大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch信号与RhoA/Rho激酶信号的协同作用

目的 探讨Notch信号通路在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中与RhoA/Rho激酶信号的协同作用.方法 实验分为无血清培养基对照组和盐酸法舒地尔组.采用盐酸法舒地尔诱导大鼠MSCs分化为神经细胞.RT-PCR检测Hes1的表达变化;免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经微丝蛋白亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化.结果 ①盐酸法舒地尔组MSCs的Hes1 mRNA转录下降(P<0.05).②盐酸法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,NSE、NF-M的阳性表达率显著高于无血清培养基组(P<0.05).结论 盐酸法舒地尔在诱导大鼠MSCs向神经细胞分化过程中,可能存在Notch信号通路与RhoA/Rho激酶通路信号的协同作用,共同促进MSCs向神经细胞分化. Abstract： Objective To investigate the cross-talk between notch and Rho/Rho GTPase signaling on rat bone marrow mesenchymal stem cells differentiating into neurons. Methods The experiments were divided into serum-free medium control group and fasudil hydrochloride group. Fasudil hydrochloride induces MSCs differentiating into neurons. The expression of Hes1 mRNA was detected by RT-PCR. The expression of neuron-specific enolae(NSE), neurofilament M (NF-M) and glial fibrillary acidic protein (GFAP)was detected by immunocytochemical method. Results ①The Hes1 mRNA expressed by MSCs of fasudil hydrochloride group was significantly decreased(P<0.05).②Fasudil hydrochloride can induce MSCs differentiating into neurons and there was higher expression of neuron-specific enolae(NSE) and neurofilament-M (NF-M) than the serum-free medium control group(P<0.05).Conclusions There may be cross-talk between notch signaling and RhoA/Rho GTPase signaling on differentiation of rat bone marrow stromal cell into neurons induced by fasudil hydrochloride and they jointly promoted the differentiation of MSCs into neurons.     

核因子-κB在盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经细胞的作用

目的探讨核因子-κB信号通路在大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经元分化中的作用。方法实验分为无血清培养基对照组、盐酸法舒地尔组。采用盐酸法舒地尔诱导大鼠MSCs分化为神经元。免疫细胞化学法检测神经元烯醇化酶（NSE）、神经微管结合蛋白（MAP-2）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化及核因子-κB亚基p65核移位情况。结果①盐酸法舒地尔可以诱导MSCs向神经元分化,NSE、MAP-2的表达率高,但对照组无类似情况（P〈0．05）。②盐酸法舒地尔组MSCs的p65核移位明显受抑制,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论盐酸法舒地尔可以抑制核因子-κB活化,可能有利于MSCs向神经细胞分化。     

ANCA阳性的重症肌无力合并桥本甲状腺炎、周围性面瘫1例

正重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是神经内科常见的自身免疫性疾病,以受累肌肉的无力、易疲劳为主要表现,可以合并Graves病、桥本甲状腺炎、系统性红斑狼疮、吉兰-巴雷综合征等多种自身免疫性疾病。但到目前为止,国内尚无MG合并桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT),同时     

麝香提取物对大鼠皮层神经细胞炎性损伤的保护作用

目的研究麝香提取物(musk extract,ME)对脂多糖(LPS)诱导大鼠大脑皮层神经细胞炎性损伤的保护作用及其可能机制。方法分别培养新生大鼠大脑皮层神经细胞和星形胶质细胞(AC),使用终浓度为10mg/LLPS及ME18mg/L、36mg/L、72mg/L、144mg/L的分别作用于纯化的星形胶质细胞24h,收集条件培养液(ACM)。在神经细胞培养体系中分别加入ACM,采用MTT法及AO/EB染色法测定神经细胞存活率和凋亡率;ELISA法检测ACM中所含炎症因子的变化。结果 ME18mg/L、36mg/L、72mg/L及144mg/L组的神经细胞存活率(%)分别为52.55±3.52、55.77±2.36、64.89±3.45及73.67±1.80,较模型组(43.62±4.51)均显著提高(P0.05);细胞凋亡率(%)分别为68.11±2.16、44.27±3.68、32.56±2.14及21.89±2.46,与模型组(71.33±3.25)比较,均显著下降(P0.05,P0.01);ME组ACM中IL-6呈指数降低,且均呈剂量依赖性。结论麝香提取物对脂多糖所致神经细胞炎性损伤具有显著的保护作用,以144mg/L浓度最佳,其可能通过减少星形胶质细胞分泌IL-6起作用。     

阿尔茨海默病小鼠模型中骨髓间充质干细胞的神经分化

 目的：探讨淀粉样前体蛋白（APP）转基因小鼠（阿尔茨海默病小鼠模型）骨髓间充质干细胞（MSCs）的神经分化及其与参与调节干细胞分化的Notch1信号通路的关系,观察分化的骨髓间充质干细胞中自噬的变化。方法：实验分为APP转基因小鼠组（APP组）和野生型小鼠组（WT组）。采用β-巯基乙醇诱导小鼠MSCs分化为神经细胞;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测诱导后β淀粉样蛋白40（Aβ40）和42（Aβ42）的水平;采用免疫细胞化学染色法和Western blotting检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）和微管相关蛋白2（MAP-2）的表达变化;Western blotting检测Notch1、Notch胞内域（NICD）和Hes5的水平。结果：与野生型小鼠相比,APP转基因小鼠的骨髓间充质干细胞具有更强的神经分化能力、更高的Aβ表达及更强的Notch1信号抑制。但是,自噬作为神经细胞存活和神经功能必不可少的条件,在分化后的APP 转基因小鼠来源的MSCs中受损。结论:过表达APP可能通过抑制Notch-1信号通路增强小鼠骨髓间充质干细胞神经分化的能力,而分化后的APP转基因小鼠MSCs出现自噬通路异常。     

