DDX解旋酶家族分子功能的研究进展

DDX解旋酶（DEAD-box RNAhelicases）是经典的ATP依赖性解旋酶家族，目前已知共有50多个家族成员，主要发挥 RNA加工代谢相关调控作用，尤其是经典的RNA解旋功能被学界公认为DDX解旋酶最基本的功能。近年来，DDX解旋酶家族 成员已被发现与亚细胞结构动态转换、细胞周期转换、抗病毒免疫应答、胚胎形成、机体精子发生、能量物质代谢等生理过程密切 相关，而目前更为关注的是其在肿瘤发生发展病理过程中所发挥的重要作用，且部分DDX家族分子已经成为肿瘤诊断、预后评 估以及药物治疗的潜在靶点，为未来的临床治疗决策注入强大的活力。本文主要针对DDX家族分子的结构、生物学功能、营养 物质代谢、天然免疫及肿瘤发生与治疗等方面的研究展开综述。     

MicroRNA与肝癌诊治：新的机遇和挑战

MicroRNA(miRNA)广泛参与机体各项生理和病理过程,近年来受到广泛关注且研究进展迅速。肝癌尤其是乙型肝炎相关肝癌是我国的重大疾病,miRNA在肝癌发生、发展过程中发挥着重要作用,在肝癌发生、肿瘤进展、预后判断和生物治疗等方面,miRNA均能通过调控其靶基因的表达参与其中。由于大规模平行测序等miRNA组学研究的新技术进展迅速,肝脏与肝癌miRNA组的研究进一步加深了科研工作者对肝癌相关miRNA的理解。在肝脏中富集表达的miRNA在肝癌组织中均出现表达失调,这些表达失调的重要miRNA已被证明是肝癌基因治疗的潜在靶点。此外,肝癌患者血清中存在的游离miRNA被证实是肝癌诊断和个体化治疗的潜在生物标志物。笔者简要阐述肝癌相关miRNA的表达和作用机制及其在临床肝癌诊断和干预中的潜在意义与价值,并对miRNA给肝癌诊治带来新的机遇和挑战作一展望。     

m~6A修饰参与调控初级microRNA的加工剪切

m6A修饰广泛存在于高等真核生物的RNA上,特别是存在于mRNA的CDS区、3’-UTR区及终止密码子附近区域,其广泛参与了RNA代谢的各种生物学过程,包括RNA剪接、RNA出核、RNA与蛋白相互作用和RNA降解等。MicroRNA(miRNA)成熟的第一步就是由加工复合体(RNA结合蛋白DGCR8和RNA酶DROSHA)介导的初级miRNA的剪切。该剪切过程首先需要DGCR8识别初级miRNA发夹结构中的单链RNA,从而招募DROSHA酶将双链RNA剪切成前体miRNA。虽然初级miRNA剪切加工的机制已经很明确,但DGCR8特异性识别并结合初级miRNA(而不是转录子中的其他二     

文献汇报在医学免疫学教学中的实践和探讨

医学免疫学是基础医学教育的重要组成部分,具有理论抽象、知识点更新迅速和研究方法独特等特点.在八年制医学生的免疫学教学中,如何科学合理地选择有效的教学方法以激发和培养学员的学习兴趣和科研思维目前广受关注.在教学实践中发现,学员自主文献汇报的教学方法可以让学员在掌握基本理论的基础上,培养学员独立分析问题和解决问题的能力,并逐步形成合理的科研思维.     

miR-15a和miR-16在前列腺癌中的作用

在前列腺癌中存在有部分13号染色体长臂基因组序列的缺失，而miR-15a和miR-16即表达于此段基因组中。该文作者发现，miR-15a和miR-16在前列腺癌中表达明显降低，并且miR-15a和miR-16对于前列腺癌的增殖、凋亡、细胞周期、迁移、侵袭和贴壁非依赖的生长均有作用，具体表现为miR-15a和miR-16能够抑制前列腺癌细胞的增殖、促进凋亡、阻滞细胞周期、减少迁移和侵袭、降低贴壁非依赖的生长，即miR-15a和miR-16表现为明显的抑癌基因特点。     

粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞治疗心肌梗死

急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)作为冠心病中最危重的临床类型,是造成冠心病患者死亡的主要原因。通常认为心肌细胞为永久型细胞,没有分裂增殖的能力,心肌梗死灶只能由疤痕组织填充。虽然最近研究报道心肌梗死后有很少量心肌细胞发生分裂增殖,但不能完整修复梗死的心肌组织。近年来,许多学者研究使用成纤维母细胞,骨骼肌成肌细胞,原代培养的心肌细胞等健康细胞注射在心肌缺血区进行实验性治疗,取得了一定效果。同时,定向诱导骨髓干细胞分化成为心肌细胞及血管内皮细胞,用以恢复损伤和坏死的心肌及形成新血管,亦成为研究的热点。国内外研究报道,粒细胞集落刺     

