低蛋白条件对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞的影响

为了解低蛋白条件对燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞的影响,选取120只断乳2周的60~80 g清洁级SD雌性大鼠,随机分为对照组、低蛋白组、染氟组、低蛋白染氟组,每组30只。对照组和低蛋白组进食75%非病区玉米饲料(含氟量为5.2 mg/kg),染氟组和低蛋白染氟组进食75%燃煤型氟中毒病区玉米饲料(含氟量为96 mg/kg);对照组及染氟组饲料中大豆蛋白质含量为18 g/kg,低蛋白组和低蛋白染氟组为9 g/kg。每组分别于60、120、180 d动态观察雌鼠氟斑牙变化情况,测定尿氟、骨氟水平,采用透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构变化,以末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果显示,成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型,低蛋白染氟组较染氟组电镜下病理损伤更明显。与对照组比较,低蛋白组120、180 d卵巢颗粒细胞凋亡率升高,染氟组和低蛋白染氟组60、120、180 d卵巢颗粒细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P0.05);低蛋白染氟组60、120、180 d卵巢颗粒细胞凋亡率高于低蛋白组,60、120 d卵巢颗粒细胞凋亡率高于染氟组,差异均有统计学意义(P0.05)。染氟组180 d时卵巢颗粒细胞凋亡率高于60 d,差异有统计学意义(P0.05)。析因分析结果显示,饲养60、120、180 d时氟对雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率有影响(F值分别为1 180.051,1 187.294,999.577,P0.05);饲养60、120 d时低蛋白对雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率有影响(F值分别为17.613,12.706,P0.05),而饲养180 d时无影响(F=4.017,P0.05),氟与低蛋白对雌鼠卵巢颗粒细胞凋亡率的影响无交互效应(F值分别为3.479,0.088,0.941,P0.05)。提示低蛋白条件下燃煤型氟中毒雌鼠卵巢颗粒细胞病理损伤有所加重,但低蛋白与氟染毒对凋亡率的影响无明显相关性。     

燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢生殖功能影响。方法 SD雌鼠自由食用织金病区原煤烘烤的玉米饲料复制燃煤型氟中毒动物模型;动态观察雌鼠染氟期间牙齿的变化情况;测定大鼠尿氟、骨氟含量;分离卵巢计算卵巢系数,光镜下观察卵巢组织形态、各级卵泡及黄体的数量变化;于不同时间段(60、120、180 d)动情期处死雌鼠,分离血清,放射免疫法检测血清中雌二醇含量。结果与对照组比较,随染氟时间增加,染氟组雌鼠尿氟与骨氟含量明显升高,呈时间效应关系;各染氟组雌鼠卵巢卵泡颗粒细胞呈现渐进性水肿变化,闭锁卵泡和黄体退化逐渐增多,成熟卵泡偶见;与对照组比较,中氟组雌鼠染氟180 d闭锁卵泡数量[(24.700±4.138)个]与高氟组雌鼠染氟120、180 d时闭锁卵泡数量[分别为(24.200±3.706)、(25.000±4.714)个]明显升高(P<0.05);与对照组比较,染氟60 d时,中、高氟组雌鼠血清中雌二醇含量[分别为(43.875±7.180)、(45.625±5.780)pmol/L]升高(P<0.05)。结论燃煤型氟中毒对雌鼠卵巢具有毒性作用,其机制可能与加速各级卵泡退化、闭锁、导致卵泡颗粒细胞水肿、卵泡细胞受损,进而影响雌二醇合成和分泌有关。     

