核因子-κB p65和骨桥蛋白在子宫内膜癌组织与细胞中的表达及相关性研究

目的:探讨核因子-κB (NF-κB)p65和骨桥蛋白(OPN)在子宫内膜癌组织及细胞中的表达,并分析两者的相关性。方法:收集子宫内膜腺癌患者35例(子宫内膜腺癌组)、子宫内膜非典型增生患者35例(非典型增生内膜组)和正常子宫内膜患者35例(正常子宫内膜组),采用免疫组织化学法检测三组子宫内膜组织中NF-κBp65、OPN蛋白的表达。采用反转录PCR(RT-PCR)及Western blot检测正常内膜细胞及子宫内膜癌HEC-1-B细胞中两者蛋白及mRNA的相对表达水平。采用Pearson法分析NF-κBp65与OPN表达的相关性。结果:三组患者组NF-κBp65与OPN蛋白平均积分光密度(IOD)值比较差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜腺癌组和非典型增生内膜组NF-κBp65与OPN蛋白IOD值高于正常子宫内膜组,且子宫内膜腺癌组高于非典型增生内膜组(均P<0.05)。Western blot和RT-PCR结果显示,NF-κBp65和OPN蛋白及mRNA在子宫内膜癌HEC-1-B细胞中的相对表达水平明显高于正常内膜细胞(均P<0.05)。Pearson相关性...     

子宫内膜异位性疾病非手术法诊断的可行性探讨

目的评估非手术方法诊断子宫内膜异位性疾病的临床可行性。方法回顾性分析因痛经、不孕、盆腔包块结合超声,血清CA125检查初步诊断为子宫内膜异位性疾病而住院行手术治疗的患者179例。计算痛经、妇科检查阳性体征、超声和血清CA125指标单独及两项联合诊断内异性疾病的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果各单指标诊断内异症性疾病的灵敏性、特异性均较低,两指标联合的平行试验可将敏感性提高至85.54%,两指标联合系列实验特异性可提高至85.90%。痛经、妇科检查、超声、血清CA125,诊断子宫型内异性疾病的阳性率分别为79.07%、7.44%、72.09%、76.74%;诊断卵巢型内异症的阳性率分别为73.68%、60.53%、76.32%、71.05%;子宫型合并卵巢型内异症的阳性率除妇科检查外均高于单一型内异症。结论痛经结合临床诊治、血清学指标的非手术法诊断内异症性疾病是可行的,各指标联合诊断可提高内异性疾病的临床诊断价值,除超声指标外其他指标诊断子宫型内异症的价值较卵巢型内异症高。     

RNAi抑制IKK/NF-κB信号通路对子宫内膜异位症腺上皮细胞中MMP-9的表达及细胞侵袭性的影响

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默IκB激酶(IKK)/核因子κB(NF-κB)信号通路对子宫内膜异位症在位内膜腺上皮细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及细胞侵袭性的影响。方法根据基因数据库IKKα的c DNA序列,设计构建合成IKKαsiRNA转染10例EMs患者在位内膜原代腺上皮细胞,设立空白对照组(不加任何siRNA的等比例转染试剂)、阴性对照组(与IKKα同源性极低的无意义链siRNA)及实验组(IKKαsiRNA)。采用Realtime PCR、Western blot、Transwell等方法分别检测IKKαsiRNA转染前后NF-κB、MMP-9 mRNA和蛋白表达及腺上皮细胞侵袭性的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,实验组EMs腺上皮细胞中NF-кB、MMP-9蛋白及mRNA表达降低,差异有统计学意义(P0.05);IKKαsiRNA转染后EMs腺上皮细胞的细胞侵袭性明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 RNA干扰可抑制IKK/NF-κB信号通路进而显著降低细胞的侵袭,这种抑制作用可能是通过下调MMP-9的表达进而改变其侵袭作用诱导EMs的发生。     

