小鼠乳腺癌TM40D细胞株移植模型建立及其C-erbB-2的测定

目的　建立乳腺癌TM 4 0D细胞BALB/c小鼠移植模型 ,并检查其癌基因C erbB 2状况。方法　采用来源于BALB/c小鼠的乳腺癌TM4 0D细胞接种于BALB/c小鼠胸壁第 5～ 6肋间皮下 ,细胞数为 1× 10 6/只 ,观察成瘤情况。切除肿块作病理、C erbB 2免疫组织化学检查。结果　接种后 14d在接种部位可见肿块 ,直径 3～ 5mm ,肿瘤移植成功率为 93 33% (2 8/30 )。病理检查为乳腺癌 ,免疫组织化学C erbB 2阳性。结论　该方法建立的小鼠乳腺癌移植模型成瘤率高 ,为乳腺癌研究、尤其是以C erbB 2为靶的乳腺癌研究建立了一个很有价值的模型     

中华墨汁作为乳腺癌前哨淋巴结活检示踪剂的实验研究

目的：探讨中华墨汁作为前哨淋巴结活检(sentinel lynaph node biopsy，SLNB)示踪剂的可行性及其价值。方法：42只雌性大耳白家兔随机分为7组，每组6只，观察第1站及第2站腋淋巴结染色时间、染色枚数及褪色时间。前哨淋巴结(sentinel lymph node，SLN)于墨汁着色后5min、1h和2周各切取标本行病理组织学检查，实验动物在实验前及实验后2周处死前采血行常规及生化检查。处死后取心、肺、肝、肾行病理学检查。结果：在染料到达SLN及第2站淋巴结的时间上，不同浓度墨汁间差异无统计学意义，P值分别为0．527和0．060；但与1．0％异硫蓝(isosulfan blue，IB)比较均有明显延长，P=0．000。在检出SLN数目上。各组间差异无统计学意义，P=0．981。0．1％墨汁染色的淋巴结颜色较浅．示踪效果较差。1．0％IB染色的SLN平均33、9min明显褪色．而圣汁各组观察至实验后2周仍明显黑染。染色后5min，SLN镜捡见染色碳颗粒主要沉积于淋巴窦中。1h后逐渐被巨噬细胞吞噬。浓度10．0％以下组织学观察效果良好，10．0％以上则因碳颗粒过多而影响了观察。血液检查各项指标及主要脏器病理学检查均未见异常。结论：1．0％～10．0％中华墨汁SLN染色效果好，特异性较高。且不影响病理组织学观察，使用安全。是一种具有潜在临床价值的新型SLNB染料示踪剂。     

超声引导经皮微波固化治疗乳腺癌

目的 探讨利用微波固化治疗乳腺癌的可行性.方法 12例经活检证实为浸润性乳腺癌(T1期5例,T2期7例)患者,在超声引导下行微波固化治疗,随后行乳癌改良根治术,观察肿瘤固化灭活的范围、周围组织的反应、是否发生相关并发症.结果 肿瘤直径1.2～4.5cm,利用微波固化治疗的平均时间为12 min,固化功率40 W.11例患者微波固化后肿瘤完全灭活;因穿刺位置偏离中轴线而致肿瘤边缘残留l例,皮肤灼伤1例.所有患者行乳癌改良根治术后均恢复良好,无相关并发症发生.结论 利用微波固化治疗乳腺癌对肿瘤直径＜5 cm、肿瘤边缘距离皮肤＞1 cm者可以达到安伞有效灭活.     

淋巴结阴性乳腺癌骨髓微小转移联合检测的临床研究

目的:探讨腋窝淋巴结病理阴性乳腺癌(axillary lymph nodes negative breast cancer,ALNNBC)采用免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)和RT-PCR方法同时检测骨髓微小转移的临床意义.方法:乳腺癌患者全身麻醉后行骨髓穿刺采集骨髓血,然后行乳腺癌改良根治术.经常规HE染色证实腋窝淋巴结阴性的乳腺癌患者62例,同时采用ICC和RT-PCR方法检测骨髓微小转移.结果:62例患者中,15例(24.20%)骨髓有KT19 mRNA表达,其中9例(14.52%)ICC法也检出KT19阳性细胞,表明在检测骨髓微小转移方面RT-PCR法灵敏度较ICC法更高,两者差异有统计学意义(x2=4.1667,P=0.0412),两者结果有较好的一致性(kappa=0.6945).结论:即使常规病理切片检查淋巴结阴性的乳腺癌患者,用ICC法和RT-PCR法对其骨髓血作进一步检测还可发现微小转移的存在,且RT-PCR法比ICC更敏感.     