低蛋白摄入对燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢胰岛素样生长因子-Ⅰ表达的影响

目的探讨低蛋白摄入对燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢颗粒细胞胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达的影响。方法将清洁级SD雌性大鼠120只随机分为4组,即对照组、低蛋白摄入组、氟中毒组、氟中毒伴低蛋白摄入组,每组30只。对照组和低蛋白摄入组食用75%非病区玉米饲料(含氟量为5.2 mg/kg),氟中毒组和氟中毒伴低蛋白摄入组食用75%燃煤型氟中毒病区玉米饲料(含氟量96 mg/kg),对照组及氟中毒组饲料中以18 g/kg剂量添加大豆蛋白质,低蛋白摄入组和氟中毒伴低蛋白摄入组按9 g/kg剂量添加大豆蛋白质。动态观察雌性大鼠氟斑牙变化情况,分别于60、120、180 d动情期处死雌性大鼠,以放射免疫法检测雌性大鼠血清雌二醇含量,以免疫组化法检测卵巢IGF-Ⅰ表达。结果成功建立了燃煤型氟中毒伴低蛋白摄入雌性大鼠模型。随着染氟时间的延长,低蛋白氟中毒组和氟中毒组雌性大鼠血清雌二醇水平逐渐降低。染毒60 d时各组雌性大鼠卵巢IGF-Ⅰ表达无明显差异(P0.05),染毒120、180 d时氟中毒组、氟中毒伴低蛋白摄入组雌性大鼠卵巢IGF-Ⅰ表达均低于对照组,氟中毒伴低蛋白摄入组IGF-Ⅰ表达低于低蛋白摄入组,差异均有统计学意义(P0.05);染毒120、180 d时雌性大鼠卵巢IGF-Ⅰ含量均低于60 d时,差异有统计学意义(P0.05)。析因分析结果显示,染毒120、180 d时,单独氟作用对雌性大鼠卵巢IGF-Ⅰ的表达有影响(F值分别为71.85,158.26,P0.05)。结论燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢颗粒细胞IGF-Ⅰ表达降低,低蛋白摄入对雌性大鼠卵巢IGF-Ⅰ表达无明显影响,两因素对卵巢IGF-Ⅰ的表达无交互作用。     

燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响。方法将清洁级SD雌性大鼠90只随机分为对照组、中氟组、高氟组,每组30只,对照组大鼠食用非病区玉米饲料(含氟量5.2 mg/kg),中氟组和高氟组分别在饲料中添加45%和75%的某病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料(含氟量分别为47.8、96.0 mg/kg)。每组分别于60、120、180 d动态观察雌鼠氟斑牙变化情况,测定尿氟、骨氟水平,采用透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构变化,末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果成功建立燃煤型氟中毒雌鼠模型。透射电镜下发现,对照组卵巢颗粒细胞形态结构正常;染氟组可见颗粒细胞核膜皱缩,内质网、核糖体逐渐减少,线粒体肿胀,胞浆内出现较多的脂滴,随染氟剂量的增加逐渐出现颗粒细胞凋亡特征。除中氟组染氟60 d时卵巢颗粒细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义外(P0.05),各染氟组雌鼠颗粒细胞凋亡率均高于同期对照组(P0.05),且随染氟时间的延长和剂量的增加,颗粒细胞凋亡率逐渐增加。结论氟中毒可能通过影响大鼠卵巢颗粒细胞结构,诱导和促进卵巢颗粒细胞凋亡,且颗粒细胞超微结构的损伤程度和凋亡率与染氟时间及剂量有关。     

