凝胶染色扫描法快速定量冬虫夏草中蛋白质方法的初步研究

目的：建立一种冬虫夏草蛋白质含量快速测定方法,弥补Bradford法不足,为研究过程中快速准确定量蛋白质奠定基础。方法本研究用牛血清蛋白（bovine serum albumin,BSA）作为已知浓度的定量标准,用它来计算其它带的量。根据Quantity One来降低图像噪音和背景强度,并确定泳道,定义带并建立光密度与已知浓度的定量标准蛋白线性关系,通过每个带的光密度定量计算凝胶上每个带的质量。结果本实验所建立的凝胶染色扫描法能够较为快速、简便、准确地测定冬虫夏草蛋白含量。结论凝胶染色扫描法用于蛋白质定量,准确度、精密度、重复性均符合要求,为测定方法的进一步完善奠定了基础。     

冬虫夏草资源管理法规探讨

通过对国内冬虫夏草资源管理现状的分析,尤其是对各地冬虫夏草管理法规现状的分析,总结出现行法规的优势与不足,为我国冬虫夏草管理法规的修订奠定了基础。结合草场生态保护,冬虫夏草生长特点,提出了冬虫夏草的可持续采集方案,以更好地实现冬虫夏草资源的可持续利用,实现草场与冬虫夏草协调可持续发展。     

基于差异蛋白质鉴别僵蚕及其新型伪品

目的通过总蛋白含量、可溶性蛋白含量差异以及应用SDS-PAGE蛋白质电泳寻找差异蛋白质来鉴别僵蚕与伪品黑死蚕、空心僵蚕。方法采用SDS-PAGE法对僵蚕真品与伪品差异蛋白条带进行鉴别。结果发现僵蚕总蛋白含量不低于60.00%,可溶性蛋白含量不低于4.29%,伪品远低于上述指标,可作为僵蚕质量评价的检查项指标,辅助鉴别僵蚕与其伪品;僵蚕特有差异蛋白质(SP)的有无和含量差异,可有效鉴别上述两种新型伪品。结论本研究初步建立基于差异蛋白质的僵蚕真伪鉴别新方法,为下一步完善僵蚕质量标准,以及僵蚕的质量控制提供科学的依据。     

冬虫夏草可溶性蛋白质多样性与产地关联度初探

采用bradford法,以双向电泳技术对不同产地、不同初加工方式的冬虫夏草中可溶性蛋白质的含量、种类进行分析,发现冬虫夏草不同加工方法后可溶性蛋白差异明显.不同产地冬虫夏草中可溶性蛋白质多样性差异也较为明显.初步表明可溶性蛋白质含量、多样性指标与冬虫夏草加工方式、产地有一定的相关性.     

双向电泳技术筛选鉴定冬虫夏草中指标性蛋白质研究

对名贵中药材冬虫夏草及其伪品建立稳定可靠的双向电泳鉴定方法。正品冬虫夏草中共同表达的蛋白质斑点为88个,伪品稳定差异表达的蛋白质斑点为21个,提示可作为下一步冬虫夏草鉴定的指标性组分。进一步质谱分析与NCBI数据库比对表明:6种蛋白仅来自于菌数据库,9种蛋白仅来自于昆虫数据库,12种蛋白仅来自于全库,3种蛋白昆虫和菌的数据库均能检索,1种蛋白仅来自于菌数据库和全库,提示下一步可进行冬虫夏草指标性蛋白质功能研究,为冬虫夏草有效成分研究奠定基础。