siRNA联合预照射对肺癌细胞survivin基因表达影响

目的 探讨小干扰RNA(siRNA)联合预照射对肺癌细胞survivin基因表达的影响。方法 在肺癌A549细胞中转染survivin基因的siRNA,分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blotting方法检测survivin基因mRNA和蛋白的表达。将肺癌A549细胞分为单纯放射组、单纯转染组、转染+放射组,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用细胞集落形成实验检测细胞增殖情况,采用CCK8测细胞生长曲线。结果 siRNA能抑制肺癌细胞survivin基因mRNA和蛋白的表达。siRNA联合预照射较单纯转染和单纯放射能显著增加细胞凋亡率,降低细胞的集落形成,抑制细胞生长。结论 预照射可以增强siRNA对肺癌细胞survivin基因的抑制作用。     

125I放射性粒子植入治疗恶性纤维组织细胞瘤术后肺转移瘤的短期效果观察

目的 探讨CT引导下经皮穿刺放射性125I粒子肿瘤内植入治疗恶性纤维组织细胞瘤(MFH)术后肺转移瘤的短期临床效果.方法 选择MFH术后肺转移瘤患者8例,转移病灶28个,行CT引导下经皮穿刺肿瘤内放射性125I粒子植入,处方剂量80 Gy,粒子活度0.7 mCi(2.59×107 Bq).粒子植入术后6个月复查胸部CT,与粒子植入前比较肿瘤变化,按照国际标准判定疗效.结果 接受粒子植入的瘤体平均照射剂量(172.9±39.9)Gy,D100( 77.7±10.2)Gy,D90 (97.2 ±6.8)Gy.有效率为82.1％(23/28),患者术后生存10.0 ～26.0个月,平均(14.6±3.5)个月,中位生存期13.0个月.结论 放射性粒子对MFH肺部转移病灶短期局部效果明显.     

1例溴敌隆中毒与出血性疾病的鉴别分析

溴敌隆（Bromadiolone）,别名为灭鼠酮、乐万通等,是一种高毒抗凝血性杀鼠剂,属茚满酮类抗凝血剂,是笔者在日常工作中经常遇到的一种毒物。半衰期60h,中毒潜伏期长,中毒症状至少在12—24h后出现,需3～5d中毒达高峰期。毒理作用是抑制凝血酶原和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的生物合成,导致凝血障碍,其体内代谢产物亚苄基丙酮还可损害毛细血管壁,使其通透性增强,血液易渗出,导致大出血而死亡。由于有出血倾向,在临床上容易被误诊为出血性疾病而没有采取洗胃、催吐、导泻等排毒措施,以致延误病情或导致中毒者死亡,     

半去势雄性大鼠外周血中睾酮代偿性变化的研究

目的 研究半去势雄性大鼠外周血中睾酮水平变化规律.方法 取20只性功能正常的雄性SD大鼠,随机分为正常组与半去势组(n=10),分别行右侧睾丸摘除术与假手术后,第2,3、5、7、9周放射免疫法检测外周血中睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素(FSH)含量.结果 在各时间段内,半去势组T含量显著低于正常组(P<0.05),半去势组第7周显著高于第2、3、5、9周(P<0.05),正常组各周间差异则无统计学意义(P>0.05).半去势组LH在2、3、5、7、9周后均显著高于正常组(P<0.05),在各时间段内,半去势组第7周显著高于2、3、5、9周(P<0.05),而第3、5周与第9周间差异无统计学意义(P>0.05).半去势组与正常组间FSH含量差异无统计学意义(P>0.05),半去势组2、3、5、7、9周间差异亦无统计学意义(P>0.05)结论半去势后T水平显著降低,其代偿性升高于现象9周后回落,其代偿机制可能与LH相关.     

放射性粒子植入治疗不能手术的早期非小细胞肺癌疗效分析

  目的  探讨CT引导下经皮穿刺植入125Ⅰ放射性粒子近距离治疗不能外科手术的早期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的临床疗效。  方法  选取2003年1月至2012年12月在天津医科大学第二医院接受治疗的经病理学明确诊断的早期NSCLC患者48例,其中Ⅰ期患者18例,Ⅱ期（N₀）患者30例,对患者行CT引导下放射性125Ⅰ粒子植入治疗,术后6个月复查胸部CT,与粒子植入前进行比较,按照国际标准判定疗效。随访截至2013年12月。  结果  全部患者顺利完成粒子植入治疗,靶区瘤体MPD（127.3±15.6）Gy,D₁₀₀（113.1±17.2）Gy,D₉₀（148.6±19.4）Gy,D₉₀>MPD。术后6个月查胸部CT判定疗效,Ⅰ期患者中CR 27.8%（5/18）,PR 72.2%（13/18）,SD、PD为0;Ⅱ期患者中CR 10%（3/30例）,PR 73.3%（22/30例）,SD 13.3%（4/30）,PD 3.3%（1/30）。有效率（CR+PR）为Ⅰ期100%,Ⅱ期83.3%,总有效率89.6%。随访期内全部患者1年局控率85%,1年生存率95.8%（46/48）,2年生存率81.3%（39/48）,5年生存率56.3%（27/48）。  结论  对于不能外科手术的早期非小细胞肺癌,进行CT引导下125Ⅰ放射性粒子植入治疗,是一种微创有效的治疗方法。      