多种营养素干预燃煤型氟中毒对雌鼠氟斑牙及骨氟和尿氟的影响

目的探讨钙、镁、铜、锌、维生素D和大豆联合干预对燃煤型氟中毒雌鼠氟斑牙、骨氟和尿氟的影响。方法将120只SD雌鼠分为对照组、染氟组、高氟+钙尔奇牌添佳片组(即多种元素干预组)、高氟+钙尔奇牌添佳片+大豆组(即多种元素+大豆干预组),每组30只,动物自由食用不同配方的织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料,构建燃煤型氟中毒动物模型。每组分别于染氟60、120、180 d选择10只大鼠,动态观察雌鼠染氟期间氟斑牙情况,分别采用离子选择电极法、高温灰化-氟离子选择电极法测定雌鼠尿氟、骨氟含量。结果随着染氟时间的延长,氟斑牙症状加重,干预组大鼠氟斑牙程度比染氟组轻。染氟组雌鼠尿氟、骨氟含量均高于同一时间点(60、120、180 d)的对照组,差异有统计学意义(P0.05)。同一时间点时,染氟组、多种元素干预组、多种元素+大豆干预组雌鼠的尿氟含量依次增加,差异均有统计学意义(P0.05);染氟组雌鼠骨氟含量高于对照组,但多种元素干预组、多种元素+大豆干预组骨氟含量均低于染氟组,差异有统计学意义(P0.05)。随着染毒时间的延长,染氟组、多种元素干预组、多种元素+大豆干预组的尿氟含量均逐渐增加,差异有统计学意义(P0.05);染氟组骨氟含量逐渐增加,多种元素干预组、多种元素+大豆干预组骨氟含量逐渐降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论高剂量氟对雌鼠有明显毒性作用,多种营养素干预可拮抗其毒性作用,若在此基础上添加大豆联合干预则拮抗作用更明显。     

低蛋白摄入对燃煤型氟中毒雌性大鼠血清性激素及抑制素影响的动态观察

目的动态观察低蛋白摄入对燃煤型氟中毒雌性大鼠血清性激素及抑制素浓度的影响。方法将120只断乳2周清洁级SD雌性大鼠随机分为4组,分别为对照(5.2 mg/kg氟+18 g/kg大豆蛋白质)组、低蛋白(5.2 mg/kg氟+9 mg/kg大豆蛋白质)组、氟中毒(96 mg/kg氟+18 g/kg大豆蛋白质)组、低蛋白氟中毒(96 mg/kg氟+9 mg/kg大豆蛋白质)组,每组30只。采用自由食用方式进行暴露,连续暴露180 d。分别于暴露60、120、180 d检测处于动情期雌性大鼠血清雌二醇(E_2)、孕酮(P)、睾丸酮(T)及抑制素(INH)浓度。结果单独低蛋白摄入60、120、180 d对雌性大鼠血清P浓度均无影响(P0.05);单独氟染毒60 d对雌性大鼠血清P浓度无影响(P0.05),染毒120、180 d可降低雌性大鼠血清P浓度(P0.05);低蛋白和氟联合处理60、120、180 d对雌性大鼠P浓度的影响无交互作用(P0.05)。单纯低蛋白摄入120 d可降低雌性大鼠血清E_2浓度(P0.05),摄入60、180 d对雌性大鼠血清E_2浓度无影响(P0.05);单纯氟染毒60 d可升高雌性大鼠血清E_2浓度(P0.05),染毒120、180 d对雌性大鼠血清E_2浓度无影响(P0.05);低蛋白和氟联合处理60、120、180 d对雌性大鼠血清E_2浓度的影响无交互作用(P0.05)。单纯低蛋白摄入60、120、180 d对雌性大鼠血清T浓度无影响(P均0.05);单纯氟染毒60、120、180 d可升高雌性大鼠血清T浓度(P0.05);低蛋白和氟联合处理60 d对雌性大鼠T浓度的影响无交互作用(P0.05),处理120、180 d对雌性大鼠T浓度的升高有交互作用,表现为协同作用(P0.05)。单纯低蛋白摄入60、120、180 d可降低雌性大鼠血清INH浓度(P0.05),单独氟染毒60、120、180 d可升高雌性大鼠血清INH浓度(P0.05),低蛋白和氟联合处理60 d对雌性大鼠血清INH浓度无交互作用(P0.05),处理120、180 d对雌性大鼠血清INH浓度的降低有交互作用,表现为协同作用(P0.05)。病理学观察显示低蛋白和氟联合处理组卵巢组织损伤较严重。结论低蛋白和氟联合暴露可能通过降低血清中P、E_2、INH浓度和升高血清T浓度,从而促进雌性大鼠卵巢组织损伤。     

