复合营养素和蛋白质协同拮抗氟中毒对雌性大鼠卵巢损伤的动态观察

目的动态观察多种营养素和蛋白质协同拮抗氟中毒对大鼠卵巢损伤的效果。方法将120只断乳2周清洁级SD雌性大鼠按体重随机分为4组,分别为对照组、氟中毒组、营养素干预组、营养素+强化蛋白干预组,每组30只。对照组大鼠食用非病区玉米加工饲料(含氟5.2 mg/kg,蛋白含量为18%);氟中毒组大鼠食用病区高氟泥煤烘烤玉米加工饲料(含氟96 mg/kg,蛋白含量为18%);营养素干预组大鼠饲料是在氟中毒组饲料基础上加入多维营养素添加片(含氟96 mg/kg,添加片剂量为2.08 g/kg,蛋白含量为18%);营养素+强化蛋白干预组大鼠饲料在营养素干预组饲料的基础上加入大豆蛋白粉(含氟96 mg/kg,添加片剂量为2.08 g/kg,蛋白含量为30%)。采用自由摄食的方法进行染毒。分别于第60、120、180天,检测处于动情期大鼠血清中睾酮(T)、雌二醇、孕酮(P)、抑制素(Inh)的含量。结果氟中毒组大鼠血清P、雌二醇、Inh水平降低,而T水平升高。两干预组血清P、雌二醇、Inh、T的紊乱程度明显减轻,且随着时间的延长逐渐恢复正常水平。第180天时两干预组血清P、雌二醇水平已经恢复到正常水平;而血清T、Inh水平介于染氟和对照组之间,且更接近对照组。结论多种营养素对氟中毒所致大鼠血清卵巢相关激素的分泌紊乱具有拮抗作用,加入蛋白质后对损伤的拮抗作用有所增强。     

燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响。方法将清洁级SD雌性大鼠90只随机分为对照组、中氟组、高氟组,每组30只,对照组大鼠食用非病区玉米饲料(含氟量5.2 mg/kg),中氟组和高氟组分别在饲料中添加45%和75%的某病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料(含氟量分别为47.8、96.0 mg/kg)。每组分别于60、120、180 d动态观察雌鼠氟斑牙变化情况,测定尿氟、骨氟水平,采用透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构变化,末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型。透射电镜下发现,对照组卵巢颗粒细胞形态结构正常;染氟组可见颗粒细胞核膜皱缩,内质网、核糖体逐渐减少,线粒体肿胀,胞浆内出现较多的脂滴,随染氟剂量的增加逐渐出现颗粒细胞凋亡特征。除中氟组染氟60 d时卵巢颗粒细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义外(P0.05),各染氟组雌鼠颗粒细胞凋亡率均高于同期对照组(P0.05),且随染氟时间的延长和剂量的增加,颗粒细胞凋亡率逐渐增加。结论氟中毒可能通过影响大鼠卵巢颗粒细胞结构,诱导和促进卵巢颗粒细胞凋亡,且颗粒细胞超微结构的损伤程度和凋亡率与染氟时间及剂量有关。     

燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢TGF-α的影响

目的:动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢转化生长因子(TGF-α)的影响.方法:SD雌鼠90只,随机均分为对照组、中氟组和高氟组,于不同时间段(60d、120 d、180 d)观察氟斑牙,用离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量;电镜下观察卵巢凋亡情况,用TUNEL技术检测卵巢凋亡细胞数,用免疫组化法检测卵巢TGF-α的表达.结果:随着染氟剂量增加和染氟时间的延长,雌鼠氟斑牙症状逐渐加重,尿氟、骨氟含量增加,染氟组卵巢凋亡细胞数明显增加;与对照组相比,相同染氟时间各染氟组卵巢颗粒细胞TGF-α蛋白表达量均降低(P＜0.05),高氟组低于中氟组,差异有统计学意义(P＜0.05);相同染氟剂量,随着染氟时间延长,各染氟组TGF-α含量逐渐减少,中氟组60d高于120 d和180d,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:氟中毒可能导致卵巢组织细胞超微结构损伤,严重破坏颗粒细胞中线粒体,影响卵巢细胞的能量供应,促使卵巢颗粒细胞凋亡;氟中毒可导致TGF-α分泌减少使其参与阻碍卵泡凋亡和闭锁的作用减弱,促使卵巢颗粒细胞的凋亡增加.     