SACC-83来源的外泌体促进腺样囊性癌细胞的增殖

目的研究腺样囊性癌（ACC）肿瘤细胞来源的外泌体对自身肿瘤细胞增殖能力的影响。方法选取ACC细胞株SACC- 83,采用超滤管浓缩与试剂盒提取相结合的方法从SACC-83的培养上清中提取外泌体,通过透射电镜及蛋白免疫印迹法对所 提取的外泌体进行鉴定;将SACC-83来源的外泌体用荧光染料PKH67标记后与其分泌细胞共培养,采用激光扫描共聚焦显微 镜（LSCM）观察SACC-83对于自身来源的外泌体的摄取情况;采用MTT细胞增殖实验、细胞划痕实验及Western blot 法检测 SACC-83经自身外泌体作用后,其细胞增殖能力的变化情况以及ERK/P-ERK蛋白的表达变化。结果透射电镜及Western blot 的检测结果显示,SACC-83培养上清中所提取到的微囊泡直径为30~100 nm,且外泌体蛋白标记物CD9、CD63和TSG101的表 达为阳性;携带PKH67荧光标记的外泌体可被SACC-83摄取。MTT及细胞划痕实验结果示SACC-83来源的外泌体可促进自 身肿瘤细胞的增殖能力,Western blot结果显示P-ERK的表达上调,ImageJ软件行蛋白条带灰度值分析并统计显示实验组与对 照组具有显著统计学差异（P<0.05）。结论SACC-83来源的外泌体可被自身肿瘤细胞摄取,并可显著促进肿瘤细胞的增殖能 力,上调P-ERK的表达。该结果提示ACC可能通过外泌体途径促进肿瘤细胞的增殖能力,且ERK的活化以及MAPK/ERK信 号通路的激活可能是其促细胞增殖的潜在机制之一。     

解旋酶DDX41在人牙髓组织及牙髓细胞中的表达

目的研究解旋酶DDX41在人牙髓组织和细胞中的表达,为深入探讨其在龋病及牙髓病天然免疫应答过程中的作用奠定
基础。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫细胞化学和免疫组织化学技术对人牙髓组织和牙髓细胞中DDX41的
表达和定位进行分析。结果RT-PCR结果显示DDX41 mRNA在人牙髓细胞中有显著表达;免疫细胞化学和免疫组织化学染
色结果显示DDX41在牙髓细胞的胞浆和胞核中皆有表达,但胞核中的表达水平较低;在牙髓组织中,DDX41主要在牙髓组织
表面的成牙本质细胞的胞浆和胞核中皆有表达。结论人牙髓组织中的成牙本质细胞作为牙髓免疫的效应细胞之一,在龋病和
牙髓炎的免疫反应过程中,细胞内可能存在DDX41/STING依赖的TBK1-IRF3-IFN-β信号通路的活化。
     

CARD10 通过活化NF-κB信号进而促进肝癌细胞凋亡抵抗

目的：研究半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶招募域家族分子10（caspase recruitment domain family member 10，CARD10）在肝癌组织中的表达，及其对肝癌进展尤其是凋亡抵抗的作用和机制。方法：采集2008 年至2010 年海军军医大学东方肝胆外科医院收治的129 例肝癌患者手术切除的肝癌及其癌旁组织标本，采用实时定量PCR法检测癌旁和肝癌组织中CARD10 的表达，以Spearman 等级相关统计学分析CARD10 表达与肝癌分期的相关性。在CARD10 质粒转染过表达以及RNA干扰敲减表达后，采用流式细胞术Annexin-V/PI 标记法检测肝癌细胞株的凋亡，采用Western blotting 检测肝癌细胞株中NF-κB信号的活化。结果：CARD10 在肝癌组织中的表达较癌旁组织显著增高（P<0.01），且肝癌组织中CARD10 的表达增高与肝癌分期进展呈正相关（P<0.01）。CARD10 过表达可以抑制肝癌细胞株SMMC-7721 和BEL-7402 的凋亡，而敲减CARD10 能够促进肝癌细胞株凋亡。CARD10 过表达能够增强肝癌细胞株中促生存的NF-κB信号的活化，而CARD10 敲减能够抑制NF-κB信号活化。结论：CARD10在肝癌组织中表达显著增高并与肝癌进展呈正相关，CARD10 能够通过活化NF-κB信号进而促进肝癌细胞凋亡抵抗。