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1.
嗜麦芽窄食单胞菌所产L1型金属β内酰胺酶的序列分析及原核表达 总被引:3,自引:1,他引:3
目的对嗜麦芽窄食单胞菌所产L1型金属β内酰胺酶基因进行测序、原核表达。方法PCR扩增L1酶的编码基因,将其亚克隆入pUCm—T载体后测定核苷酸序列,将u酶基因克隆至表达载体pET-41a( )后在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表达情况,等电聚集电泳测定表达蛋白的等电点。结果本实验中L1的编码基因与国外同类酶的氨基酸同源性为92.44%。此L1酶基因可在大肠埃希菌BL21(DE3)中大量表达,等电点为6.7。结论对L1型金属β内酰胺酶的克隆测序及成功表达为进一步研究该酶的分子生物学特性奠定了基础。 相似文献
2.
目的 了解AmpC酶在铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制中所起的作用.方法 选取同一患者治疗前后临床分离株,随机扩增多态性DNA(RAPD)对菌株进行基因分型,微量稀释法测定细菌对头孢他啶的最低抑菌浓度(MIC),头孢西丁三相试验和头孢西丁诱导试验检测AmpC酶产生情况.结果 8组铜绿假单胞菌的RAPD分型完全一致,抗生素治疗后分离株对头孢他啶的MIC值较治疗前增加≥8倍,抗生素治疗前分离株头孢西丁三相试验均为阴性,其中6株菌株头孢西丁诱导试验阳性,而治疗后的分离株头孢西丁三相试验均呈阳性.结论 β-内酰胺类抗生素治疗失败与AmpC酶被诱导后持续高产有关,对诱导高产酶阳性株引起的感染要避免使用AmpC酶的强诱导剂. 相似文献
3.
目的应用白念珠菌全基因组表达谱芯片比较山苍子油处理前后白念珠菌基因的差异性表达,分析山苍子油对白念珠菌整个基因表达谱的影响。方法用山苍子油处理白念珠菌ATCC900028株90min,将处理后的菌株命名为白念珠菌ATCC90028-L,分别抽提细胞总RNA,经杂交、洗涤后,通过扫描分析白念珠菌ATCC90028株和ATCC90028-L株全基因组表达谱的差异。结果基因芯片共筛选出491个差异表达基因,与白念珠菌ATCC90028株比较,在ATCC90028-L株中有216个基因表达上调,有275个基因表达下调,差异表达的基因数量约占总基因数量的11%(491/4634),差异表达基因主要包括白念珠菌麦角固醇生物合成通路中关键靶酶编码基因(ERGs)、应激反应相关基因、DNA复制与损伤修复相关基因、跨膜分子转运相关基因、能量代谢酶类相关基因等。结论山苍子油可使白念珠菌基因组中约11%基因产生差异性表达,影响较为显著,我们推测山苍子油与唑类抗真菌药物的作用机制相似,均通过对白念珠菌麦角固醇生物合成通路中关键靶酶的影响而起作用,基因芯片筛选出的其他差异表达基因也可能与山苍子油的抗真菌作用机制有关,值得进一步研究。 相似文献
4.
多重耐药肺炎克雷伯菌基因型和整合子的分析 总被引:1,自引:1,他引:0
目的了解多重耐药肺炎克雷伯菌的基因型和整合子存在情况。方法设计TEM、SHV和CTX-M型及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因特异性引物,并将聚合酶链反应(PCR)扩增获得哥内酰胺酶编码基因,分别克隆入pMD18-T载体后测定其核苷酸序列,分析其基因亚型。结果该多重耐药株与TEM-1、SHV-12及CTX—M-3型编码基因序列的同源性为100%,Ⅰ类整合酶基因检测阳性,Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因检测阴性。结论Ⅰ类整合子存在产ESBLs肺炎克雷伯菌中。 相似文献
5.
目的:了解汕头地区对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌(PA)的耐药情况及耐药机制。方法:收集临床分离耐亚胺培南的PA共141株,双纸片协同实验检测金属酶表型,PCR法检测外膜孔蛋白OprD2和金属β内酰胺酶(IMP、VIM、SPM)基因。结果:耐亚胺培南的铜绿假单胞菌均为多重耐药茵,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率较低,未发现产金属酶菌株,仅22株菌株扩增出OprD2基因。结论:头孢哌酮/舒巴坦可作为本地区临床治疗耐亚胺培南铜绿假单胞茵所致感染的首选经验用药,OprDa表达减少或不表达可能是临床分离铜绿假单胞茵对亚胺培南耐药的主要机制。 相似文献
6.
本文报道国产阿洛西林的犬药代动力学研究结果。用微生物法测定血清药物浓度。犬静注和肌注阿洛西林20mg/kg后,体内药物转运过程分别符合开放型二室和一室模型。静注本药后即刻血浓度为214.28±14.02μg/ml,分布相半衰期仅0.13小时,可迅速达到有效杀菌浓度,消除相半衰期1.36小时。肌注0.75小时后的峰浓度为21.17±11.54μg/ml,消除相半衰期1.20小时。但肌注后的AUC仅为静注相同剂量后的40.36%,说明肌注本品的生物利用度低。 该药静注和肌注后的表观分布容积分别为0.38和0.34L/kg,提示该药主要分布于细胞外液中。作者根据此药的抗菌活性和药动学特征,对给药方案进行了探讨. 相似文献
7.
前文证明吡喹酬致心律失常作用存在光学异构体的特异性。本文比较了吡喹酮及其异构体对离体大鼠心房生理特性的影响,发现吡喹酮及其异构体的正性肌力作用以(+)-和(±)-吡喹酮较强,两者的EDmin、均为1×10~(-6)M,而(-)-吡喹酮最弱,EDmin为1×10~(-5)M;(+)-和(±)-吡喹酮收缩幅度平均净增率分别达84.62±14.75%和78.59±4.43%, 相似文献
8.
本文报道国产环丙氟哌酸药代动力学及体外抗菌性研究结果。用HPLC法测定血清药物浓度。6名健康志愿者 相似文献
9.
10.
经省教委批准,重庆医科大学传染病寄生虫病研究所于1989年12月12日成立。省市领导到会祝贺。同时,该校附一院和附二院传染科被国家教委批准为全国重点学科,成为我国2个传染病学重点学科之一,也是西南地区唯一的一个西医重点学科。 相似文献