多种营养素干预对燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢颗粒细胞的影响

为动态观察多种营养素对燃煤型氟中毒雌性大鼠卵巢颗粒细胞的干预作用,将清洁级雌性SD大鼠120只随机分为对照组、染氟组、多种营养素干预组、多种营养素加蛋白质干预组,每组30只,对照组用非病区玉米饲料喂养(含氟量为5.2 mg/kg),各实验组均用织金病区原煤加拌泥煤烘烤的玉米饲料喂养(含氟量为96 mg/kg),多种营养素干预组添加多维营养素,多种营养素加蛋白质干预组同时添加大豆蛋白。每组分别于实验60、120、180 d处死10只大鼠,检测尿氟、骨氟水平,采用电子显微镜观察卵巢颗粒细胞超微结构,以末端转移酶标记技术测定卵巢颗粒细胞凋亡率。结果显示,两个干预组尿氟含量高于同期对照组及染氟组,染氟组骨氟含量高于同期对照组及干预组,差异均有统计学意义(P0.05);电镜观察发现,染氟组卵巢颗粒细胞超微结构损伤严重,且随着时间的延长逐渐呈细胞凋亡特征,干预组卵巢颗粒细胞超微结构随着时间的延长而逐渐趋于正常。染氟组卵巢颗粒细胞凋亡率高于同期对照组和干预组,且多种营养素干预组高于多种营养素加蛋白干预组,差异均有统计学意义(P0.05)。提示对大鼠添加适量维生素可减轻氟中毒引起的卵巢颗粒细胞超微结构损伤,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,且与蛋白质联合干预效果更佳。     

燃煤型氟中毒对雌鼠动物模型的影响

目的动态观察燃煤型氟中毒对雌鼠动物模型影响。方法以45只SD雌鼠为研究对象,定期称体重,观察雌鼠体重的变化,氟斑牙的变化,测定雌鼠尿氟、骨氟含量。结果染氟30天左右,高氟组雌鼠开始出现轻度氟斑牙。随着染氟时间的延长,各模型组均呈现出程度不同的氟斑牙,且氟斑牙损伤程度呈现逐渐加重。相同时间点(60、120、180天),各模型组雌鼠尿氟[(中氟组:2.96±0.68、6.55±1.68、14.58±1.73 mg/L)、(高氟组:9.64±0.76、15.04±1.96、21.11±3.26 mg/L)]和骨氟[(中氟组:75.90±18.52、110.08±32.35、148.39±15.01 mg/kg)、(高氟组:112.65±13.50、149.87±14.06、234.97±24.02 mg/kg)]含量与对照组[(尿氟:0.66±0.10、0.72±0.12、1.21±0.28 mg/L)、(骨氟:13.54±3.80、21.00±3.55、27.06±9.75 mg/kg)]比较,逐渐增高,差异有统计学意义(P0.05)。随染氟剂量的增高,尿氟、骨氟含量均逐渐增加,中氟组与高氟组比较,差异有统计学意义(P0.05)。各模型组组内比较,随染氟时间的延长,骨氟和尿氟含量均逐渐增加,中氟组和高氟组的尿氟和骨氟间差异均有统计学意义(均P0.05)。结论燃煤型氟中毒对雌鼠动物模型毒性可表现在氟斑牙发生率,尿氟和骨氟含量显著增高。     

