艾司西酞普兰对Aβ25-35诱导的大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的研究艾司西酞普兰(escitalopram,ESC)对β-淀粉样肽片段(β-amyloid peptide,Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病海马神经元细胞损伤的保护作用,并探讨其可能机制。方法以Aβ25-35诱导大鼠海马神经元细胞建立阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)模型,随机分为空白对照组、Aβ组、不同ESC组(0.5、1.0、1.5μmol·L-1)、Aβ+不同ESC(0.5、1.0、1.5μmol·L-1)组。通过荧光显微镜观察腺病毒(adenoviruses-enhanced green fluorescent protein,Ad-EGFP)转染的神经元细胞形态,MTS法检测细胞活性,Western blot检测脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达。结果与空白组比较,Aβ组及Aβ+不同浓度艾司西酞普兰组神经元细胞分支及长度均减少,细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.05),BDNF释放减少;与Aβ组比较,Aβ+不同ESC组神经元细胞分支数目及长度均增加,细胞活力上升,差异有统计学意义(P<0.05),BDNF释放增多。结论艾司西酞普兰能显著改善阿尔茨海默病模型神经元的存活率,发挥细胞保护作用,其机制可能是通过上调BDNF、减缓神经元退行性变以促进神经元的修复。     

中成药天智颗粒对血管性痴呆大鼠脑内神经细胞增殖的影响

目的观察中成药天智颗粒对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和神经前体细胞与星形胶质细胞增殖水平的影响。方法老年雄性SD大鼠192只,随机分为治疗组、模型组、假手术组和正常对照组,每组48只。治疗组、模型组采用双侧颈总动脉结扎方法建立血管性痴呆大鼠模型,于造模60d后治疗组大鼠应用天智颗粒5g/(kg·d)治疗30d。采用三等分Y型电迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力,应用免疫组织化学尿嘧啶脱氧核苷(BrdU)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色方法标记并观察神经细胞增殖变化,以比较各组大鼠学习记忆能力和神经细胞增殖的变化规律和差异。结果与正常对照组相比,假手术组大鼠的学习记忆能力和免疫组织化学检测结果无明显变化。经天智颗粒治疗30d后,治疗组大鼠学习记忆能力明显改善,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05),BrdU阳性细胞显著增加(P<0.05),而星形胶质细胞明显减少(P<0.05);但与正常对照组相比,其学习记忆能力、BrdU阳性细胞和星形胶质细胞数量仍未恢复至正常水平(P<0.05)。结论天智颗粒可通过促进神经前体细胞的增殖而抑制星形胶质细胞的增殖,从而改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力。     

鼠神经生长因子在格林-巴利综合征治疗中促神经修复的作用

目的:探讨鼠神经生长因子在格林-巴利综合征治疗中促周围神经修复的作用。方法:格林-巴利综合征脱髓鞘组98例,分为脱髓鞘治疗组(A)50例及脱髓鞘对照组(B)48例;格林-巴利综合征混合型组88例,分为混合型治疗组(C)45例,混合型对照组(D)43例。格林-巴利综合征单纯轴索病变组39例,分为轴索型治疗组(E)21例,轴索型对照组(F)18例。A,C,E组常规应用静脉注射丙种球蛋白0．4 g·kg~(-1)·d~(-1),连用5 d等治疗并加用鼠神经生长因子,B,D,F组仅常规应用静脉注射丙种球蛋白0．4g·kg~(-1)·d~(-1),连用5 d等治疗,疗程结束后做神经功能评价及肌电图评价。结果:脱髓鞘组中A组的明显好转、痊愈率及神经传导速度恢复明显高于B组,P＜0．05;混合型组中C组在明显好转、痊愈率及神经传导速度与波幅恢复较D组明显提高,P＜0．05;轴索型组中E,F组在临床明显好转及痊愈率无显著差异,P＞0．05,但波幅恢复E较F组明显提高,P＜0．05。结论:鼠神经生长因子对格林-巴利综合征周围神经髓鞘的再生和轴索的恢复有显著疗效。     

