仙灵骨葆对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合影响的实验研究

目的 研究仙灵骨葆对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的作用.方法 健康12周龄雌性SD大鼠40只,体重(258±14)g,随机分为4组,每组10只.A组仅作切口暴露腹腔;B组仅切除卵巢;C、D组切除卵巢同时制备右侧股骨中段横型骨折,髓内针固定,术后分别采用生理盐水及250 mg/(kg·d)仙灵骨葆灌胃.于术后即刻、1、2、3、4及5周测量A、B组大鼠体重.术后5周取各组右侧股骨标本,双能X线骨密度仪测量股骨全长骨密度(total femur bone mineral density,tBMD)、远1/3段骨密度(distal femur bone mineral density,dBMD)和中1/3段骨密度(middle femur bone mineral density,mBMD),并行C、D组CR摄片、HE染色和免疫组织化学染色.结果 B组大鼠体重从第3周开始显著高于A组(P＜0.05),绝经后骨质疏松模型制备成功.CR摄片示D组骨痂量相对较多,骨折线模糊;C组骨痂量较少,骨折线清晰.B组tBMD和dBMD明显低于A组,D组mBMD明显高于C组,差异均有统计学意义(P＜0.05);D组tBMD和dBMD较C组有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).组织学观察D组与C组比较,骨折端大部分骨性愈合,骨髓腔可见较多毛细血管植入.免疫组织化学染色示C、D组BMP-2的积分吸光度(IA)值分别为2.2366±0.1818和3.7273±0.8742,VEGF的IA值分别为2.8355±0.5370和3.8396±0.2230,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 仙灵骨葆可促进卵巢切除大鼠股骨骨折愈合,加快编织骨向板层骨的转化,这可能与上调BMP-2和VEGF表达相关.     

降钙素预防去势大鼠腰椎间盘退变的研究

[目的]观察降钙素对去卵巢大鼠腰椎骨量和椎间盘退变的作用。[方法]30只3个月龄Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机均分为3组,每组10只:假手术(Sham)组,去卵巢(OVX)组,去卵巢+降钙素(OVX+CT)组。3个月后处死动物,并于处死前10d和4d分别给予四环素和钙黄绿素双荧光标记。取L2～4椎体进行骨密度及骨组织形态计量学分析,L4～5腰椎及椎间盘进行VG染色,运用免疫组化检测椎间盘MMP-13的表达,观察椎间盘的病理学改变并根据组织学评分系统对腰椎间盘的退变程度(LVD)进行评分。[结果](1)腰椎间盘评分:OVX+V组显著高于Sham组及OVX+CT组;(2)腰椎骨密度及骨形态计量学骨量参数(BV/TV,Tb.N):OVX+V组显著低于Sham组及OVX+CT组;(3)免疫组化:OVX+V组大鼠椎间盘中基质金属蛋白酶MMP-13表达显著高于OVX+CT组、Sham组。[结论]降钙素可预防去卵巢大鼠腰椎间盘的退变,其作用机制可能与维持椎体骨量及微观结构,同时降低椎间盘中MMP-13的表达抑制基质的降解有关。     

降钙素对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的作用

目的观察降钙素对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的作用。方法将3月龄雌性SD大鼠40只随机分为假手术组,卵巢切除组,对照组和治疗组,每组10只,除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除。4周后处死假手术组和卵巢切除组大鼠,测量右股骨骨密度。卵巢切除4周后,对照组和治疗组行右股骨骨折,分别皮下注射生理盐水和降钙素(16IU/kg),隔日1次,于骨折术后9周测量右股骨骨密度,行苏木精-伊红(HE)染色及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,骨形态发生蛋白-2(BMP-2),血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化染色。结果与假手术组比较,卵巢切除组大鼠术后4周体质量显著增加,股骨骨密度显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。骨折后9周,治疗组TRAP染色阳性细胞积分吸光度值较对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。骨折后9周,对照组和治疗组骨折线较模糊,骨痂体积无差别,骨小梁排列较有序,骨密度在两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。对照组与治疗组在骨折后9周的BMP-2、VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论降钙素可以抑制去卵巢大鼠骨折部位破骨细胞活性,但促进大鼠股骨骨折愈合的作用不明显。     

