静脉桥模型大鼠在血管重塑过程中与失效有关的长链非编码RNA的筛选

  目的  本研究旨在利用高通量测序技术分析长链非编码RNA（lncRNA）在大鼠自体静脉桥中的时间差异性表达,筛选出与静脉桥失效具有显著相关性的lncRNA。  方法  根据不同采样时间点将12只雄性SD大鼠随机分为4组 （分别为0 d、术后7 d、术后14 d、术后28 d组,每组3只）。其中以0 d组为对照组,其余3组为实验组（实验组大鼠制备颈外静脉-颈动脉旁路模型）。对静脉移植物样本进行高通量测序,并利用实时定量PCR（RT-qPCR）进行样本验证。通过识别在不同时间点差异表达的lncRNA及基因本体论（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析,对lncRNA-mRNA对进行功能预测,筛选出在静脉移植物管腔再狭窄过程中可能发挥潜在作用的lncRNA,并用RT-qPCR进行样本验证。  结果  高通量测序共获得了 2 572个静脉移植术后持续差异表达的lncRNA,同对照组（0 d）相比,分别在术后7、14、28 d差异表达程度前十位的lncRNA在文中列出。基于GO富集分析及KEGG通路分析结果,我们制定了以下筛选标准筛选出可能在冠脉动脉旁路移植术后移植物失效过程中发挥潜在关键作用的lncRNA-mRNA:①参与上述生物学过程或信号通路;② lncRNA可调节靶向mRNA转录;③既往已有报道靶向mRNA在血管病变过程中发挥作用;④lncRNA和mRNA均有显著性差异表达。最终筛选出包括MRAK083052-Nrp1在内的15对在静脉移植物管腔再狭窄过程中可能发挥潜在作用的lncRNA-mRNA。RT-qPCR结果与高通量测序结果一致。  结论  本研究发现大鼠静脉桥管腔再狭窄过程中lncRNA的表达变化情况与时间具有相关性。筛选并验证了15对在静脉移植物管腔再狭窄过程中可能发挥重要作用的lncRNA-mRNA。     

EGCG对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及作用机制探讨

目的 观察没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, IRI)的保护作用,并探讨其作用机制。方法 建立大鼠急性心肌缺血再灌注（I/R）模型,将大鼠分为假手术组(SO组)、I/R组和EGCG组。EGCG 组（10 mg/kg）在再灌注开始前5 min予以静脉滴注。采用心电图记录仪观察I/R过程中室性心律失常发生频次并评分,检测大鼠血清中心肌酶学〔乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）〕水平,心肌组织中炎症因子〔肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6和白介素-8（IL-6和IL-8）〕的表达,心肌组织HE染色进行病理学观察,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶 (phosphatidyl inositol 3-kinase, PI3K ) / 蛋白激酶B (Akt)通路蛋白中磷酸化的PI3K调节亚基(p-p85)和Akt蛋白（p-Akt)表达水平。结果 I/R组大鼠各类室性心律失常的频次增加明显,其心律失常严重程度评分(P<0.01)、血清中LDH与CK表达水平、心肌组织中TNF-α、IL-6和IL-8的表达水平均高于SO组 (P<0.05);EGCG组心律失常严重程度评分、LDH与CK的表达水平、心肌组织中TNF-α、IL-6和IL-8的表达水平均低于I/R组(P<0.05),并且EGCG组大鼠心肌病理学损伤程度轻于I/R组,EGCG组大鼠心肌中p-p85与p-Akt表达水平高于I/R组(P<0.05)。结论 EGCG能通过激活PI3K/Akt信号通路抑制炎症反应水平,有效减轻IRI。     

TFF3、TPX2、WIP1、Ang2表达水平变化与甲状腺结节患病的关系

目的分析蛋白在不同类型甲状腺结节组织中的表达及意义。方法随机选取2016年1月-2017年1月我院甲状腺手术切除标本306例,经术后病理证实分为结节性甲状腺肿56例、甲状腺腺瘤95例及甲状腺癌155例,采用免疫组化方法对TFF3、TPX2、WIP1、Ang2在不同类型甲状腺结节中的表达情况进行检测,并比较表达的阳性率与肿瘤大小、是否发生淋巴结转移等临床特征的相关性。结果 TFF3、TPX2、WIP1、Ang2蛋白在甲状腺肿、甲状腺瘤和甲状腺癌三组间表达强度均有显著差异(P<0.01)。TFF3、TPX2蛋白表达与肿瘤大小和淋巴结转移有关(P<0.01),而WIP1、Ang2蛋白表达仅与肿瘤大小有关(P<0.01),而与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 TFF3、TPX2、WIP1、Ang2蛋白的免疫组化检测有助于判别甲状腺结节性质。     