氧化应激-炎性因子对氟中毒卵巢早衰的影响

目的探讨氧化应激-炎性因子在燃煤型氟中毒致雌鼠卵巢早衰机制。方法模拟贵州燃煤污染型疫区,煤烘烤玉米为雌鼠饮食氟饲料。体重均等,24只清洁级SD雌性大鼠构建动物模型,随机分为对照组、低氟组(25 mg/Kg)、中氟组(50 mg/Kg)、高氟组(100 mg/Kg)。染氟90 d处死雌鼠,分离双侧卵巢。检测致卵巢早衰氧化应激和炎性因子,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、活性氧簇(ROS)活性和白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)含量;透射电镜观察卵巢早衰超微结构变化。结果各模型组与对照组比较,GSH-Px、T-AOC、ROS和IL-6、IL-8均有统计学意义(P0.05)。各模型组间比较,随染氟剂量的增加,卵巢GSH-Px、T-AOC逐渐降低,ROS和IL-6、IL-8逐渐增高,差异均有统计学意义(P0.05)。透射电镜下,低氟组卵巢颗粒细胞超微结构电镜结果未见明显损伤。中氟组:颗粒细胞核膜轻微皱缩,少部分细胞核染色质聚集、边集,核仁消失,线粒体轻微肿胀。间质细胞核膜轻微皱缩,核染色质边集,呈现早衰现象。高氟组:颗粒细胞的核固缩,大量染色质成块状,边集,核仁消失,大量的线粒体肿胀,脂滴增多,呈现早衰现象,与染氟剂量呈正相关。结论燃煤型氟中毒卵巢氧化应激水平和炎性机制发生紊乱,抗氧化GSH-Px、T-AOC明显降低,促氧化ROS和促炎性因子IL-6、IL-8明显增高,卵巢超微结构的明显损伤,呈现早衰现象,与染氟剂量呈正相关。     

燃煤型氟中毒大鼠血清中Ⅰ型胶原交联N末端肽变化

目的观察血清Ⅰ型胶原交联N末端肽(NTX)在燃煤型氟中毒大鼠血清中的变化,探讨骨吸收在氟骨症发生中的地位。方法将160只断乳4周的SD大鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,食用病区煤烘玉米,复制燃煤型氟中毒动物模型。分别于染毒后30 d、90 d、180 d分批处死动物,ELISA法检测血清NTX水平。结果随着染毒时间增加,各实验组尿氟、骨氟、氟斑牙发生率、股骨病理积分逐渐增加(P小于0.05)。实验不同阶段各实验组与对照组比较,差异具有统计学意义(P小于0.05),并有随着染氟剂量增加而增加的趋势(P小于0.05)。实验30 d和90 d时,各组NTX水平差异无统计学意义。实验180 d时,低氟组及中氟组NTX高于对照组及高氟组(P小于0.05)。结论在摄氟早期,氟未增强骨吸收,随着时间及染氟剂量增加,可促进骨吸收。     

燃煤型氟中毒对大鼠骺板软骨组织形态学的影响

目的 模拟病区人群复制燃煤型氟中毒大鼠模型,动态观察大鼠不同时期骺板软骨组织形态的改变。方法 150只SD大鼠按体重随机分为对照组、中氟组、高氟组、高氟伴低蛋白低钙组、高氟伴高铝组,每组30只（雌雄各半）,分别于第60 d、第120 d、第180 d处死,取大鼠左膝关节,观察大鼠骺板软骨组织病理学改变。结果 各染氟组与对照组相比,骺板边缘不齐,软骨细胞钙化延迟,增殖层和肥大层细胞层数增多;高氟伴低蛋白低钙组细胞柱排列紊乱,随染氟时间延长,出现大量坏死区;高氟伴高铝组增殖层软骨偶尔可见结节样增生;对于同一实验组不同时期比较,随着大鼠饲养时间延长,骺板软骨组织的增殖层细胞层数均逐渐降低（P＜0.05）;不同时期3批大鼠各染氟组骺板增殖层、肥大层的细胞层数均多于对照组,且随着染氟剂量增高细胞层数逐渐增加（P＜0.05）;高氟伴低蛋白低钙组、高氟伴高铝组骺板增殖层、肥大层细胞层数较高氟组均降低。结论 燃煤型氟中毒大鼠出现了骺板软骨组织的损伤;肥大层、增殖层细胞层数增多;高氟伴低蛋白低钙组大鼠骺板组织出现大量坏死区;高氟伴高铝组大鼠骺板组织增厚主要表现为结节性增生。     