骨髓间充质干细胞培养并向骨骼肌诱导分化的实验研究

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）的定向分化及其在体内的形态发育情况。方法 Wistar大鼠24只，向其左胫前肌处注射0．2ml无水乙醇，致其无菌坏死，右胫前肌注射等渗盐水0．2ml作为对照，制成动物模型后备用；取大鼠第3代BMSCs，5-氮杂胞苷、成肌调节因子（MyoD）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）联合进行诱导分化。诱导后第9天，收集BMSCs，用BrdU标记并诱导后注射到大鼠双下肢胫前肌处，分别在3，6，9和12d取材进行形态观察和免疫组织化学检查。结果 注射诱导后3d，实验组的成活率明显高于注射单纯注射BMSCs的对照组，BrdU标记细胞向骨骼肌分化，结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白均为弱阳性表达，6，9d可见BrdU标记细胞向骨骼肌分化，结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白阳性表达，第9天更为明显，注射后12d后可见新生骨骼肌细胞形成肌小管，细胞核结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白强阳性表达。结论 大鼠损伤肌肉的微环境中，BMSCs可向骨骼肌定向分化，并伴有结蛋白和骨骼肌肌球蛋白阳性表达；定向诱导后BMSCs在体内成活率高，增殖速率快，向骨骼肌分化纯度更高。     

成肌分化因子和5-氮杂胞苷联合诱导骨髓间充质干细胞向骨骼肌细胞分化的实验研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）在体外定向分化为骨骼肌细胞的干预条件。方法取健康4周龄Wistar大鼠MSCs制成细胞悬液接种于培养瓶中，置于37C、5％CO2恒温培养箱中培养，倒置相差显微镜下观察，细胞布满瓶底即为1代，取第3代MSCs，以5-氮杂胞苷10μmol／L、成肌分化因子0．1ng／ml、转化生长因子β1 0.1ng／ml、胰岛素样生长因子12ng／ml进行联合诱导，使之分化。诱导后第9天，收集细胞，行MTT比色法、流式细胞仪和免疫组织化学检测鉴定细胞。结果原代培养的MSCs呈贴壁生长，3～5d呈集落样生长，5～7d后有体积不等的多突成纤维细胞、较大的扁平多角形细胞、中等的多角形细胞和较小的三角形细胞。培养12d后，细胞融合，铺满瓶底，MSCs形态变化不明显。联合诱导后，部分细胞死亡，生长缓慢；7d后见细胞明显增殖，体积逐渐增大，呈椭圆形、梭形或不规则形状；14d后，大量增殖的长梭形细胞开始增多；18～22d后，肌管数量增多，体积增大，核数亦明显增多，初生肌管与长梭形成肌细胞呈平行排列，间隔分布。MSCs免疫组织化学法测定CD44反应阳性，胞质呈棕褐颗粒，核周明显，CD34呈阴性反应；诱导后MSCs结蛋白、骨骼肌特异肌球蛋白均为阳性表达。流式细胞仪测定MSCs和诱导后MSCs大部分处于G0／G1期，分别占79．4％、62．9％，而G2／S／M期仅占20．6％、36．1％。根据MTT绘制生长曲线，可见MSCs生长速度明显高于诱导后的MSCs。两种细胞并未达到平台期，都有继续增殖的趋势。结论在体外，MyoD、5-氮杂胞苷可以诱导MSCs向骨骼肌细胞定向分化，并伴有结蛋白和骨骼肌肌球蛋白阳性表达；定向诱导后MSCs增殖期比例大，向骨骼肌细胞分化纯度更高。     

3.0 T MRI在直肠癌术前分期和评估中的应用价值

目的　探讨3.0 T MRI在直肠癌术前分期和评估中的应用价值。方法　收集经肠镜及病理确诊的76例直肠癌患者资料,通过术前MRI影像判断T分期、N分期并测量肿瘤下缘至肛缘距离,将MRI分期和评估结果与术后病理进行对照分析。结果　MRI诊断T1期9例,T2期19例,T3期32例,T4a期14例,T4b期2例。病理诊断T1期9例,T2期22例,T3期28例,T4a期15例,T4b期2例。MRI T1、T2、T3、T4a、T4b期诊断敏感度和特异度分别为67%和100%、68.2%和92.6%、89.3%和85.4%、80.0%和96.7%、100%和100%,两者一致性较好（Kappa=0.708,P＜0.05）。MRI诊断肠旁淋巴结转移36例,术后病理诊断肠旁淋巴结转移33例, MRI诊断肠旁淋巴结转移敏感度、特异度分别为85.2%和83.3%（Kappa=0.701,P＜0.05）。76例患者中有12例患者行Miles术,术前均通过MRI曲线测量技术测量肿瘤下缘至肛缘距离,与术后病理标本数据进行对比,差值≤7 mm,差异无统计学意义（t=0.480,P＞0.05）。结论　3.0 T MRI可准确地对直肠癌患者进行术前分期和评估,为临床诊疗提供帮助。