低蛋白条件下燃煤型氟中毒对雌鼠生殖功能的影响

目的探讨低蛋白条件下燃煤型氟中毒对雌鼠生殖功能的影响。方法选取120只断乳2周SD雌鼠,分对照组、低蛋白组、染氟组、低蛋白染氟组,每组30只;光镜下观察卵巢组织形态、各级卵泡数量变化;于不同时间段(60 d、120 d、180 d)动情期处死雌鼠,采集雌鼠血液分离血清,检测血清中雌二醇(E2)含量。结果成功建立动物模型;随着时间增加,低蛋白染氟组卵泡颗粒细胞轮廓较对照组略显模糊,且水肿现象较为严重,此外黄体和卵泡退化现象明显,成熟卵泡数量较低蛋白组和对照组高,60 d、120 d、180 d均有统计学差异(P0.05),更高于染氟组,120 d、180 d有统计学差异(P0.05),氟和蛋白对60 d、180 d闭锁卵泡的影响存在交互效应(F值分别为4.193,5.172,P均0.05);低蛋白染氟组E2含量逐渐降低,60 d与180 d比较有统计学意义(P0.05);氟和蛋白对60 d、120 d、180 d雌鼠E2的影响不存在交互效应(F值分别为0.119、2.552、1.836,P均0.05)。结论低蛋白可加重燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能的毒性作用。     

燃煤型氟中毒对雌鼠血细胞的影响

目的：探讨不同染氟剂量在不同时间对雌鼠血细胞的影响。方法选用SD雌性大鼠按体质量分为对照组（饲以非病区玉米饲料,含氟量为5．2mg／kg）、中氟组、高氟组（饲以掺入燃煤型氟中毒病区玉米饲料,含氟量分别为47．8、96mg／kg）,中氟组、高氟组合称染氟组。于染氟60、120、180d进行血常规检测。结果染氟60、120d高氟组白细胞（WBC）较中氟组明显减少（P＜0．05）。第60、120天和180天时染氟组红细胞（RBC）较对照组显著减少（P＜0．05）,染氟组第120天时RBC较第60、180天减少（P＜0．05）。染氟60、120d时染氟组血红蛋白（Hb）、红细胞压积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）较对照组减低（P＜0．05）,第180天时染氟组MCV反而有增高趋势（P＜0．05）;染氟组内Hb、HCT染氟120d均比60、180d低（P＜0．05）;中氟组MCV随时间推移逐渐降低,180d时显著低于60d（P＜0．05）,高氟组染氟120dMCV均比60、180d低（P＜0．05）。中氟组内染氟120d平均血红蛋白含量（MCH）比60、180d高（P＜0．05）,高氟组内染氟180d时MCH比60d高（P＜0．05）。结论氟中毒对SD雌鼠的血细胞有不同程度的影响,尤其对红细胞系统的影响最大。染氟早期、中期RBC表现为小RBC高色素性。染氟晚期表现为大细胞高色素性。     

燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响。方法 SD雌鼠自由食用织金病区原煤烘烤的玉米饲料复制燃煤型氟中毒动物模型;动态观察雌鼠染氟期间牙齿的变化情况;测定大鼠尿氟、骨氟含量;分离卵巢计算卵巢系数,光镜下观察卵巢组织形态、各级卵泡及黄体的数量变化;于不同时间段(60、120、180 d)动情期处死雌鼠,分离血清,放射免疫法检测血清中雌二醇含量。结果与对照组比较,随染氟时间增加,染氟组雌鼠尿氟与骨氟含量明显升高,呈时间效应关系;各染氟组雌鼠卵巢卵泡颗粒细胞呈现渐进性水肿变化,闭锁卵泡和黄体退化逐渐增多,成熟卵泡偶见;与对照组比较,中氟组雌鼠染氟180 d闭锁卵泡数量[(24.700±4.138)个]与高氟组雌鼠染氟120、180 d时闭锁卵泡数量[分别为(24.200±3.706)、(25.000±4.714)个]明显升高(P<0.05);与对照组比较,染氟60 d时,中、高氟组雌鼠血清中雌二醇含量[分别为(43.875±7.180)、(45.625±5.780)pmol/L]升高(P<0.05)。结论燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢具有毒性作用,其机制可能与加速各级卵泡退化、闭锁、导致卵泡颗粒细胞水肿、卵泡细胞受损,进而影响雌二醇合成和分泌有关。     