燃煤型氟中毒大鼠血清骨碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原羧基端前肽的变化

目的 观察骨碱性磷酸酶(BALP)及Ⅰ型胶原羧基端前肽(C ⅠCP)在燃煤型氟中毒大鼠中的表达变化,探讨骨形成在氟中毒骨病变中的地位.方法 将断乳4周的SD大鼠160只随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组(饲料氟:6.30、9.56、15.89、23.00 mg/kg),食用病区煤烘玉米,复制燃煤型氟中毒动物模型.分别于染氟后30、90、180d以ELISA法检测血清BALP和CⅠCP水平.结果 染氟30和90 d时各组动物血清BALP水平差异无统计学意义,180 d时中氟组、高氟组BALP均高于对照组和低氟组(P＜0.01).染氟30 d时高氟组血清CⅠCP水平低于对照组(P＜0.05);90 d时中氟组和高氟组血清CⅠCP水平均高于对照组(P＜0.05),且有随着剂量增加而增加的趋势;180 d时各组动物血清C ⅠCP水平高于对照组(P＜0.01),且有随着剂量增加而增加的趋势.结论 氟可以使大鼠骨形成加速,且氟对CⅠCP表达的影响较BALP显著.     

燃煤型氟中毒对仔鼠学习记忆及海马区胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的观察母鼠青春期及孕哺期燃煤型氟中毒对仔鼠学习记忆及海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法 48只断乳两周的健康清洁级SD大鼠(雌鼠32只、雄鼠16只),按体重将雌鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,每组8只,其中低、中、高氟组饲料含氟量分别为24.4、47.8、106.0 mg/kg;染氟组以燃煤型氟中毒重病区原煤烘干的玉米为主要饲料喂养3个月,对照组及雄鼠食用正常饲料。染氟3个月后雌雄大鼠按2∶1合笼交配,雌鼠妊娠后继续染毒,直至仔鼠断乳,仔鼠断乳后食用正常饲料。计算仔鼠脑脏器系数,以氟离子选择电极法检测仔鼠脑氟含量,以Morris水迷宫检测30 d龄仔鼠学习记忆能力,以Western blot检测仔鼠海马区GFAP的表达水平。结果与对照组比较,各染氟组仔鼠脑脏器系数无明显差异(P0.05);中氟组和高氟组仔鼠脑氟含量升高,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,定位航行实验第3、4天的中氟组及高氟组仔鼠平均逃避潜伏期延长,高氟组仔鼠首次到达平台时间延长,且穿越平台次数减少,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,高氟组仔鼠海马区GFAP表达水平增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论母鼠燃煤型氟暴露可影响仔鼠学习记忆能力,其机制可能与仔鼠海马区GFAP表达水平增加有关。     

燃煤型氟中毒雌性大鼠雌激素变化对骨代谢的影响

目的研究燃煤型氟中毒对雌性大鼠雌激素的影响在骨代谢中的作用。方法 50只SD雌性大鼠按体重随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组、去卵巢组,每组10只,其中低、中、高氟组分别食用含氟量为25、45、110 mg/kg的病区玉米饲料150 d。检测氟斑牙发生率,采用显微CT技术检测大鼠骨矿物质密度(BMD),以放射免疫法检测大鼠血清雌二醇(E_2)含量,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清骨代谢标志物。结果成功建立燃煤型氟中毒雌性大鼠模型。中、高氟组大鼠BMD均低于对照组,低氟组BMD高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);中、高氟组E_2低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);各染氟组骨钙素(BGP)、骨碱性磷酸酶(BALP)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)、胰岛素生长因子结合蛋白5(IGFBP5)均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);各染氟组抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)、胰岛素生长因结合蛋白4(IGFBP4)均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论燃煤型氟中毒雌性大鼠对E_2分泌功能的损伤可能加重了氟骨症发生,IGF家族可能介导该过程。     