慢性脑缺血大鼠EphA4表达变化的研究

目的 探讨大鼠海马区及皮层EphA4表达在慢性脑缺血的不同时间点的动态变化.方法 大鼠随机分为正常组、假手术组、15 d、30 d和60 d模型组.采用双侧颈总动脉永久结扎建立慢性脑缺血模型:Morris水迷宫试验检测行为学变化:免疫组化染色检测EphA4的表达变化.结果 EphA4免疫反应阳性细胞数模型组比假手术组均增多(P<0.05>,与行为学改善基本相符.结论 慢性脑缺血造成EphA4表达持续升高可能是成年哺乳动物损伤后神经再生障碍的重要原因之一.     

3-硝基丙酸预处理对大鼠局灶性脑缺血Caspase-3表达和活性的影响

目的探讨小剂量线粒体毒素3-硝基丙酸(3-nitropropionic acid,3-NPA)预处理对大鼠局灶性脑缺血半暗带半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达和活性的影响。方法大鼠腹腔注射3-NPA20mg/kg或生理盐水3d后制作局灶性脑缺血再灌注模型,采用免疫印迹技术和荧光测定法观察3-NPA预处理对缺血2h再灌注24hCaspase-3的表达和活性的影响。结果缺血2h再灌注24h3-NPA预处理组Caspase-3表达减弱(P<0.05),活性降低(P<0.05),与对照组比较差异有显著性。结论3-NPA预处理诱导脑缺血耐受与降低Caspase-3活性,进而抑制神经细胞凋亡有关。     

P2Y1受体介导Aβ25-35所致大鼠星形胶质细胞活化

目的: 观察嘌呤受体P2Y₁在Aβ_25-35所致的大鼠星形胶质细胞活化中所起的作用。方法: 体外分离培养大鼠星形胶质细胞,按空白对照、Aβ_25-35和P2Y₁受体阻断剂MRS2179+Aβ_25-35和MRS2179分组干预后,通过免疫细胞化学、免疫荧光法和Western blotting方法观察GFAP和P2Y₁表达的变化。结果: 各组细胞数量无明显变化。与对照组相比,Aβ_25-35组GFAP荧光强度明显增加;MRS2179+Aβ_25-35和MRS2179组均降低,两组间无明显差异。Western blotting显示GFAP在各组间表达与免疫荧光法有相似趋势;与对照组相比,P2Y₁表达在Aβ_25-35组明显增多(P＜0.05)和MRS2179+Aβ_25-35和MRS2179组无明显变化(P＞0.05)。结论: Aβ_25-35通过P2Y₁受体活化激活星形胶质细胞。     

人脐血MSCs向神经元样细胞分化过程中neurogenin1的表达变化

目的: 探讨人脐血间质干细胞(MSCs)体外向神经元样细胞分化过程中neurogenin 1的表达变化。方法: 常规从人脐血中分离MSCs,采用生长因子EGF和bFGF联合诱导人脐血MSCs向神经元样细胞分化,免疫细胞化学法检测诱导前、后神经元表面标志蛋白NF-M、NSE、胶质细胞标志蛋白GFAP和neurogenin 1的表达情况;Western blotting和RT-PCR法检测诱导前、后人脐血MSCs中neurogenin 1蛋白和mRNA的表达变化。结果: 诱导前,人脐血MSCs不表达NF-M、NSE和GFAP;诱导7 d,人脐血MSCs可以分化为神经元样细胞, 同时表达NF-M、NSE和GFAP。诱导前,人脐血MSCs不表达neurogenin 1,诱导后neurogenin 1蛋白和mRNA表达显著增加。结论: Neurogenin 1可能参与了体外诱导人脐血MSCs向神经细胞分化的过程。     