仿刺参中海参皂苷HolotoxinA_1的分离制备及其含量的分析

目的分离制备海参皂苷HolotoxinA1单体,获得HolotoxinA1对照品;建立仿刺参(Apostichopus ja-ponicus)中HolotoxinA1的HPLC-ELSD定量分析方法,以此作为评价来源于不同海域的仿刺参中海参皂苷质量的依据。方法应用大孔树脂、HPLC对仿刺参中的HolotoxinA1进行分离纯化、制备海参皂苷Holotoxi-nA1单体,通过质谱、核磁确定其结构。采用Hypersil Gold C18(150mm×2.1mm,3μm)色谱柱,5mmol·L-1醋酸铵—乙腈溶液梯度洗脱建立海参皂苷HolotoxinA1的HPLC-ELSD方法。结果根据波谱数据确定分离制备的海参皂苷单体为三萜皂苷HolotoxinA1,HPLC-ELSD分析其纯度可作为对照品。建立的HPLC-ELSD方法在0.2～25μg·mL-1线性关系良好(r=0.999),检测限为0.05μg·mL-1;5种来源于不同海域的仿刺参中的海参皂苷均以HolotoxinA1含量最多,定量分析可知韩国东海岸产仿刺参中HolotoxinA1含量最多(588.20μg·g-1)福建产仿刺参中HolotoxinA1含量最少(21.33μg·g-1)。     

纳洛酮治疗重型颅脑损伤致弥漫性脑肿胀的临床观察

<正> 1999～2002年初,我们用盐酸纳洛酮治疗重型颅脑损伤所致弥漫性脑肿胀的临床观察效果满意,现报告如下。1 资料和方法1.1 病例选择和分组 按GOS评分,入院时计分以5～8分作为入选对象,均经神经系统检查,头颅CT诊断明确共60例,男42例,女18例,年龄平均34岁,随机平均分为纳洛酮     

骨桥蛋白基因沉默对子宫内膜异位症患者在位内膜细胞侵袭性的影响

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)基因沉默对子宫内膜异位症(EMS)患者在位内膜细胞侵袭性的影响。方法:采用原代细胞培养方法培养EMS患者在位内膜腺上皮细胞,分为干预组和未干预组。干预组采用OPN特异小RNA (siRNA)进行基因沉默。采用Western blot、RT-PCR检测细胞中OPN蛋白、mRNA表达情况。采用穿膜实验观察细胞的侵袭性变化。结果:与未干预组比较,干预组细胞OPN蛋白及mRNA表达明显下降(均P<0.05)。与未干预组比较,干预组细胞穿膜数减少(P<0.05)。结论:对EMS患者在位内膜腺上皮细胞进行OPN基因沉默后,细胞OPN蛋白、mRNA表达降低,侵袭性明显减弱,说明OPN与细胞侵袭性明显相关。     

骶主韧带-阴道环重建术治疗盆腔器官脱垂的临床研究

目的:探讨行子宫切除术的同时,利用残留的骶、主韧带行多点悬吊术重建阴道环在治疗I度盆腔器官脱垂中的疗效及其对患者术后生活质量的影响。方法:选取子宫良性病变合并I度盆腔器官脱垂(POP)的45例患者,其中25例行经腹全子宫切除术+骶主韧带多点悬吊术重建阴道环(悬吊组),20例行经腹子宫全切术(对照组)。术前及术后1月、3月、6月根据POP-Q分度、阴道长度等指标判断治疗疗效,生活质量问卷(PFID-20)评估患者的生活质量。结果:悬吊组与对照组的疾病分布、年龄、产次、术前POP-Q分度、术前PFID-20评分、平均手术时间和术中出血量等均无显著差异(P0.05)。术后1月、3月、6月,悬吊组C点测量值分别为-8.4±0.72、-8.0±0.72和-8.0±0.72,对照组分别为-5.3±0.57、-5.3±0.57和-5.0±0.43,两组比较差异显著(P0.05);悬吊组Aa点测量值分别为-2.1±0.78、-2.0±0.70和-2.0±0.70,对照组分别为-0.66±0.57、-0.67±0.57和-0.67±0.51,两组比较差异显著(P0.05);悬吊组Ba点测量值分别为-2.44±0.52、-2.44±0.52和-2.33±0.50,对照组分别为-2.00±0.00、-2.00±0.00和-1.33±0.50,两组比较差异显著(P0.05);悬吊组Ap点测量值分别为-2.3±0.54、-2.4±0.38和-2.4±0.58,对照组分别为-0.5±0.86、-0.67±1.0和-0.69±1.0,两组比较差异显著(P0.05);悬吊组Bp点测量值分别为-2.5±0.47、-2.4±0.42和-2.5±0.42,对照组分别为-1.0±0.00、-1.0±0.00和-1.1±0.28,两组比较差异显著(P0.05)。悬吊组的生活质量问卷评分分别为20.77±23.7、9.89±9.13和9.44±9.54,对照组分别为62.5±10.6、67.6±2.08和53.6±8.5,两组比较差异显著(P0.05)。结论:骶主韧带多平面悬吊术可重建阴道环代替宫颈环的盆底支持作用,临床治疗Ⅰ度盆腔器官脱垂疗效肯定,副作用少。     

