慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α表达对线粒体合成的影响

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠外周骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)与线粒体合成相关基因的表达,探讨COPD骨骼肌线粒体生物合成的变化及影响因素.方法 用2次气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型.检测对照组和模型组大鼠外周血及骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分析方法检测骨骼肌PGC-1α、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(Tfam)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ基因(COX Ⅳ)mRNA表达,Western blot检测骨骼肌PGC-1α、NRF1、Tfam、COXⅣ蛋白相对含量.结果 模型组大鼠外周血和骨骼肌TNF-α浓度(ng/L,378.09±26.34和330.56±23.79)较对照组升高(154.70±12.98和129.77士11.79);模型组PGC-1α(0.17±0.05)、NRF1(0.20士0.08)、Tfam(0.21 ±0.04)、COXⅣ(0.25±0.07) mRNA相对表达量较对照组PGC-1α(1.00 ±0.00)、NRF1 (1.00 ±0.00)、Tfam(1.00 ±0.00)、COX Ⅳ(1.00±0.00) mRNA相对表达量明显降低.骨骼肌TNF-α表达和PGC-1α mRNA呈负相关.结论 COPD大鼠骨骼肌PGC-1α及线粒体合成相关基因表达降低,其机制可能与TNF-α高表达有关.     

疑诊肺部真菌感染的10例经验性用药分析

目的 探讨疑诊肺部真菌感染的经验性抗真菌用药方案.方法 对疑诊肺部真菌感染并以经验性广谱抗真菌治疗好转10例患者的临床资料进行回顾分析.结果 10例患者主要临床表现为发热（10/10）、咳嗽、咳痰（8/10）.胸部CT检查均表现为密度较高的感染性病灶（5例伴空洞,8例伴光晕征）.4例痰培养见真菌孢子和菌丝.8例有真菌感染危险因素,3例初用氟康唑治疗无效,改用伊曲康唑好转;6例用伊曲康唑好转;1例用两性霉素B好转.结论 肺部真菌感染确诊困难,流行病学调查显示非白念真菌发病率有增高趋势,疑诊肺部真菌感染应及时将广谱抗真菌治疗作为一线药物.     

社区获得性肺炎住院患者血清除降钙素原与肺炎严重程度和预后的关系

目的 考察血清降钙素原水平与社区获得性肺炎(CAP)住院患者严重程度和预后的关系.方法 回顾性分析住院患者数据库中,2009年7月～2010年7月收治的CAP患者的临床资料.结果 324例CAP住院患者中,212例(182例普通CAP、22例重症肺炎和14例死亡病例)纳入本研究.212例患者入院时平均血降钙素原为(...     

干细胞微环境的体外模拟

背景：细胞外基质是组织微环境的重要组分,为维持细胞功能提供了关键的生化和物理信号。 目的：对体外模拟骨髓干细胞微环境的研究进展进行综述,着重于介绍体外再造细胞外基质。 方法：应用计算机检索Pubmed (1999-01/2010-10)、Embase (1999-01/2010-10)数据库中关于干细胞微环境的文章,以“mesenchymal stem cells; extracellular matrix; niche; growth factor modulation; culture in vitro”为检索词进行检索。初检得到321篇文献,根据纳入标准选择关于干细胞微环境的23篇文献进行综述。 结果与结论：骨髓源性的细胞外基质培养体系能保持间充质干细胞的特性,对纯化这些细胞和形成更多数量的同质间充质干细胞提供了便利。使用3D合成材料建立一个独特的骨架,包被组织特异性的间充质干细胞蛋白,并添加正确的生长因子组合,有利于调控间充质干细胞的分化方向。     

己酮可可碱诱导吸烟肺纤维化的机制

目的： 观察己酮可可碱 (PTX) 长期干预对慢性吸烟动物肺组织病理表型的影响并探讨其可能的机制。方法: 将BALB/c小鼠随机分为单纯吸烟组、假吸烟组、吸烟加服PTX组和假吸烟加服PTX组。第16周末处死动物,观察各组动物肺组织的病理改变,测定小鼠肺组织羟脯氨酸含量、支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IFN-γ因子水平。结果: 单纯吸烟组小鼠表现为肺气肿样病理表型;而吸烟加服PTX组小鼠肺组织表现为肺纤维化样病理表型;假吸烟组和假吸烟加 PTX组动物既无明显肺气肿也无明显肺纤维化。吸烟加服PTX组小鼠肺纤维化评分和肺组织羟脯氨酸含量明显高于其它实验组。单纯吸烟组与吸烟加服PTX组小鼠BALF中Th2细胞因子IL-4与Th1细胞因子 IFN-γ比值分别为20.3±25.5和70.7±59.9,表明PTX导致吸烟性炎症向Th2极化转化。 结论：PTX长期干预可导致慢性吸烟性肺纤维化形成,Th1/Th2炎症极化趋势的变化可能是导致这种变化的重要机制。     