活体兔肌肉组织微波固化后病理学变化的实验研究

目的:观察冷循环微波固化活体兔棘突旁肌肉组织病理改变过程,以探讨该技术用于治疗体表肿瘤及其他实体瘤的可行性。方法:28只新西兰白兔经超声引导下冷循环微波固化棘突旁肌肉后,分别于术后1、7、30和120d处死后取固化组织行病理组织学检查,并分别于实验前及实验后1周采静脉血行血常规及生化检查。结果:1d后固化组织仅表现为轻微的细胞形态改变;7d后细胞形态学改变显著,固化组织周边慢性炎症明显,巨噬细胞、淋巴细胞浸润;30d后固化组织慢性炎症更加显著,周边纤维组织增生,肉芽肿形成,并向固化中心浸润、发展;120d后固化区纤维增生显著,炎症细胞消失,固化坏死肌细胞逐步消失。实验动物微波固化前后血常规及肝、肾功能等指标检查均未见异常。结论:冷循环微波克服了以往微波治疗的“拖尾”现象,固化肌肉组织逐渐被纤维、脂肪组织取代,且固化灶以外组织无明显病理形态改变,血液学检查未见异常,为微波临床治疗提供了理论依据。     

乳晕外缘环形切口在乳腺良性疾病中的应用

目的:探讨一种治疗乳腺良性疾病的美容切口的应用效果。方法:回顾性分析乳晕外缘环形切口治疗乳腺良性疾病102例的应用情况,术后效果等。结果:共治疗乳房肿块45例、乳头溢液55例、男性乳房发育2例,手术效果满意,瘢痕不明显,无并发症。结论:乳晕外缘环形切口应用于乳腺良性疾病手术是可行的,能取得治疗及美容双重效果。     

中华墨汁作为前哨淋巴结活检新型示踪剂的实验研究

目的探讨中华墨汁作为前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy,SLNB)示踪剂的价值。方法 42只雌性大耳自家兔随机分为7组,解剖第二对乳腺及同侧腋窝,从第二对乳头基底部注射1％异硫蓝(isosulfan blue,IB) 及配置消毒好的0.1％、1％、10％、20％、50％及原墨各0.1ml,观察淋巴链中腋淋巴结染色的时间、染色枚数及褪色时间。染色的第一枚淋巴结为前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)。SLN于墨汁着色后5min、1h和两周各切取标本行病理组织学检查,实验动物在实验前及实验后两周处死前采血行常规及生化检查,处死后取心、肺、肝和肾做病理学检查。结果在染料到达SLN及下一站淋巴结的时间上,不同浓度墨汁间无明显差异(P＞0.05),但与1％IB比较均有明显延长(P＜ 0.05)。在检出SLN数目上,各组间无明显差异(P＞0.05)。在染色的程度上,0.1％墨汁染色的淋巴结颜色较浅,示踪效果较差。在褪色的时间上,1％IB染色的SLN平均33.9min明显褪色,而墨汁各组观察至实验后2周仍明显黑染。病理学动态观察淋巴结的染色过程,染色5min,SLN镜检见染色碳颗粒主要沉积于淋巴窦中,1h后逐渐被巨噬细胞吞噬。浓度在10％以下组织学观察效果良好,10％以上则因碳颗粒过多而影响了观察。实验动物生化检查各项指标及主要脏器病理学检查均未见异常。结论浓度为1％～10％中华墨汁SLN染色效果好,特异性较高,且不影响病理组织学观察,使用安全。1％～10％中华墨汁是一种具有潜在临床价值的新型SLNB染料示踪剂。     

指压攒竹穴治疗呃逆268例

1994～2003年笔者用指压攒竹穴的方法治疗呃逆268例，疗效较好，现报道如下。     

慢病毒转染绿色荧光蛋白对乳腺癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群的影响

背景：研究发现通过流式分选的SP肿瘤干细胞具有干细胞功能，提示可用于检测表面标志未知的肿瘤干细胞。 目的：观察慢病毒转染绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）对乳腺癌细胞系MCF-7中SP肿瘤干细胞生物学特性及亚群分布的影响。 设计、时间及地点：细胞学基因检测水平体外观察，于2007-06/2008-07在南京医科大学第一附属医院普外科实验室完成。 材料：MCF-7细胞株由上海细胞生物学研究所馈赠，GFP-MCF-7细胞株由江苏省人民医院普外实验室保存。 方法：取MCF-7与GFP-MCF-7细胞株，加入含10%小牛血清的高糖DMEM培养液，在37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度恒温箱中培养，生长至80%~90%融合时消化传代，取处于对数生长期的两种细胞进行实验。 主要观察指标：利用流式细胞技术检测转染前后细胞中SP肿瘤干细胞的比例，运用Percoll不连续密度梯度法分离转染前后富集SP肿瘤干细胞的亚群，平板克隆实验测定各亚群的克隆形成率，观察比较转染前后细胞生长曲线、骨桥蛋白的表达水平。 结果：MCF-7与GFP-MCF-7细胞中SP肿瘤干细胞比例分别为2.79%和2.73%，转染前后差异无显著性意义（t=2.184，P > 0.05）。经Percoll分选，MCF-7与GFP-MCF-7细胞均分为5层，其中GFP-MCF-7第4亚群中明显富集SP肿瘤干细胞，且克隆形成率最高（t=3.415，P < 0.01）。转染前后细胞生长曲线无明显变化，且骨桥蛋白的表达水平基本相似（t=2.562，P > 0.05）。 结论：慢病毒转染绿色荧光蛋白对MCF-7中的SP肿瘤干细胞比例、亚群分布、细胞生物学特性无明显影响，且Percoll不连续密度梯度法富集效果显著。GFP-MCF-7细胞株可用于乳腺癌肿瘤干细胞转移动物模型的构建等实验。