腹腔镜治疗巨大卵巢良性肿瘤的临床优势

目的探讨腹腔镜治疗巨大卵巢良性肿瘤的可行性及优势。方法回顾性分析腹腔镜下巨大卵巢良性肿瘤手术20例（腹腔镜组）与开腹巨大卵巢良性肿瘤手术（开腹组）30例的临床资料,比较2组的手术时间、出血量、住院时间、术后恢复情况等。结果 2组患者均顺利完成手术。术中腹腔镜组与开腹组平均手术时间分别为（48.0±12.8）、（68.5±22.6）min,术中出血量分别为（27.2±18.6）、（60.0±29.4）mL,平均住院日分别为（3.00±1.1）、（3.86±1.7）d,2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;术后排气时间腹腔镜组与开腹组分别为（24.1±2.5）、（30.2±4.7）h,2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;2组患者术后发热率腹腔镜组为10%,开腹组为27%,2组患者比较差异无统计学意义（χ2=3.1,P〉0.05）。结论腹腔镜治疗巨大卵巢良性肿瘤临床可行,具有创伤小、手术时间短、术中出血少、术后住院时间短等优势。     

青岛市某三级医院就诊患者ABO血型正反定型不符原因分析

目的:回顾性分析青岛市某三级医院住院和门诊就诊患者中，ABO血型正反定型不符的检出率和常见原因。方法:采用Ortho AutoVue全自动血型及配血系统对该院2019年11月—2023年2月门诊及住院患者进行常规ABO血型检测，方法为全自动血型系统微柱玻璃珠法，排除人为实验误差，对ABO正反定型不符的样本进行分类、进一步检测并登记，综合分析确定引起ABO正反定型不符的原因，汇总分析该院引起ABO血型正反定型不符的常见原因及处理措施。结果:微柱玻璃珠法检测26 065例患者，ABO血型正反定型不符68例，检出率0.26%。68例正反定型不符标本中，弱/无红细胞反应类型4例，占5.88%;额外的红细胞反应类型8例，占11.76%;混合红细胞反应类型9例，占13.24%;弱/无血清反应类型12例，占17.65%;额外的血清反应类型35例，占51.47%。意外抗体中检出最多的为抗-M抗体。ABO基因第6、7外显子直接测序22例，检出ABO亚型等位基因11例，全部为B亚型等位基因，B(A)亚型为主，未检出A亚型等位基因，检出O亚型等位基因4种，并检出1例新的等位基因突变c.272T>C。结...     

室温酶解结合差速离心法分离子宫内膜腺上皮细胞及活性评估

目的 探讨室温酶解结合改良式差速离心法分离培养人子宫内膜腺上皮细胞的效果及细胞活性评估.方法 选择子宫腺肌症患者在位增殖晚期及分泌期内膜10例,所得内膜分为两份,一份采用室温酶解结合改良式差速离心法（改良组）分离,一份采用37℃水浴消化结合筛网法（对照组）分离,通过细胞计数、细胞免疫化学及MTT法分别比较两种方法分离培养子宫内膜腺上皮细胞的数目、纯度及细胞生长活性.结果 两组中10份标本均获得成功;改良组每g内膜组织可得到（9±1.7）×10^7个腺上皮细胞,免疫细胞化学角蛋白表达阳性,纯度达（97.8±0.002）％;对照组可得到（3.9±0.78）×10^7个腺上皮细胞,角蛋白表达阳性,纯度达（88.6±0.006）％,改良组分离的腺上皮细胞数量和纯度均明显高于对照组（P＜0.05）.MTT结果显示改良组细胞在对数生长期生长活性明显高于对照组（P＜0.05）.结论 采用室温酶解结合改良式差速离心法可高纯度分离子宫内膜腺上皮细胞,并且细胞数量多,活性好,可用于子宫内膜疾病的药物干预及机制学的研究.