血管性痴呆大鼠海马区pro-BDNF、截短型BDNF、mBDNF的变化及与认知的关系

目的  探讨血管性痴呆（VD）大鼠海马中脑源性神经营养因子前体蛋白（pro-BDNF）、成熟脑源性神经营养因子（mBDNF）、截短型脑源性神经营养因子（BDNF）变化及与认知功能的关系。方法  健康雄性SD大鼠120只，6月龄，体重350 g左右，随机分为模型组和假手术组，模型组结扎双侧颈总动脉，假手术组除不结扎血管外余同模型组，模型组和假手术组大鼠随机分为2、4、8和12周4个时间，水迷宫实验筛选造模成功大鼠，免疫组织化学法和Western blot检测假手术组及造模成功的大鼠不同时间点海马中pro-BDNF、mBDNF、截短型BDNF变化。结果  术后各时间点模型组大鼠的潜伏期均较假手术组延长（P <0.05）。免疫组织化学法检测显示模型组大鼠海马神经元形态改变、数量减少、BDNF表达下降。术后模型组pro-BDNF、mBDNF、截短型BDNF较假手术组降低（P <0.05），pro-BDNF水平下降趋势较缓慢，截短型BDNF水平下降趋势在缺血早期变化显著，后期变化缓慢；mBDNF水平下降趋势在缺血早期变化不明显，后期变化显著。结论  慢性缺血VD大鼠海马区pro-BDNF、mBDNF、截短型BDNF均有改变，3者比例的改变可能与VD大鼠认知功能障碍有关。

     

麝香提取物对大鼠皮层神经细胞炎性损伤的保护作用

目的研究麝香提取物(musk extract,ME)对脂多糖(LPS)诱导大鼠大脑皮层神经细胞炎性损伤的保护作用及其可能机制。方法分别培养新生大鼠大脑皮层神经细胞和星形胶质细胞(AC),使用终浓度为10mg/LLPS及ME18mg/L、36mg/L、72mg/L、144mg/L的分别作用于纯化的星形胶质细胞24h,收集条件培养液(ACM)。在神经细胞培养体系中分别加入ACM,采用MTT法及AO/EB染色法测定神经细胞存活率和凋亡率;ELISA法检测ACM中所含炎症因子的变化。结果 ME18mg/L、36mg/L、72mg/L及144mg/L组的神经细胞存活率(%)分别为52.55±3.52、55.77±2.36、64.89±3.45及73.67±1.80,较模型组(43.62±4.51)均显著提高(P0.05);细胞凋亡率(%)分别为68.11±2.16、44.27±3.68、32.56±2.14及21.89±2.46,与模型组(71.33±3.25)比较,均显著下降(P0.05,P0.01);ME组ACM中IL-6呈指数降低,且均呈剂量依赖性。结论麝香提取物对脂多糖所致神经细胞炎性损伤具有显著的保护作用,以144mg/L浓度最佳,其可能通过减少星形胶质细胞分泌IL-6起作用。     

盐酸法舒地尔与低分子肝素联合治疗急性后循环脑梗死的临床研究

目的观察盐酸法舒地尔与低分子肝素钠联合治疗急性后循环脑梗死(POCI)的治疗效果。方法随机将95例急性后循环脑梗死病人分为两组:治疗组50例,对照组45例。在常规治疗基础上,治疗组用盐酸法舒地尔注射液60mg加入250ml生理盐水静脉点滴每日1次、低分子肝素钠6000u皮下注射每日2次,疗程均14d;对照组用依达拉奉注射液30mg加入100ml生理盐水静脉点滴每日2次、低分子肝素钠6000u皮下注射每日2次,疗程均14d。治疗前后定期对患者进行欧洲脑卒中量表(ESS)、日常生活能力(ADL)和常规检查,以治疗第14d ESS增分率和第90d ADL(Barthe1)评分作为主要疗效判断标准。结果治疗14d后,ESS增分率分别为(42.5±10.2,28.3±7.8),治疗组与对照组相比有极显著性差异(P<0.01),ADL评分治疗组与对照组相比也有极显著性差异(P<0.01)。结论盐酸法舒地尔与低分子肝素联合治疗后循环脑梗死临床疗效显著,安全可靠,可在后循环脑梗死的急性期应用。