慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α表达对线粒体合成的影响

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠外周骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)与线粒体合成相关基因的表达,探讨COPD骨骼肌线粒体生物合成的变化及影响因素.方法 用2次气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型.检测对照组和模型组大鼠外周血及骨骼肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分析方法检测骨骼肌PGC-1α、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(Tfam)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ基因(COX Ⅳ)mRNA表达,Western blot检测骨骼肌PGC-1α、NRF1、Tfam、COXⅣ蛋白相对含量.结果 模型组大鼠外周血和骨骼肌TNF-α浓度(ng/L,378.09±26.34和330.56±23.79)较对照组升高(154.70±12.98和129.77士11.79);模型组PGC-1α(0.17±0.05)、NRF1(0.20士0.08)、Tfam(0.21 ±0.04)、COXⅣ(0.25±0.07) mRNA相对表达量较对照组PGC-1α(1.00 ±0.00)、NRF1 (1.00 ±0.00)、Tfam(1.00 ±0.00)、COX Ⅳ(1.00±0.00) mRNA相对表达量明显降低.骨骼肌TNF-α表达和PGC-1α mRNA呈负相关.结论 COPD大鼠骨骼肌PGC-1α及线粒体合成相关基因表达降低,其机制可能与TNF-α高表达有关.     

疑诊肺部真菌感染的10例经验性用药分析

目的 探讨疑诊肺部真菌感染的经验性抗真菌用药方案.方法 对疑诊肺部真菌感染并以经验性广谱抗真菌治疗好转10例患者的临床资料进行回顾分析.结果 10例患者主要临床表现为发热（10/10）、咳嗽、咳痰（8/10）.胸部CT检查均表现为密度较高的感染性病灶（5例伴空洞,8例伴光晕征）.4例痰培养见真菌孢子和菌丝.8例有真菌感染危险因素,3例初用氟康唑治疗无效,改用伊曲康唑好转;6例用伊曲康唑好转;1例用两性霉素B好转.结论 肺部真菌感染确诊困难,流行病学调查显示非白念真菌发病率有增高趋势,疑诊肺部真菌感染应及时将广谱抗真菌治疗作为一线药物.     

苦参碱治疗乙型肝炎后肝纤维化临床观察

<正>乙肝后肝纤维化是由乙型肝炎病毒引起的肝脏慢性、进行性、弥漫性病变,临床较常见。治疗原则为保护肝细胞、抗肝纤维化、抗病毒及调节免疫等,本病传统药物治疗往往疗效差或副作用大。苦参碱是从中药苦豆子和苦参根中提取的[1],具有降酶、退黄、抑制病毒复制的作用。本文应用苦参碱对乙     

白细胞介素-33的生物学作用及其与临床疾病的关系

白细胞介素（IL）-33是IL-1家族的新成员,在多种细胞基质中例如上皮细胞、内皮细胞、嗜酸性细胞中都有表达,它在炎症因子刺激下表达增多,在皮肤、肺、胃肠道、脑等器官中有较高水平表达.IL-33具有双重作用,可作为分泌细胞因子参与调节Th2型机体免疫和炎症反应,与其同时作为核结合因子定位于细胞核内,对转录起抑制作用.众多研究表明IL-33与哮喘及过敏反应、风湿免疫性疾病、皮肤感染、肿瘤、肥胖症和2型糖尿病及心血管系统等疾病有紧密联系.我们对IL-33的分子结构、受体及信号传导途径、生物学作用及其与相关临床疾病关系、研究进展作一简要综述.     

人胚胎成纤维细胞的培养及饲养层的制备

目的 从人胚胎躯干中分离、培养人胚胎成纤维细胞,建立人胚胎成纤维细胞饲养层用于人精原干细胞的培养.方法 利用酶消化法从孕5～9周龄人胚胎躯干中分离培养人胚胎成纤维细胞,制作饲养层,使用不同浓度丝裂霉素C处理,以细胞形态、生长曲线作为胚胎成纤维细胞和饲养层的评价指标.结果 从人胚胎中成功分离培养出人胚胎成纤维细胞,该细胞可传代15代以上,且经过传代及冷冻复苏后生物学特性无改变.12.5mg/L丝裂霉素C作用2h可达到较好处理效果.结论 成功分离和培养人胚胎来源的成纤维细胞,用于人精原干细胞饲养层的制作.     

