小凹蛋白-1和清道夫受体-B1与动脉粥样硬化关系研究进展

<正>脂质紊乱和炎症反应在动脉粥样硬化的发生发展中发挥了重要的作用。其中胆固醇的逆向转运能力是决定动脉粥样硬化进程与转归的关键。目前还存在一类对动脉硬化的形成有特殊作用的蛋白,即血清逆转运蛋白。这类蛋白主要包括小凹蛋白和清道夫受体家族。小凹蛋白-1(CAV-1)既在载脂细胞胆固醇流出中发挥转运中心和关键分子的作用,也在炎症反应中发挥介导抗炎的信号转导作用。清道夫受体-B1(SR-B1)存在细胞膜上,能够促进胆固醇的逆向转运,清     

清肝方在ConA诱导的肝损伤中免疫调节作用的研究

目的:研究以清热利湿、琉肝解郁、柔肝缓急立法的清肝方对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠肝、脾、胸腺指数、转氨酶及病理改变的影响.方法:46只ICR雄性小鼠随机分成A(清肝方组)、B(清肝方加猪苓多糖腹腔注射组)、C(模型组)、D(正常对照组)四组.造模前,各组分别预治疗,其中,A组给予清肝方灌胃,B组予清肝方灌胃加腹腔注射猪苓多糖溶液,C、D组予蒸馏水灌胃,每日两次,共计5次,于末次给药后1h,采用0.2%的ConA溶液予小鼠尾静脉注射造模,分别于2h检测血清TNF-a,8h检测血清IFN-r、IL-4,10h应用改良赖氏法检测血清中转氮酶的水平,并观察肝,脾病理变化情况.结果:A、B两组造模2h后,TNF-a水平明显降低:8h后血清IFN-r升高、IL-4水平降低;10h后,可明显降低肝、脾指数及血清转氨酶水平.组织结构分析表明清肝方及清肝方加猪苓多糖腹腔注射组,可明显减轻肝脏及脾脏的病理损伤.结论:清肝方通过激活细胞免疫,增强清除病毒的能力,发挥扶正祛邪之功效,同时,通过减少TNF-a,抑制NF-kB信号转导途径,减少后续炎症因子的释放,减轻ConA诱导的肝的免疫性损伤.     

丹参酚酸B调节miR-210保护HUVEC过氧化损伤机制研究

目的:研究丹参酚酸调节miR-210对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)过氧损伤的保护作用机制。方法:采用H-DMEM完全培养基培养HUVEC细胞株,3次传代后分为对照组(正常培养)、模型组(过氧化损伤)、中药组(丹参酚酸B干预)和沉默组(miR-210基因沉默+中药干预组)。采用过氧化氢诱导细胞过氧化损伤模型,LipofectamineRNAi MAX脂质体法转染miR-210-3P inhibitor诱导miR-210基因沉默,丹参酚酸B给药浓度是10-5mol/L。qRT-PCR法检测细胞miR-210、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,荧光标记免疫组化法检测CD31分子的表达,ELISA法检测细胞液中内皮型一氧化氮合酶(eNOs)和内皮素-1(ET-1)的含量。结果:与对照组比较,模型组miR-210、VEGF和CD31分子的表达水平显著降低,细胞液中eNOs含量降低、ET-1的含量明显升高(P0.01或P0.001)。与模型组比较,中药组miR-210、VEGF和CD31分子的表达水平均显著升高,细胞液中eNOs含量升高、ET-1的含量明显降低(P0.001)。与中药组比较,沉默组miR-210、VEGF和CD31分子的表达水平均显著降低,但细胞液中eNOs和ET-1的含量差异无显著性(P0.001)。结论:丹参酚酸B能维持过氧化损伤HUVEC的血管新生功能和内皮收缩稳态,其促进血管新生作用被miR-210基因沉默阻断,维持收缩功能不被miR-210基因沉默所阻断,说明丹参酚酸B具有多靶点保护作用,miR-210是其作用靶点之一。     