内科住院患者静脉血栓栓塞症的一级预防

静脉血栓栓塞症包括深静脉血栓形成和肺栓塞。深静脉血栓形成患者中60％～70％无任何症状,30％-40％可有局部疼痛、肿胀等症状和体征（深静脉血栓形成后综合征）,     

诱导多能干细胞建系及体外造血祖细胞定向分化体系的建立

背景：目前,大量文献报道了诱导多能性干细胞系的建立,但大规模体外诱导分化造血祖细胞的研究还缺乏深入的探讨。 目的：建立诱导多能性干细胞体外定向诱导形成造血祖细胞的方法。 方法：采用慢病毒感染的方法将含有Oct4、Sox2、Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导人皮肤成纤维细胞,获得了诱导多能性干细胞;在诱导分化体系中添加了 Y-27632,克服干细胞扩增中的凋亡现象;运用OP9细胞产生的条件培养液建立诱导多能性干细胞体外定向分化形成造血祖细胞的分化体系。 结果与结论：①前3代细胞克隆传代时,诱导多能性干细胞发生凋亡的现象很多,很难大规模扩增培养。培养基中添加阻断 ROCK活化的抑制剂,能够明显抑制胚胎干细胞的凋亡。②诱导多能性干细胞在 OP9细胞条件培养液作用下,经过体外诱导分化,形成CD34＋造血祖细胞。     

利用细胞外基质大规模扩增临床级人脂肪间充质干细胞

背景：如何运用无血清培养体系大规模扩增处于未分化状态的脂肪间充质干细胞,并使其保持“干性”是脂肪间充质干细胞临床应用转化中急待解决的难题。目的：建立含细胞外基质的脂肪间充质干细胞体外培养系统,验证其扩增细胞的高效性、有效性及安全性。方法：在无血清培养条件下,将体外分离得到的脂肪间充质干细胞分别接种在包被细胞外基质的培养板和传统二维塑料培养板上。经过体外扩增后,比较2种条件下细胞数量、细胞表面标记物表达、细胞衰老状况以及体外多向分化能力（诱导成脂、成骨和成软骨）的差异,考察脂肪间充质干细胞在含细胞外基质的培养条件下扩增后的临床安全性。结果与结论：脂肪间充质干细胞扩增到第5代时,包被细胞外基质培养板的细胞产量已经是传统二维塑料培养板的10倍以上,流式细胞检测表明,在含细胞外基质条件下扩增的脂肪间充质干细胞仍保持了干细胞表面特定标记物的表达。细胞衰老检测结果显示,使用包被细胞外基质的培养板扩增脂肪间充质干细胞至第15代时,细胞仍几乎无老化现象,而使用二维塑料培养板扩增的细胞在第5代时已出现明显老化,传代后细胞增殖能力明显下降。体外多向诱导分化实验显示,脂肪间充质干细胞在含细胞外基质条件下扩增至第15代时仍具有成脂、成骨和成软骨的分化功能,并且与第5代时没有明显差异,同时显著优于传统培养条件下的第5代脂肪间充质干细胞。染色体核型分析及小鼠成瘤性试验结果表明,脂肪间充质干细胞在含细胞外基质条件下扩增后仍具备临床应用的安全性。以上结果证实,含细胞外基质的无血清培养系统可以更高效且安全地扩增出具有临床应用潜能的脂肪间充质干细胞。     

上皮间质转化及CD146和N-cadherin在判定肺腺癌EGFR-TKI获得性耐药中的作用

目的 探讨上皮间质转化及CD146、N-cadherin判定肺腺癌表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI）耐药的价值。方法 肺腺癌患者10例均应用EGFR-TKI治疗,采用免疫组织化学法检测治疗前、后肺腺癌标本E-cadherin、vimentin、CD146及N-cadherin蛋白表达情况,采用图像分析系统检测各指标吸光度值。结果 EGFR-TKI治疗后肺腺癌组织E-cadherin蛋白表达水平（0.180±0.011）低于治疗前（0.231±0.012）,vimentin、N-cadherin与CD146蛋白表达水平（0.231±0.012,0.214±0.013,0.321±0.022）高于治疗前（0.165±0.012,0.174±0.013,0.161±0.022）（P〈0.05）。结论 EGFR-TKI耐药后肺腺癌产生上皮间质转化并使CD146、N-cadherin表达上调,E-cadherin、vimentin、CD146、N-cadherin可作为诊断肺腺癌EGFR-TKI耐药的分子标志物。