3D打印技术结合PBL教学法在心脏外科本科教学中的价值分析

目的 2019年9月—2020年1月,研究分析3D打印技术结合PBL教学法在心脏外科本科教学中的价值.方法 纳入临床本科学生共16组(207人)作为研究分析对象,使用随机区组法将16组学生分为观察组(8组,103人)、对照组(8组,104人),对照组学生通过常规教具联合PBL教学法进行教学,观察组学生通过3D打印技术结合PBL教学法进行教学,对比两组学生考核成绩以及教学效果.结果 在学生考核成绩方面,观察组学生明显高于对照组学生(P<0.05);在学习积极性、理论知识理解、学习能力培养、外科操作能力以及临床思维能力方面,观察组学生均明显优于对照组学生(P<0.05),差异具有统计学意义.结论 在心脏外科本科教学中,应用3D打印技术结合PBL教学法具有显著教学效果,更加有效的帮助学生对心外科疾病知识的理解以及提升学习效率.     

基于炎症反应变化程度的主动脉夹层病程分期的初步探讨

目的 观察不同时间段主动脉夹层患者血液中炎症介质浓度变化规律，并在炎症反应变化基础上初步探讨主动脉夹层的病程分期。方法四川大学华西医院心脏大血管外科2011年9月至2012年2月收治主动脉夹层患者46例，其中男33例、女13例，年龄22～77（53．2±13．6）岁，分别于出现首发症状到12h（0～12h，记为T1）、12～24h（T2）、24～48h（T3，1～2d）、48～96h（T4，2～4d）、96～168h（T5，4～7d）、168～336h（T6，7～14d）、336～720h（T7，14～30d）、720～1440h（T8，30～60d）和〉1440h（T9，〉60d）9个时间段采集患者血液样本，检测肿瘤坏死因子a（tumor necrosis factor-a，TNF-a）、白细胞介素6（interleukin-6，IL．6）、C反应蛋白（C-reactiv eprotein，CRP）、内毒素（endotoxin，ET）、白细胞（white blood cell，WBC）和中性粒细胞（neutrophil，Neut）炎症介质浓度，分析总结主动脉夹层患者的炎症反应变化规律。结果14d以内（T1～T6）患者血液样本中各炎症介质水平均明显增高，14～60d（T7～T8）各炎症介质水平明显下降，〉60d（T9）各炎症介质回归正常水平。ET和TNF-α的峰值均出现在T1时间段，分别为（263．42±29．98）pg／ml和（86．75±18．83）pg／ml；IL一6的峰值出现在T2时间段，为（95．70±22．64）pg／ml；CRP的峰值出现在T5时间段，为（123.74±54.78）mg／L；WBC和Neut没有明显的峰值。结论基于炎症反应变化程度，主动脉夹层病程具备急性期（≤14d）、亚急性期（14～60d）及慢性期（〉60d）三个阶段。     

主动脉中膜诱发全身炎症反应动物模型的建立

目的 建立主动脉中膜诱导全身炎症反应的动物模型，证实主动脉夹层的特征性病理改变——主动脉中膜暴露于血液可以引起全身炎症反应。 方法 通过外科技术剥离供体C57/BL6小鼠主动脉中膜并进行匀浆，离心后取上清液注射入受体小鼠体内，利用ELISA技术检测不同时间点实验动物血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）变化规律。 结果 除基线水平外，小鼠体内注入主动脉中膜提取物后不同时间点血清中TNF-α、IL-6均升高（P<0.05），TNF-α和IL-6的峰值均出现在3 h和24 h。 结论 主动脉中膜与血液接触可以诱导实验动物全身炎症反应。     

3D打印技术结合PBL教学法在心脏外科本科教学中的价值分析

目的 2019年9月—2020年1月,研究分析3D打印技术结合PBL教学法在心脏外科本科教学中的价值.方法 纳入临床本科学生共16组(207人)作为研究分析对象,使用随机区组法将16组学生分为观察组(8组,103人)、对照组(8组,104人),对照组学生通过常规教具联合PBL教学法进行教学,观察组学生通过3D打印技术结合PBL教学法进行教学,对比两组学生考核成绩以及教学效果.结果 在学生考核成绩方面,观察组学生明显高于对照组学生(P<0.05);在学习积极性、理论知识理解、学习能力培养、外科操作能力以及临床思维能力方面,观察组学生均明显优于对照组学生(P<0.05),差异具有统计学意义.结论 在心脏外科本科教学中,应用3D打印技术结合PBL教学法具有显著教学效果,更加有效的帮助学生对心外科疾病知识的理解以及提升学习效率.     