镉对雌性大鼠生殖系统损害的研究

目的探讨镉致雌性大鼠的生殖系统损害及生殖功能的影响。方法将雌性成年Sprague Dawley(SD)大鼠20只随机分成两组:对照组(C组)和氯化镉(CdCl_2)组(Cd组)。Cd组雌鼠腹腔注射1.0 mg/kg CdCl_2溶液,每天1次,每周5 d,连续6周;C组雌鼠在对应时间腹腔注射同量生理盐水。染毒第20天起每12 h用阴道脱落细胞涂片法连续观察并记录动情周期;6周给药结束后,两组大鼠麻醉后心脏取血,测定镉及相关生殖激素含量;剖取子宫及卵巢检测其中镉含量。结果与C组相比,Cd组雌鼠动情周期和动情间期异常率均明显升高(P0.05);与C组相比,Cd组雌鼠血清镉、子宫镉及卵巢镉含量明显升高(P0.01);血清中雌二醇(E2)、孕酮含量较对照组明显下降(P0.01);血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)含量两组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论进一步明确了镉对大鼠的雌性性腺生殖毒性及影响机制,明确了子宫、卵巢为镉的生殖系统损害的靶器官。     

燃煤型氟中毒大鼠智力与脑ERK1/2表达关系

目的探讨燃煤型氟中毒大鼠智力变化及其发生机制。方法复制燃煤型氟中毒大鼠模型,用Morris水迷宫检测大鼠行为学改变;蛋白印迹及实时荧光定量PCR检测信号转导系统细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)表达水平。结果高、低氟组大鼠逃避潜伏时间分别为(14.44±10.18)和(11.64±7.08)s,较对照组明显延长(P0.05);氟中毒大鼠第7 d穿台次数及逗留平台相限时间均较对照组减少(P0.05);染氟组大鼠脑组织中ERK1/2磷酸化蛋白较对照组升高1.5~2.3倍(P0.05),mRNA表达水平较对照组升高2.0~3.5倍(P0.05),呈剂量-效应关系。结论燃煤型氟中毒可引起大鼠学习、记忆能力降低,其机制可能与脑组织中ERK/MAPK信号转导通路的激活有关。     

被动吸烟对大鼠卵泡发育和胚胎发育的影响

目的探讨被动吸烟对大鼠卵泡发育和胚胎发育的影响。方法取4周龄SD雌鼠60只,随机分为实验组(40只)和对照组(20只)。实验组大鼠给予6h/天被动吸烟处理,对照组为无烟同等条件饲养。处理8周后分别取实验组和对照组雌鼠各10只制作卵巢组织切片,观察卵泡发育情况;各组余鼠按♂/♀1︰3合笼,合笼后将实验组孕鼠随机分为孕后吸烟戒断组和孕后继续被动吸烟组。孕满18 d剖腹取胎,记录各项发育指标。结果实验组受孕率较正常对照组明显偏低(P0.05);实验组大鼠卵巢的次级卵泡(P0.01)和成熟卵泡(P0.05)较对照组明显减少,闭锁卵泡显著增多(P0.01);胎鼠存活率在孕后被动吸烟组显著低于对照组和孕后吸烟戒断组(P0.01);与对照组比较,胎儿宫内发育迟缓(IUGR)发生率在孕后吸烟戒断组(P0.05)和孕后继续被动吸烟组(P0.01)均具有统计学意义,在体重、身长、尾长方面差异极显著(P0.01);被动吸烟可引起胎鼠腹腔出血(P0.01)和心脏淤血(P0.05)等病理改变,亦可导致骨骼发育迟缓(45.5%17.3%,P0.05;58.817.3 P0.01),与对照组相比具有统计学意义。结论被动吸烟严重影响大鼠卵巢的卵泡发育和胚胎发育,且孕后戒烟并不能完全消除被动吸烟对胚胎发育的影响。     