仙灵骨葆对骨质疏松性骨折骨痂血管形成的影响

背景：骨质疏松对骨折愈合早期的影响尚存争议,仙灵骨葆对骨质疏松性骨折愈合的影响及其机制尚有待深入研究。 目的：观察骨质疏松对大鼠股骨干骨折愈合的影响,以及仙灵骨葆对骨质疏松性骨折愈合的作用。 方法：将50只雌性12周龄Sprague-Dawley大鼠随机分成5组：假手术组、骨折组、去卵巢组、去卵巢+骨折组及治疗组,后3组切除大鼠双侧卵巢制备去卵巢模型,骨折模型于去卵巢后4周制备,为股骨干中段横行骨折。治疗组在去卵巢及骨折基础上灌胃给予仙灵骨葆250 mg/(kg•d)。给药3周,取去卵巢+骨折组、骨折组和治疗组大鼠骨折侧标本行X射线摄像仪摄片后,测量其骨密度,苏木精-伊红染色观察骨痂组织的病理学改变并计数血管,免疫组织化学染色检测骨痂组织骨形态发生蛋白2的表达。 结果与结论：去卵巢处理后大鼠的骨密度、计算机X射线摄像仪摄片评分显著降低(P < 0.05),仙灵骨葆可在一定程度上提高去卵巢后骨折大鼠的骨密度及X射线摄像仪摄片评分,但差异无显著性意义(P > 0.05);仙灵骨葆可提高去卵巢后骨折大鼠骨痂组织的血管数量(P < 0.05),但对骨形态发生蛋白2的表达无影响。提示,去卵巢后大鼠骨折早期愈合过程延迟,仙灵骨葆可促进骨质疏松大鼠骨折愈合早期血管的形成。     

卵巢切除股骨骨折大鼠骨愈合中降钙素的作用

背景：降钙素可活化腺苷酸环化酶蛋白激酶A通路及磷脂酶C通路,抑制破骨细胞的活性,可能治疗骨质疏松性骨折。 目的：观察降钙素对去卵巢大鼠股骨骨折愈合的作用。 方法：构建双侧卵巢切除骨质疏松右股骨骨折SD大鼠模型,然后分别皮下注射生理盐水和降钙素(16 IU/kg),隔日1次,于骨折后3周和6周测量右股骨行骨密度,苏木精-伊红及抗酒石酸酸性磷酸酶染色,骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子免疫组化染色。 结果与结论：骨折后给予降钙素治疗的大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性细胞积分吸光度值较生理盐水治疗的大鼠显著减少(P < 0.05)。骨折后3周,两组骨折线均较清晰,骨痂体积无明显差别,骨折愈合以软骨内化骨过程为主,骨密度无显著性差异(P > 0.05)。骨折后6周,两组骨折线较模糊,骨痂体积无差别,骨小梁排列较有序,用药组股骨骨密度较对照组升高(P < 0.05)。两组在骨折后3周和6周的骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子差异无显著性意义(P > 0.05)。证实降钙素可以抑制去卵巢大鼠骨折部位破骨细胞活性,但无明显促进大鼠股骨骨折愈合的作用。     

阿仑膦酸钠预防卵巢切除大鼠腰椎间盘退变

目的: 探讨阿仑膦酸钠对卵巢切除大鼠腰椎间盘退变预防作用及其作用机制.方法: SD大鼠随机均分为Sham组,双侧卵巢切除+盐水组(OVX+V组),双侧卵巢切除+阿仑膦酸钠(OVX+ALN组).处死前10d和4d分别给予四环素和钙黄绿素双荧光标记.取腰2椎体进行骨形态计量学分析,腰4～5腰椎及椎间盘进行VG特殊染色,免疫组织化学检测椎间盘基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达,观察椎间盘的病理学改变并根据组织学评分系统对腰椎间盘的退变程度(LVD)进行评分.结果: 腰椎骨量OVX+V组低于Sham组及OVX+ALN组;腰椎间盘评分OVX+V组高于Sham组及OVX+ALN组; OVX+V组大鼠椎间盘中MMP-13表达高于OVX+ALN组、Sham组.结论:阿仑膦酸钠可预防卵巢切除大鼠腰椎间盘的退变,其作用可能与维持椎体骨量及微观结构,降低椎间盘中MMP13的表达,抑制基质的降解有关.     