多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠氟斑牙及骨氟和尿氟的影响

目的探讨钙、镁、铜、锌、维生素D和大豆联合干预对燃煤型氟中毒雌鼠氟斑牙、骨氟和尿氟的影响。方法将120只SD雌鼠分为对照组、染氟组、高氟+钙尔奇牌添佳片组(即多种元素干预组)、高氟+钙尔奇牌添佳片+大豆组(即多种元素+大豆干预组),每组30只,动物自由食用不同配方的织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料,构建燃煤型氟中毒动物模型。每组分别于染氟60、120、180 d选择10只大鼠,动态观察雌鼠染氟期间氟斑牙情况,分别采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。结果随着染氟时间的延长,氟斑牙症状加重,干预组大鼠氟斑牙程度比染氟组轻。染氟组雌鼠尿氟、骨氟含量均高于同一时间点(60、120、180 d)的对照组,差异有统计学意义(P0.05)。同一时间点时,染氟组、多种元素干预组、多种元素+大豆干预组雌鼠的尿氟含量依次增加,差异均有统计学意义(P0.05);染氟组雌鼠骨氟含量高于对照组,但多种元素干预组、多种元素+大豆干预组骨氟含量均低于染氟组,差异有统计学意义(P0.05)。随着染毒时间的延长,染氟组、多种元素干预组、多种元素+大豆干预组的尿氟含量均逐渐增加,差异有统计学意义(P0.05);染氟组骨氟含量逐渐增加,多种元素干预组、多种元素+大豆干预组骨氟含量逐渐降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论高剂量氟对雌鼠有明显毒性作用,多种营养素干预可拮抗其毒性作用,若在此基础上添加大豆联合干预则拮抗作用更明显。     

燃煤型氟中毒雌鼠卵巢 IL-1β细胞因子的表达

目的：动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢IL‐1β细胞因子的影响。方法采用自由食用织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米复制燃煤型氟中毒动物模型（对照组、中氟组、高氟组）,动态观察雌鼠染氟期间牙齿变化情况。采用离子选择电极法、高温灰化－氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。于不同时段（60 d、120 d、180 d ）动情期处死雌鼠,分离卵巢。免疫组化法检测卵巢颗粒细胞内分泌细胞因子IL‐1β的表达。结果（1）成功复制实验动物模型。（2）随着染氟剂量增加及染氟时间的延长,雌鼠氟斑牙症状逐渐加重。（3）雌鼠尿氟、骨氟含量随着染氟剂量的增加及染氟时间的延长而增加。（4）在染氟时间相同的组别（60 d、120 d、180 d ）,各染氟组（中氟组、高氟组）与对照组相比卵巢颗粒细胞IL‐1β蛋白表达率均降低（P＜0．05）,高氟组低于中氟组（P＜0．05）;染氟剂量相同,随着染氟时间延长,各染氟组（中氟组、高氟组）IL‐1β含量逐渐减少,与对照组相比有统计学意义（ P＜0．05）。（5）与对照组相比,染氟60 d时,中氟组、高氟组雌鼠E2含量随染氟剂量的增加而逐渐增高（ P＜0．05）。染氟120 d、180 d中氟组、高氟组雌鼠E2含量随染氟剂量的增加而逐渐降低,但差异均无统计学意义（ P＞0．05）;随着染氟时间点的变化（60 d、120 d、180 d ）,对照组雌鼠E2含量呈从低到高再降低的波动性变化,120 d雌鼠高于60 d和180 d ,且120 d与60 d比较差异有统计学意义（ P＜0．05）。中氟组、高氟组E2含量逐渐减低,但仅有高氟组60 d、120 d分别与180 d比较有统计学意义（ P＜0．05）。结论过量的氟可抑制IL‐1β在卵巢颗粒细胞的表达,致使IL‐1β影响颗粒细胞、P分泌和参与生殖调节的作用也减弱,E2含量减少。这可能是氟中毒致使血清E2降低的机制之一。