低剂量接触镉对未成年大鼠卵巢发育影响

目的观察镉对卵泡生长发育和性激素分泌影响,探讨镉对未成年雌性大鼠卵巢发育的毒性作用。方法未成年雌性清洁级Wistar大鼠48只,按体重随机分为4组,对照组(生理盐水)和低、中、高剂量镉染毒组(0.1、0.3、0.9 mg/kg),腹腔注射染毒,1次/d,连续19 d;染毒结束后,捡测大鼠血清雌激素(E2)、孕激素(P4)水平;取出大鼠卵巢组织连续切片观察卵巢各级卵泡数目构成比。结果低、中、高剂量染镉组血清中E2的水平分别为(6.04±0.28)、(6.10±0.13)和(5.96±0.18)pg/mL,均低于对照组的(6.62±0.24)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);高剂量染镉组大鼠各期卵泡数目构成比与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在本实验条件下低剂量镉暴露对未成年雌性大鼠的卵巢发育具有毒性作用。     

卵巢生殖干细胞移植改善化疗小鼠卵巢功能的研究

目的探索小鼠卵巢生殖干细胞(OSCs)卵巢内移植是否可以改善化疗诱导的卵巢损伤。方法采用腹腔注射环磷酰胺和白消安建立化疗诱导的小鼠卵巢损伤模型,并随机分为模型组及移植组,同龄小鼠作为正常对照组。移植组在建模1周后,双侧卵巢分别移植OSCs。移植后观察小鼠动情周期;检测血清雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)浓度;测量卵巢重量及直径;卵巢组织切片观察卵巢结构和卵泡数目。结果 90%的模型组小鼠动情周期紊乱,70%移植组小鼠恢复正常的动情周期。移植组E2平均浓度(55.8±6.342)pg/ml高于模型组(34.1±4.643)pg/ml,差异有统计学意义(t=6.758,P0.05),而FSH浓度(28.3±1.433)ng/ml低于模型组(64.9±5.553)ng/ml,差异有统计学意义(t=-15.631,P0.05)。模型组卵巢呈萎缩状态,而移植组卵巢得到明显改善,形态、大小和正常对照组相似。移植组卵巢内各级卵泡数目均高于模型组,差异有统计学意义(t=11.851,P0.05),但仍低于正常对照组,差异亦有统计学意义(t=6.505,P0.05)。结论卵巢生殖干细胞卵巢内移植可以部分地修复化疗导致的卵巢损伤,从而改善卵巢功能。     

燃煤型氟中毒对大鼠骨骼组织形态计量学影响

目的探讨燃煤型氟中毒对大鼠骨组织形态计量学影响。方法建立低蛋白低钙条件下燃煤型氟中毒大鼠模型;测定大鼠24 h尿氟、骨氟,根据氟斑牙判断损伤程度;采用X线骨密度仪测定大鼠股骨及胫骨骨密度;扫描电子显微镜下观察大鼠股骨松质骨超微结构的形态学改变,观察大鼠胫骨上端骨形态静态计量学参数改变。结果染氟组大鼠100%发生氟斑牙;染氟组大鼠骨氟含量[(199.90±106.84)mg/kg]与骨密度(0.205 3 g/cm2)明显高于对照组[分别为(30.06±6.11)mg/kg、0.185 4 g/cm2],差异有统计学意义(P<0.05);形态计量学结果显示,染氟组大鼠胫骨上端骨小梁面积[(67 612.02±1 662.23)mm2]、骨小梁周长[(7 655.44±918.05)mm]、骨小梁个数[(38.25±4.99)个/mm]均明显高于对照组[分别为(50 951.43±9 046.88)mm2、(5 172.42±789.70)mm、(27.75±4.19)个/mm](均P<0.05)。结论单纯低蛋白低钙条件下,过量氟暴露可导致大鼠骨形态计量学出现以骨软化为主的病理改变。