前哨淋巴结阴性乳腺癌病人腋窝低位淋巴结清扫

目的:探讨前哨淋巴结(sentinel lymph node, SLN)阴性乳腺癌病人腋窝低位淋巴结清扫的必要性和安全性。方法:纳入2015年1月至2017年1月本中心及上海交通大学医学院附属瑞金医院外科乳腺疾病诊治中心单纯乳房切除和SLN阴性的718例乳腺癌病人,均行腋窝低位淋巴结清扫,分析其转移率及转移相关因素。结果:本研究腋窝低位淋巴结检出686例(95.5%),平均检出(9.4±5.7)(0～21)枚。40例病人发现腋窝低位淋巴结转移,转移率5.6%(40/718)。单因素分析显示,腋窝低位淋巴结转移与腋窝淋巴结可触及、前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy, SLNB)数目、脉管癌栓、神经侵犯、HER2阳性、分子分型显著相关(P0.05)。多因素Logistic分析显示,腋窝淋巴结可触及、SLNB数目、脉管癌栓、神经侵犯、分子分型是腋窝低位淋巴结转移的独立危险因素。术后患肢发生上肢淋巴水肿5例(0.7%),病人上肢功能恢复良好。结论:SLN阴性乳腺癌病人存在腋窝低位淋巴结临床转移。腋窝低位淋巴结转移存在许多危险因素,有必要行淋巴结清扫。     

三维多孔电磁复合支架构建与理化表征

模拟心肌细胞外基质(ECM)的组织结构和电生理特性,构建具有导电性和超顺磁响应性的三维多孔纳米纤维复合材料支架,为细胞黏附、增殖和分化提供有利的微环境。以明胶为壳层、聚乳酸为芯层,并在各层中引入四氧化三铁纳米颗粒,采用共轴静电纺丝技术,制备纳米纤维薄膜;将其粉碎并与碳纤维混合,经冷冻干燥和交联处理,得到三维多孔支架。用扫描电镜和透射电镜观察支架形貌及结构,用四探针仪测定支架的电导率,用振动样品磁强计测量支架磁滞回线,用万能材料试验机检测支架材料的压缩应力-应变曲线;根据质量和体积计算支架密度,根据支架吸水前后质量计算吸水率。用CCK-8和Western Blot,分析细胞在支架上的活性及功能。支架内部呈多孔蜂窝结构,孔隙间相互贯通;当碳纤维含量为0、1、3、5 mg/mL时,支架密度分别为73.07、72.56、65.88、63.34 mg/cm³,吸水率分别为1 164.60%、1 186.48%、1 284.84%、1 323.66%;电导率分别为0、0.008 8、0.246 7、2.662 5 s/m,最大磁饱和强度分别为3.68、3.15、2.45、2.90 emu/g,抗压缩能力也相应提高。上述复合材料支架能够显著促进心肌细胞成熟相关蛋白Cx43和RhoA的表达,诱导心肌细胞向成熟分化。三维多孔电磁复合支架同时具有超顺磁性和导电性,微观上具有纳米纤维网络和多孔结构,并通过碳纤维的复合,使力学性能得到显著提高,支持心肌细胞生长并促进其成熟。     

二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒对人血管内皮细胞的作用研究

目的研究二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米颗粒(dimercaptosuccinic acid-magnetite nanoparticles,DMSA-Fe3O4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)功能的影响。方法利用动态光散射法表征DMSA-Fe3O4的粒径及表面电荷;采用普鲁士蓝染色、邻二氮菲铁定量和透射电镜观察方法研究HUVECs对DMSA-Fe3O4的摄取规律;利用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测DMSA-Fe3O4对内皮细胞活性的影响;通过酶联免疫吸附试剂盒测定DMSA-Fe3O4对内皮细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分泌量的影响。结果HUVECs能够大量吞噬DMSA-Fe3O4,其吞噬量具有孵育时间和剂量依赖性;短时间内所测剂量范围DMSA-Fe3O4对细胞活性无显著影响,但长时间高剂量条件使细胞活性明显降低。此外,在高剂量DMSA-Fe3O4暴露下(200μg/mL),内皮细胞分泌VEGF的量约为对照组的3倍。结论DMSA-Fe3O4易于被HUVECs吞噬;高浓度DMSA-Fe3O4与HUVECs长时间培养使细胞活性降低,并刺激内皮细胞分泌VEGF。     