盐酸法舒地尔对体外培养大鼠神经干细胞分化的影响

目的观察盐酸法舒地尔对体外培养神经干细胞（NSCs）分化的影响。方法体外分离培养NSCs,通过不同浓度的盐酸法舒地尔干预后,采用免疫细胞化学及流式细胞技术检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果分离培养的NSCs具有自我复制、增殖能力,可以表达Nestin;诱导分化后的细胞可以表达NSE和GFAP。免疫细胞化学染色提示,盐酸法舒地尔干预组NSE阳性细胞显著高于对照组（P〈0．05）,但是不同浓度盐酸法舒地尔之间元统计学差异（P〉0．05）。流式细胞仪检测结果显示,盐酸法舒地尔干预组NSE阳性细胞比例明显增加,与对照组相比有统计学差异（P〈0．05）。结论盐酸法舒地尔可以促进NSCs向神经细胞方向分化。     

抗Ro52抗体阳性的抗合成酶综合征患者的临床特征分析

分析抗Ro52抗体阳性的抗合成酶综合征（ASS）患者的临床特征。收集2017年至2020年郑州大学第一附属医院风湿免疫科和呼吸科住院确诊的203例ASS患者,回顾性分析其一般资料、临床表现、实验室检查等。203例ASS患者中男55例,女148例,ASS发病年龄（51.9±13.3）岁。抗Ro52抗体阳性者163例,抗R...     

抗中性粒细胞胞质抗体阳性的感染性心内膜炎18例临床分析

目的:通过分析ANCA阳性的感染性心内膜炎（IE）的临床特点,旨在提高临床诊疗水平。方法:收集2016年6月至2021年7月在郑州大学第一附属医院住院确诊为IE且同时伴有血清学ANCA阳性的18例患者的临床资料,回顾性分析其一般情况、临床表现、实验室检查、影像学检查、治疗及转归。采用SPSS 20.0软件进行统计分析。...     

输尿管插管在妇科复杂手术中的应用体会

〔摘 要〕 目的：为预防患者输尿管在复杂的妇科手术中受到损伤,探讨在手术前对其采用输尿管插管的临床价值。 方法：研究对象筛选的时间段为 2021 年 5 月至 2022 年 4 月,筛选这 1 年期间在新疆生产建设兵团第三师总医院妇科 开展过复杂手术的患者,共计 21 例,包括宫颈癌患者 14 例,子宫腺肌症患者和巨大阔韧带、宫颈肌瘤患者各 1 例, 巨大卵巢肿瘤患者 2 例,子宫内膜异位症患者 3 例。患者均在手术前采用插入输尿管导管（必要时置入 D–J 管）, 后开展相应的手术治疗,术后将输尿管导管拔除,留置导尿管,观察患者的手术结果及并发症情况。结果：21 例 患者均成功完成对应的手术治疗,输尿管置管耗时平均为（8.5 ± 2.9）min,手术耗时平均为（89.7 ± 15.2）min。 所有患者在术中均未出现并发症,在术后有 3 例患者出现血尿,均在术后 3 d 内自行恢复。患者术后 10 d 内均未出现 输尿管感染或疼痛症状,且超声复查均无肾积水及输尿管扩张。结论：对需行妇科复杂手术治疗的患者,术前在膀胱 镜的引导下输尿管插管,能帮助临床医师在术中快速识别与分离输尿管,有效避免术中输尿管损伤,且插管方法操作 快捷、安全性高。     

Notch信号在盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用

目的 探讨Notch1信号通路在盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）向神经细胞分化中的作用。方法 实验分为未转染组、转染组（转染Rn-Notch1-siRNA）、阳性对照组（转染Rn-MAPK-1 Control siRNA）及阴性对照组（转染Negative Control siRNA）等4组。采用盐酸法舒地尔诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况;RT-PCR检测Notch1、Hes1和MAPK1 mRNA的表达变化;免疫细胞化学法检测Notch1、神经元巢蛋白（Nestin） 、神经微丝蛋白亚单位(NF-M) 和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果 1. siRNA转染72h,MSCs荧光表达最强, 转染率可达91.3%±4.2%;同时,转染组MSCs的Notch1和Hes1 mRNA转录下降（P<0.05）;MTT提示转染组细胞存活率也显著减少（P<0.05）。2. 盐酸法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以转染组诱导效果最佳,Nestin、NF-M的表达率显著的高于其它各组（P<0.05）。结论 盐酸法舒地尔在诱导大鼠MSCs向神经细胞分化过程中,可能存在Notch信号通路与RhoA/Rho激酶通路信号的协同作用,共同促进MSCs向神经细胞分化。