经伤椎椎弓根复位植骨内固定术治疗胸腰椎陈旧性骨折

目的  探讨经伤椎椎弓根复位植骨结合后路内固定术治疗胸腰椎陈旧性骨折的临床疗效。方法  选择2013年1月-2014年6月河北省唐山市第二医院脊柱外科28例胸腰椎陈旧性骨折患者（伤后3～5周）。采用经伤椎椎弓根复位加椎体内植骨并后路椎弓根钉内固定治疗。观察术前、术后1周和术后3个月椎体高度压缩率、伤椎Cobb角、ODI评分及椎管侵占率等,并进行比较分析。结果  28例患者均成功实施手术并获随访,时间6～18（10.6±4.8）个月。伤椎高度矫正率约93%,椎体高度压缩率、伤椎Cobb角、ODI评分及椎管侵占率较术前均有明显改善。术前与术后1周及术后3个月比较差异有统计学意义（P <0.05）;除ODI评分外,术后1个周与术后3个月比较差异无统计学意义（P >0.05）。无内固定松动、断裂及神经损伤等并发症发生,植骨未吸收。结论  经伤椎椎弓根复位加椎体内植骨并后路椎弓根钉内固定对于治疗胸腰椎陈旧性骨折,可增加前柱支撑,减少椎体高度丢失,疗效满意。

     

毛兰素通过Akt抑制膀胱癌细胞5637增殖

目的:探讨蛋白激酶B(Akt)过表达对毛兰素抑制人膀胱癌细胞5637增殖作用的影响及相关机制。方法:运用慢病毒载体建立5637细胞Akt稳定过表达株,并进行如下分组,以空载体感染5637细胞作为空白组,Akt组,空载体加药组(毛兰素62.5μg·L^-1),Akt加药组(毛兰素62.5μg·L^-1);采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法测定细胞活性;通过克隆形成实验检测各组5637细胞克隆形成情况;进行流式细胞术检测,评价细胞周期分布情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化(p)-Akt,Akt,p21蛋白表达;进行糖摄取测定实验和乳酸分泌实验,检测5637细胞糖酵解情况。结果:与空白组比较,毛兰素可以抑制膀胱癌5637细胞的增殖(P<0.05),过表达Akt能部分逆转毛兰素对膀胱癌5637细胞的增殖抑制作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素可以抑制膀胱癌5637细胞的克隆形成(P<0.05),过表达Akt能部分逆转毛兰素对膀胱癌5637细胞的克隆形成抑制作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素能诱导膀胱癌5637细胞DNA合成前期(G1期)阻滞(P<0.05),过表达Akt能逆转毛兰素对5637细胞的周期阻滞作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素可以促进p21蛋白表达并抑制p-Akt,Akt蛋白表达(P<0.05),过表达Akt能够逆转毛兰素对p21蛋白表达的上调作用(P<0.05)。与空白组比较,毛兰素能抑制膀胱癌细胞5637的葡萄糖摄取和乳酸分泌(P<0.05),过表达Akt能够逆转毛兰素对5637细胞糖酵解的抑制作用(P<0.05)。结论:毛兰素对膀胱癌细胞5637增殖具有抑制作用,可以促进p21表达并抑制p-Akt的表达;Akt过表达可逆转毛兰素对膀胱癌细胞5637的增殖抑制作用。提示Akt在毛兰素抑制5637细胞增殖过程中发挥着重要作用,为毛兰素应用于膀胱癌治疗提供了新的靶向依据。     