不同洗板次数对检测抗—HCV的影响

抗 - HCV检测的原理是酶联免疫吸附试验 (EL ISA)中的间接方法 ,其中试验过程中要经过 2次洗板。有时试验过程中个别批号连续出现花板 ,怀疑是洗板的问题 ,为排除此原因 ,作者采用不同样品探讨洗板次数对检测抗 - HCV的 OD值的影响 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料　抗 - HCV EIA试剂盒 (国内某著名试剂厂家 ) ;RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan公司 ) ;BEP (德国 Behring公司 )。1.2　方法　取有代表性的 6个样品 ,除每次洗板次数不同外 ,其余按抗 - HCV试剂盒说明书操作。2　结果不同的洗板次数对检测抗 - HCV的 OD值…     

微板速率法检测ALT的探讨

速率法检测ALT已在血站系统使用[1],但全自动的生化分析仪尚未普及,一般多采用微板速率法检测ALT[2],但该法尚无统一的标准,各实验室的检测结果差异较大。尽管一些实验室采用带标准品的动力学法检测,但存在标准品不易获得或标准品检测的线性不能满足实验要求等缺陷,我们采用微板标准动力学法,并结合试剂和仪器的特点,探讨了微板速率法检测ALT的各项参数,现介绍如下。1对象和方法1.1对象郑州市无偿献血标本,卫生部临检中心ALT室间质控品。1.2试剂与仪器STAR全自动加样器,瑞士H am lton公司产;HT 3温控酶标仪,奥地利产。1.3方法参考试…     

不同磁性纳米材料对血管内皮细胞作用的对比研究

目的研究3种不同磁性纳米颗粒对体外培养的血管内皮细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平和细胞间连接的影响,探讨二者之间的关联性。方法将原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)随机分为对照组和不同磁性纳米颗粒暴露组。利用动态光散射(dynamic light scattering,DLS)对纳米颗粒的粒径和电势进行表征;采用细胞计数试剂盒(cell counting Kit-8,CCK-8)法测定细胞活性;通过二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(2',7'-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)荧光探针标记和流式细胞术检测细胞中ROS水平;利用普鲁士蓝染色和透射电镜方法观察内皮细胞对磁性纳米颗粒的摄取。对细胞表面血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)进行免疫荧光标记,在激光共聚焦显微镜下观察细胞间连接,并通过Western blot检测VE-cadherin表达水平。结果磁性纳米颗粒能诱导内皮细胞内ROS水平上升,降低VE-cadherin表达水平,细胞间缝隙增大。抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸处理可使ROS水平下降并减少细胞缝隙。由于组分、表面修饰、尺寸等因素不同,磁性纳米颗粒对内皮细胞活性、ROS水平及VE-cadherin产生不同程度的影响。结论不同磁性纳米颗粒对内皮细胞活性氧和细胞间连接的影响不同;在实验所采用的低剂量暴露下可影响内皮细胞连接的完整性。     

全自动加样仪STAR常见的故障及处理

全自动加样仪具有加样准确、快速的特点,但如果使用不当,出现的故障不能及时处理,将对实验及结果造成影响,我们对全自动加样仪STAR常见的故障及处理方法进行了总结,报告如下。1仪器或洗站不能联机或初始化检查连线,检查并清理工作台面的水,以免水漏入台面后部及下部,致电路板损     

加样后室温停留时间对自动化检测抗-HCV的影响

目前 ,血站检验自动化仪器代替过去传统的手工操作 ,省工、安全。但仪器也有不足之处 ,当检测样品量大时 ,抗 - HCV加完样品后 ,进入仪器内的微板操作自动编排 ,需在室温仓内停留一段时间 ,然后才进入 37℃孵育仓正式开始记时 ,而实际上抗 - HCV在室温就已开始进行抗原抗体反应 ,尤其是在夏季 ,仪器做的抗 - HCV假阳性率比手工偏高。为了解决遇到的问题 ,我们通过 3个典型样品 ,探讨室温停留的时间对抗 - HCV测定结果的影响程度 ,现报告如下。1　材料和方法1 .1　材料　抗 - HCV EIA试剂盒 (北京万泰 ) ;RSP2 0 0全自动加样器 (瑞…     

全自动加样仪STAR加样参数的选择

目的 解决全自动加样仪STAR加样存在的不足，优化选择加样参数。方法 采用正交试验选择加样参数，同时对液体校正曲线进行调整。结果 优化前仪器分配10μl及100μl血浆时，Cy的范围分别为1．1％～2．2％、0．8％～1．2％，偏离范围分别为8．0％～12．7％、2．7％～6．0％；优化后CV的范围分别为0．9％～1．7％、0．4％～0．8％，偏离范围分别为0．4％～6．5％、0．1％～1．9％。结论 优化后加样的精密度和偏离范围均可满足实验要求。