羟基喜树碱富集结肠肿瘤干细胞样群体的初步研究

背景:肿瘤干细胞是临床上肿瘤耐药的主要机制,识别并靶向肿瘤干细胞为肿瘤治疗的研究带来了新的思路。目的:探讨在体外以化疗药物富集结肠肿瘤干细胞样群体的可行性。方法:应用前期实验中以药物浓度递增诱导法建立的羟基喜树碱(HCPT)耐药人结肠癌细胞株SW1116/HCPT,免疫荧光标记干细胞表面抗原CD133,Hoechst33342/PI双染流式细胞仪检测、分选侧群(SP)细胞,实时PCR检测干细胞相关和多药耐药相关基因表达。结果:亲代细胞株SW1116中CD133阳性群体和SP群体分别仅占2%和1%,耐药细胞株SW1116/HCPT中则高达7%和61%,多药耐药基因MDR1抑制剂维拉帕米可使两组SP群体均下降至接近0水平。SW1116/HCPT细胞SP群体中干细胞相关基因CD133、Nanog和多药耐药相关基因MDR1、MRP1、MRP2、MRP6 mRNA表达水平较非SP群体显著上调(P0.05)。结论:HCPT药物浓度递增诱导法可成功富集结肠肿瘤干细胞样群体,其SP亚群中存在于细胞相关和多药耐药相关基因高表达。     

己酮可可碱诱导吸烟肺纤维化的机制

目的： 观察己酮可可碱 (PTX) 长期干预对慢性吸烟动物肺组织病理表型的影响并探讨其可能的机制。方法: 将BALB/c小鼠随机分为单纯吸烟组、假吸烟组、吸烟加服PTX组和假吸烟加服PTX组。第16周末处死动物,观察各组动物肺组织的病理改变,测定小鼠肺组织羟脯氨酸含量、支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IFN-γ因子水平。结果: 单纯吸烟组小鼠表现为肺气肿样病理表型;而吸烟加服PTX组小鼠肺组织表现为肺纤维化样病理表型;假吸烟组和假吸烟加 PTX组动物既无明显肺气肿也无明显肺纤维化。吸烟加服PTX组小鼠肺纤维化评分和肺组织羟脯氨酸含量明显高于其它实验组。单纯吸烟组与吸烟加服PTX组小鼠BALF中Th2细胞因子IL-4与Th1细胞因子 IFN-γ比值分别为20.3±25.5和70.7±59.9,表明PTX导致吸烟性炎症向Th2极化转化。 结论：PTX长期干预可导致慢性吸烟性肺纤维化形成,Th1/Th2炎症极化趋势的变化可能是导致这种变化的重要机制。     

社区获得性肺炎住院患者血清除降钙素原与肺炎严重程度和预后的关系

目的 考察血清降钙素原水平与社区获得性肺炎(CAP)住院患者严重程度和预后的关系.方法 回顾性分析住院患者数据库中,2009年7月～2010年7月收治的CAP患者的临床资料.结果 324例CAP住院患者中,212例(182例普通CAP、22例重症肺炎和14例死亡病例)纳入本研究.212例患者入院时平均血降钙素原为(...     

利用细胞外基质大规模扩增临床级人脂肪间充质干细胞

背景：如何运用无血清培养体系大规模扩增处于未分化状态的脂肪间充质干细胞,并使其保持“干性”是脂肪间充质干细胞临床应用转化中急待解决的难题。目的：建立含细胞外基质的脂肪间充质干细胞体外培养系统,验证其扩增细胞的高效性、有效性及安全性。方法：在无血清培养条件下,将体外分离得到的脂肪间充质干细胞分别接种在包被细胞外基质的培养板和传统二维塑料培养板上。经过体外扩增后,比较2种条件下细胞数量、细胞表面标记物表达、细胞衰老状况以及体外多向分化能力（诱导成脂、成骨和成软骨）的差异,考察脂肪间充质干细胞在含细胞外基质的培养条件下扩增后的临床安全性。结果与结论：脂肪间充质干细胞扩增到第5代时,包被细胞外基质培养板的细胞产量已经是传统二维塑料培养板的10倍以上,流式细胞检测表明,在含细胞外基质条件下扩增的脂肪间充质干细胞仍保持了干细胞表面特定标记物的表达。细胞衰老检测结果显示,使用包被细胞外基质的培养板扩增脂肪间充质干细胞至第15代时,细胞仍几乎无老化现象,而使用二维塑料培养板扩增的细胞在第5代时已出现明显老化,传代后细胞增殖能力明显下降。体外多向诱导分化实验显示,脂肪间充质干细胞在含细胞外基质条件下扩增至第15代时仍具有成脂、成骨和成软骨的分化功能,并且与第5代时没有明显差异,同时显著优于传统培养条件下的第5代脂肪间充质干细胞。染色体核型分析及小鼠成瘤性试验结果表明,脂肪间充质干细胞在含细胞外基质条件下扩增后仍具备临床应用的安全性。以上结果证实,含细胞外基质的无血清培养系统可以更高效且安全地扩增出具有临床应用潜能的脂肪间充质干细胞。