丹参酚酸B调节缺氧损伤乳鼠心肌细胞TLR4-NFκB-TNFα炎性反应通路的量效时效关系研究

目的:探讨丹参酚酸B不同给药浓度和不同给药时间窗对缺氧损伤乳鼠心肌细胞TLR4-NFκB-TNFα炎性反应通路的调节作用。方法:分离纯化出生1~3 d Wistar乳鼠心肌细胞、建立体外缺氧细胞模型。丹参酚酸B(Sal B)大、中、小剂量浓度分别为10~(-5)mol/L、10~(-6)mol/L和10~(-7)mol/L并按照缺氧前6 h、缺氧同时和缺氧后6 h 3种给药方式进行干预。qRT-PCR法检测心肌细胞tool样受体4 (TLR4)和核因子κB(NFκB) mRNA的表达,细胞爬片免疫组化法检测TLR4和NFκB蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNFα)的浓度。结果:与正常组比较,缺氧模型组TLR4和NFκB mRNA和蛋白的表达量、细胞上清液中TNFα浓度均显著升高(P 0. 05或P 0. 01)。和缺氧模型组比较,丹参酚酸B预防给药和同时给药大、中剂量组TLR4和NFκB mRNA和蛋白的表达量、细胞上清液中TNFα的浓度均显著下降(P 0. 05或P 0. 01)。预防给药大剂量组下降最显著(P 0. 01)。结论:TLR4-NFκB-TNFα炎性反应通路在缺氧损伤6h即明显激活。SalB预防或同时干预对缺氧损伤的心肌细胞有明显的保护作用,该作用与抑制TLR4-NFκB-TNFα炎性反应损伤通路相关。SalB具有量效和时效性,以大剂量预防给药效果最佳。     

消喘膏穴位贴敷对卵蛋白诱发哮喘大鼠Th1/Th2的调节作用

目的 探讨消喘膏穴位贴敷防治哮喘的作用机制.方法 以卵蛋白诱发哮喘大鼠为研究对象,消喘膏贴敷在大鼠双肺俞、心俞、膈俞上,观察大鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)中Th1/Th2细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)的改变,并对大鼠肺病理进行分析.结果 与模型组比较,消喘膏穴位贴敷后血清及肺泡灌洗液中Th1细...     

阻断交感神经及加味逍遥丸对心理应激小鼠免疫功能的影响

目的探讨交感-肾上腺髓质轴阻断对心理应激小鼠免疫器官结构和细胞免疫功能的影响及加味逍遥丸调节心理应激损伤的作用机理。方法利用电刺激心理应激箱诱发心理应激模型、六羟多巴胺阻断外周交感神经、加味逍遥丸为平行对照研究中药;检测脏器指数、胸腺细胞凋亡率、NK细胞活性、淋巴细胞转化率、胸腺病理等免疫学指标。结果单纯应激组较单纯对照组小鼠胸腺指数下降、脾指数下降[(0.41±0.13)vs(0.53±0.15);P<0.05]、胸腺细胞凋亡率升高[(33.21±5.54)%vs(17.79±5.18)%;P<0.01]、NK细胞活性下降[(22.1±14.1)%vs(35.5±10.3)%;P<0.01]、淋巴细胞转化率下降(P<0.01);六羟多巴胺阻断后应激组较单纯应激组NK细胞活性增大[(31.9±14.7)vs(22.1±14.1);P<0.05]、淋巴细胞转化率升高[(6985±580)cpm vs(4810±598)cpm,ConA(0.5ug/ml);P<0.01];灌胃加味逍遥丸后应激组较单纯应激组脏器指数升高、胸腺细胞凋亡率下降[(20.37±4.56)%vs(33.21±5.54)%;P<0.01];二者均能显著降低血糖皮质激素水平(P<0.05)。结论阻断外周交感神经明显保护心理应激小鼠的细胞免疫功能;加味逍遥丸通过减少胸腺细胞凋亡、防止胸腺和脾脏萎缩、降低血糖皮质激素等方面发挥抗应激损伤作用,其发挥作用的途径可能不是通过阻断外周交感神经实现的。     