3D打印技术结合PBL教学法在心脏外科本科教学中的价值分析

目的 2019年9月—2020年1月,研究分析3D打印技术结合PBL教学法在心脏外科本科教学中的价值.方法 纳入临床本科学生共16组(207人)作为研究分析对象,使用随机区组法将16组学生分为观察组(8组,103人)、对照组(8组,104人),对照组学生通过常规教具联合PBL教学法进行教学,观察组学生通过3D打印技术结合PBL教学法进行教学,对比两组学生考核成绩以及教学效果.结果 在学生考核成绩方面,观察组学生明显高于对照组学生(P<0.05);在学习积极性、理论知识理解、学习能力培养、外科操作能力以及临床思维能力方面,观察组学生均明显优于对照组学生(P<0.05),差异具有统计学意义.结论 在心脏外科本科教学中,应用3D打印技术结合PBL教学法具有显著教学效果,更加有效的帮助学生对心外科疾病知识的理解以及提升学习效率.     

BMP4在合并糖尿病的冠状动脉旁路移植术患者原位静脉桥病变中的作用

目的 观察合并糖尿病的冠状动脉旁路移植术(CABG)患者大隐静脉的形态学变化以及骨形态发生蛋白-4(BMP4)在其管壁中的表达与分布情况,初步探讨BMP4在合并糖尿病患者CABG术后静脉桥病变进展中的潜在作用。方法 前瞻性配对纳入2013年1月至2014年12月于我院接受CABG的40例血糖正常患者和40例合并2型糖尿病的患者,并根据糖尿病患者是否需胰岛素治疗分为非胰岛素依赖组(n =24)和胰岛素依赖组(n =16)。应用HE染色测算各组患者静脉桥血管壁的形态学参数,Western blot和免疫组化技术观察BMP4在各组患者静脉管壁中的表达及分布情况。结果 糖尿病患者大隐静脉内膜和中膜增生较非糖尿病患者显著。免疫组化显示BMP4主要表达于静脉中膜平滑肌细胞,而BMP4表达量在糖尿病患者大隐静脉管壁内较非糖尿病患者增高（P <0.05)。糖尿病患者静脉桥中BMP4的表达量与其内膜厚度(r =0.655,P <0.01)、内膜面积(r =0.684, P <0.01)、中膜厚度(r =0.642,P <0.01)、中膜面积(r =0.692,P <0.01）均呈明显正相关。结论 合并糖尿病的CABG患者大隐静脉内膜和中膜增生程度与管壁内BMP4高表达中度相关,而BMP4可能在此类患者静脉桥加速失效进程中发挥了重要的促进作用。以BMP4为靶点的治疗策略是否有助于改善糖尿病患者CABG术后静脉桥通畅率值得深入研究。     

基于分子对接技术筛选新型冠状病毒S蛋白-血管紧张素转化酶2小分子抑制剂

目的采用分子对接技术筛选新型冠状病毒S蛋白与血管紧张素转化酶2(ACE2)小分子抑制剂。方法化合物库采用Selleck中国天然产物库(目录号L1400,2054种天然产物)。新型冠状病毒S蛋白与ACE2蛋白共晶采用周强研究员课题组发表结果(PDB:6M17)。采用DiscoveryStudio软件进行分子对接。结果通过虚拟氨基酸突变实验确定了关键氨基酸,并在此基础上确定了结合空腔,进而从天然化合物库中筛选出11个具有潜在抑制新型冠状病毒S蛋白与ACE2作用的化合物:毛地黄皂苷、灰毡毛忍冬皂苷甲、连翘酯苷B、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙、常春藤苷D、桔梗皂苷D、松果菊苷、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、异绿原酸C。结论从天然产物库中筛选出潜在的新型冠状病毒S蛋白-ACE2小分子抑制剂,为抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)药物研究及处方筛选提供参考。