℃下匀浆,12 000×g离心15 min,取上清100 000×g超速离心60 min,沉淀加PBS/甘油缓冲液制成微粒体悬液,终点法测EDM酶活性。观察不同浓度乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性及酶动力学参数最大反应速度Vm和米氏常数Km的影响。结果48例成人肝细胞微粒体EDM活性为(0．89±0．18) U,女性组(0．96±0．22)U明显高于男性组(0．81±0．16)U(P＜0．05)。乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性均有抑制作用,底物浓度为1．0 mmol/L时,抑制常数Ki分别为474 mg/L(1．04 mmol/L)和3．6%(0．62 mmol/L);头孢噻肟终浓度分别为0、200、400 mg/L时,米氏常数Km分别为0．80、0．86和0．96 mmol/L,Vm分别为1．46、1．39和1．35 mmol甲醛/g微粒体蛋白/min;乙醇终浓度分别为0%、2．0%、4．0%时,Km分别为0．80、0．94、和1．1 mmol/L,Vm分别为1．46、1．36和1．22 mmol甲醛/g微粒体蛋白/min。结论成人肝细胞微粒体EDM酶活性水平女性组高于男性组;乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性的抑制作用是竞争性抑制为主的混合性抑制。     

免疫组织化学法检测三阴乳腺癌Ki-67抗原的改良方法研究

目的优化免疫组织化学法检测三阴乳腺癌(TNBC)组织中Ki-67抗原实验条件,实现检测技术标准化。方法 20例诊断为TNBC的组织标本,使用标准免疫组织化学检测Ki-67抗原。针对不理想的结果对实验条件进行调整,直至获得最佳结果。使用图像分析软件对阳性染色细胞计数分析。结果通过对脱蜡、孵一抗、分化时间控制等因素的优化,得到更为理想的免疫组织化学结果。阳性细胞数和总细胞数通过软件灰度值分析来获得。最终20例标本均为Ki-67阳性高表达。结论改良的免疫组织化学染色法对TNBC组织中Ki-67抗原检测结果较传统法更加精准、结果更为可靠。     

大剂量阿托伐他汀对急诊冠状动脉介入治疗患者对比剂肾病的影响

目的探讨单次大剂量阿托伐他汀（80mg）对急性心肌梗死患者直接经皮冠状动脉介入治疗后对比剂肾病（contrast induced nephropathy, CIN ）的影响。方法121例行直接经皮冠状动脉介入治疗的急性sT段抬高心肌梗死患者按数字表法随机分入阿托伐他汀组（60例）和对照组（61例）。阿托伐他汀组在入院后立即给予阿托伐他汀80mg口服,对照组术前不给予他汀类药物治疗。所有患者术后均给予阿托伐他汀20mg／d长期服用。术前及术后3天连续监测血清肌酐（ serum creatinine, Scr）、血浆胱抑素C （cystatin C, Cys C ）、超敏C反应蛋白浓度。根据Cockcroft—Gauh公式计算内生肌酐清除率（creatinine clearance rate, Ccr）。结果121例患者中21例发生CIN,CIN发生率为17．4％,阿托伐他汀组CIN发生率低于对照组,但差异无统计学意义（13．3％孤21．3％,P〉0．05）。阿托伐他汀组术后CysC峰值较对照组明显降低,差异有统计学意义[（0．94±0．33）mg／Lvs（1．06±0．30）mg／L,P〈0．05];术后Scr、CysC较基线增高的幅度以及术后Ccr较基线降低的幅度均显著低于对照组,差异有统计学意义[（8．2±10．8）μmol／Lvs（14．6±12．9）μmol／L,P〈0．01;（0．07±0．04）mg／Lvs（0．18±0．07）mg／L,P〈0．01;（6．1±3．7）mL／minvs（11．2±5．1）mL／min,P〈0．01]。阿托伐他汀组术后高敏C反应蛋白峰值及较基线增高的幅度均明显低于对照组,差异有统计学意义[（17．2±6．8）mg／dLvs（24．3±10．3）mg／dL,P〈0．05;（7．3±5．7）mg／dLm（14．1±7．5）mg／dL,P〈O．01]。结论急性心肌梗死患者直接经皮冠状动脉介入治疗前大剂量阿托伐他汀的预处理可以抑制炎症反应．减轻肾损害．对预防CIN可能有益。     