丹参酚酸B抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症损伤通路防治心肌细胞的缺氧损伤

目的:探讨TLR4-NFκB-TNFα损伤通路和HSP70在体外缺氧培养心肌细胞中的变化规律以及丹参酚酸B的调节作用。方法:分离纯化出生1～3天Wistar乳鼠心肌细胞并复制体外缺氧培养心肌细胞模型。丹参酚酸B(SalB)大、中、小剂量浓度分别为10-5mol.L-1、10-6mol.L-1和10-7mol.L-1并在缺氧培养前6h进行干预。细胞爬片免疫组化法检测tool样受体4(TLR4)和核因子κB(NFκB)蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNFα)和热休克蛋白70(HSP70)的浓度,分光光度计法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果:与正常组比较,缺氧培养6h后心肌细胞上清液中MDA、LDH、TNFα含量均显著升高(3.71±0.84)VS(1.78±0.56)(,561.41±129.31)VS(36.80±10.22)(,89.39±21.65)VS(49.42±4.16),P<0.055或P<0.051);心肌细胞TLR4和NFκB蛋白的表达量也显著升高(P<0.055或P<0.051)。与单纯缺氧培养组比较,丹参酚酸B大剂量组MDA含量显著下降(1.94±0.49)VS(3.71±0.84),P<0.051;大、中、小剂量组LDH含量均显著下降(P<0.051);大、中剂量组TNFα含量显著下降(P<0.055);丹参酚酸B大、中、小剂量组NFκB及TLR4蛋白的表达面积或强度均有明显的下降(P<0.055或P<0.051)。结论:TLR4-NFκB-TNFα炎症通路在缺氧培养6h后即明显激活,该通路的激活在缺氧损伤初期(6h内)是不依赖HSP70存在的。丹参酚酸B预防给药对缺氧培养的体外心肌细胞炎症损伤有明显的保护作用。该作用可能与抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症通路有关。     

广痛消泡沫气雾剂的止痛解痉作用

目的 :观察广痛消泡沫气雾剂对小鼠和大鼠的镇痛及解痉作用。方法 :采用小鼠扭体法、大鼠甩尾法和直肠平滑肌体外收缩生理仪描计法。结果与结论 :广痛消泡沫气雾剂 18.75 ,12.50g·kg^-1灌胃后 ,能明显提高小鼠化学刺激和大鼠物理刺激后的痛阈 ,也具有解痉作用。     

麻杏石甘汤治疗新冠肺炎细胞因子风暴的网络药理学分析

目的:用网络药理学方法探讨麻杏石甘汤成分、靶点、通路和生物学功能，阐明其治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)细胞因子风暴的作用机制。方法:通过TCMSP、TCMID数据库以及文献报道，搜索麻杏石甘汤每味中药的成分和靶点，用Cytoscape软件构建和成分-靶点网络。用STRING搜素靶点的相关蛋白，并构建PPI网络。利用MECODE和ClusterOne聚类找出二者共同的关键靶点。利用Metascape和ClueGO对关键靶点进行通路和生物学功能富集分析。结果:麻杏石甘汤中麻黄有效成分6个、苦杏仁8个、石膏3个、生甘草92个。聚类分析得到67个关键靶点，其中IL-6和TNF是重要的核心靶点。麻杏石甘汤主要参与的分子通路和生物学功能与病毒感染和细胞因子免疫调节相关的是:人T细胞白血病病毒1型（TLV-1）感染；单纯疱疹病毒感染；TNF-R1信号通路和相关信号复合物；整合素1途径；白细胞介素信号；TH17细胞分化；炎性反应的调节；PI3K-Akt信号通路；白细胞介素-2介导的信号通路；免疫应答中细胞因子分泌的负调控；内皮屏障建立的调控；T细胞稳态增殖的调控。结论:麻杏石甘汤通过多成分、多靶点对机体的病毒感染和免疫炎性反应起到多方面的调控，包括促进TH细胞分化和T细胞稳态抑制病毒复制，负调控白细胞介素、TNF、整合素等免疫炎性反应递质消除细胞因子风暴。麻杏石甘汤针对COVID-19的病毒复制和细胞因子风暴具有显著的调节作用。