MMP-13和Galectin-3在骨性关节炎滑膜组织中的临床意义

目的检测MMP-13和Galectin-3在骨性关节炎滑膜组织中的表达,探讨二者在骨性关节炎发病机制中的作用。方法通过关节镜获取42例骨性关节炎滑膜标本,同时选择12例非正常死亡及外伤性截肢的健康青年的滑膜组织作为对照组。采用免疫组化检测MMP-13及Galectin-3在骨性关节炎滑膜组织中的表达。结果病理观察显示骨性关节炎滑膜细胞增生,淋巴细胞及浆细胞浸润,甚至形成淋巴滤泡,同时微血管增生,管壁增厚。免疫组化结果显示：在骨性关节炎滑膜组织中,MMP-13蛋白主要表达于滑膜衬里层细胞、炎细胞、巨噬细胞样组织细胞以及少许血管内皮细胞。在正常滑膜组织中,MMP-13蛋白则主要表达于滑膜衬里层细胞。二者的阳性细胞率分别为0．387±0．042和0．053±0．019,前者的阳性表达率明显高于后者（P〈0．05）。Galectin-3蛋白在骨性关节炎组中的阳性表达主要分布于滑膜衬里层细胞及滑膜下层少许炎细胞中。Galectin-3蛋白在骨性关节炎组和对照组的阳性细胞率分别为0．267±0．044和0．046±0．021。前者的阳性表达率明显高于后者fP〈0．05）。MMP-13和Galectin-3在骨性关节炎滑膜中表达与患者年龄及性别无关（P〉0．05）,而与骨性关节炎X线片临床分期有关,MMP-3与Galectin-3在滑膜中的表达均随着骨性关节炎X线片临床分期的增高而增强（P〈0．05）。结论MMP-13蛋白和Galectin-3蛋白在骨性关节炎滑膜组织中的表达显著高于正常滑膜组织,随X线片临床分期的增高而增强,表明二者参与骨性关节炎滑膜的病理过程,对滑膜炎起相互促进作用,临床检测滑膜组织中MMP-13蛋白和Galectin-3蛋白的表达有助于指导骨性关节炎的治疗及病情的评估。     

MMP-13和 Galectin-3在骨性关节炎滑膜组织中的临床意义

目的检测 MMP-13和 Galectin-3在骨性关节炎滑膜组织中的表达,探讨二者在骨性关节炎发病机制中的作用.方法通过关节镜获取42例骨性关节炎滑膜标本,同时选择12例非正常死亡及外伤性截肢的健康青年的滑膜组织作为对照组.采用免疫组化检测 MMP-13及 Galectin-3在骨性关节炎滑膜组织中的表达.结果病理观察显示骨性关节炎滑膜细胞增生,淋巴细胞及浆细胞浸润,甚至形成淋巴滤泡,同时微血管增生,管壁增厚.免疫组化结果显示:在骨性关节炎滑膜组织中,MMP-13蛋白主要表达于滑膜衬里层细胞、炎细胞、巨噬细胞样组织细胞以及少许血管内皮细胞.在正常滑膜组织中,MMP-13蛋白则主要表达于滑膜衬里层细胞.二者的阳性细胞率分别为0.387±0.042和0.053±0.019,前者的阳性表达率明显高于后者( P<0.05).Galectin-3蛋白在骨性关节炎组中的阳性表达主要分布于滑膜衬里层细胞及滑膜下层少许炎细胞中.Galectin-3蛋白在骨性关节炎组和对照组的阳性细胞率分别为0.267±0.044和0.046±0.021.前者的阳性表达率明显高于后者( P<0.05).MMP-13和 Galectin-3在骨性关节炎滑膜中表达与患者年龄及性别无关( P>0.05),而与骨性关节炎X线片临床分期有关,MMP-3与 Galectin-3在滑膜中的表达均随着骨性关节炎 X线片临床分期的增高而增强( P<0.05).结论MMP-13蛋白和 Galectin-3蛋白在骨性关节炎滑膜组织中的表达显著高于正常滑膜组织,随X线片临床分期的增高而增强,表明二者参与骨性关节炎滑膜的病理过程,对滑膜炎起相互促进作用,临床检测滑膜组织中 MMP-13蛋白和 Galectin-3蛋白的表达有助于指导骨性关节炎的治疗及病情的评估.