天然抗菌肽分离纯化方法的建立

目的寻找高效、广谱的新型天然抗菌肽，建立稳定、有效的分离纯化方法。方法家蝇免疫诱导后制成组织匀浆，经超速离心、分子筛过滤、SephadexG50层析、反相高效液相色谱法（RP-HPLC）、透析浓缩等技术进行分离纯化，用K-B法鉴定抗菌活性。结果组织提取液经超速离心后，用pH6．8Tris-HCI尿素缓冲液作流动相，SephadexG50层析，收集到有明显抗菌活性的成分。再用pH6．8磷酸盐缓冲液作流动相，经RP-HPLC半制备柱进一步纯化，各成分分离效果良好，保留时间为18．008min处的谱峰，有明显的抗菌活性。用RP-HPLC分析柱显示其为单一成分，达到了色谱纯。该抗菌肽对大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantS．aureus，MRSA）均有抗菌活性。结论建立了有效的家蝇抗菌肽分离纯化方法，纯化的家蝇抗菌肽有广谱抗菌活性。     

家蝇抗菌肽的免疫诱导及抗菌活性研究

目的 诱导家蝇产生抗菌活性肽,鉴定其抗菌活性.方法 家蝇经针刺损伤感染大肠埃希菌,免疫诱导24h后制成组织匀浆,经低温盐析、超速离心、Sephadex G50层析、RP-HPLC等技术分离纯化抗菌肽.K-B法和稀释法测定抗菌活性.结果 家蝇体内含有抗菌活性成分,家蝇经损伤免疫诱导后分泌抗菌肽的量明显增加,经分离纯化得到了一个色谱纯的抗菌活性肽.该抗菌肽对标准菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)和金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)均有抗菌活性,其MIC分别为2.4 μmol/L、3.6 μmol/L和4.8 μmol/L.结论 免疫诱导可促进家蝇抗菌肽的分泌,分泌的抗菌肽有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有抑制作用.     

多囊卵巢不孕患者的心理护理及健康教育

多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一种生殖功能障碍与糖代谢异常并存的内分泌紊乱综合征[1],我国不育群体中PCOS约占30%～40%[2]。调查发现,PCOS患者和不孕症患者均普遍存在负性情绪,患者长期的精神压抑和精神紧张、焦虑等负性情绪可引起神经内分泌障碍及排卵功能紊乱,从而导致月经失调和不孕等问题加重[3]。PCOS是伴随妇女一生的疾病,为了改善这部分患者的生活质量,使其保持     

亚甲蓝光病毒灭活血浆的研究进展

随着输血医学的发展,血液安全得到了显著改善,但仍受到新发传染病病原体和未知病原体的威胁。免疫介导的反应是输注血浆最常见的不良反应。血浆输注的两大风险是感染风险和免疫风险。亚甲蓝光化学法是目前我国用于血浆病毒灭活的主要方法之一,能有效灭活大多数脂质包膜病毒。为探讨亚甲蓝光病毒灭活血浆应用的安全性,本文对其灭活病毒的有效性、对凝血因子的影响、输注的不良反应及血浆残余亚甲蓝的安全性作一综述。     

子宫输卵管造影术对输卵管阻塞性不孕的临床应用价值

目的评价子宫输卵管造影术对输卵管阻塞性不孕症的临床应用价值。方法收集近年来经造影证实，且有临床追踪结果的输卵管性不孕症200例患者资料进行分析。结果200例共275支输卵管显示完全或部分梗阻，其中单侧梗阻125例（62．5％），双侧梗阻75例（37．5％）；造影术后有60例患者受孕，受孕率为30％。结论子宫输卵管造影术对输卵管阻塞性不孕症不仅能明确诊断，而且还具有一定的治疗作用。     

氟喹诺酮类药对人肝药酶活性的影响

目的 :观察氟喹诺酮类 (FQs)药物对人肝微粒体药物代谢酶 (细胞色素P 4 5 0 )活性影响的差异。方法 :反应体系中微粒体蛋白终浓度为 0 .33～2 .0 g·L- 1,药物终浓度为 4 0 0mg·L- 1,测定药物代谢酶的活性。对照不加药。并测定不同底物浓度和不同环丙沙星浓度时乙基吗啡N 脱甲基酶的Vm和Km 值 ,求抑制常数Ki。结果 :FQs对酶活性的抑制强度为 :培氟沙星 (PFLX) >环丙沙星 (CPLX)>氧氟沙星 (OFLX) >左氧氟沙星 (LVLX)。FQs对戊巴比妥侧链羟化酶 (PSCH )、苯并芘羟化酶(BPH)、氨基比林N 脱甲基酶 (ADM )、乙基吗啡N 脱甲基酶 (EDM )和NADPH 细胞色素C还原酶的平均被抑制率分别为 :2 9% ,2 6 % ,19% ,17%和2 .3%。CPLX对EDM的抑制为竞争性抑制为主的混合性抑制 ,抑制常数Ki=2 5 0mg·L- 1。结论 :4种FQs对多种肝药酶活性均有不同程度的抑制 ,LVLX的抑制作用相对较弱。 5种肝药酶对药物的敏感性也各不相同。CPLX对EDM的抑制是竞争性抑制为主的混合性抑制。