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目的克隆人端粒相关蛋白T-STAR并研究其与端粒酶催化亚单位hTERT在哺乳细胞内的相互作用。方法构建表达载体pGBKT7-hTERT,以pGBKT7-hTERT为诱饵,采用酵母双杂交技术进行cDNA文库筛选;构建pVP16-T-STAR和pMhTERT重组载体,脂质体法将其与报告质粒共转染入胃腺癌细胞株SGC-7901,以pM-53 pVP16-T、pM3-VP16为阳性对照,以pM53 pVP16-CP为阴性对照;以pM-hTERT pVP16、pM pVP16-T-STAR、pM pVP16为交叉阴性对照。ELISA法检测报告基因CAT的表达。结果成功构建真核表达载体pGBKT7-hTERT,将获得的阳性克隆测序,并进行同源性比较证实为是已收录的人cDNA序列T-STAR。pGBKT7-hTERT和pVP16-T-STAR共转染之后,报告基因CAT的表达(A值为0.258)显著高于阴性对照(A值为0.002~0.015)。结论T-STAR与hTERT在胃癌细胞内发生了相互作用,T-STAR可能是人端粒相关蛋白新成员,通过hTER参与端粒酶活性的调控。 相似文献
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目的:探讨多层螺旋CT在评估食管出血危险性中的应用价值。方法选择肝硬化后食管静脉曲张患者50例,均行多层螺旋CT和胃镜检查,并以胃镜检查结果为标准评价多层螺旋CT在评估食管出血危险性中的应用价值。结果 CT血管成像评分与胃镜静脉曲张程度、胃镜红色征的严重程度均呈显著的正相关(r=0.762、0.687,均P<0.01),CT血管成像评分诊断胃镜红色征的RC 3的敏感性为76.92%,特异性为92.50%。结论多层螺旋CT与胃镜检查结果对食管静脉曲张严重程度的分级呈显著相关性,可以用来预测食管出血的危险性。 相似文献
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近年来,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病率呈逐年升高趋势.2007年1月~2008年10月,我们采用多稀磷酯酰胆碱联合复方甘草酸单胺治疗NAFLD患者30例,取得良好疗效.现报告如下. 相似文献
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目的探讨重组组织型纤溶酶原激活剂(recombinant tissue-type plasminogen activator,rt-PA)静脉溶栓对老年急性脑梗死合并心肌梗死病人预后的影响。方法选择2015年2月至2017年12月我院接诊的48例老年急性脑梗死合并心肌梗死病人为研究对象,均采用rt-PA静脉溶栓治疗,分别于治疗前、治疗后7 d、治疗后3个月采用改良RANKIN量表(Modified Rankin Scale,mRS)、美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NIHSS)、Fugl-Meyer运动功能评定法(Fugl-Meyer Assessment,FMA)观察评价病人治疗前后残障水平、神经功能缺损情况及运动功能;同时记录冠脉再通情况、并发症及心血管事件的发生情况。结果 48例病人中死亡10例,存活38例。存活病人治疗3个月后,mRS评分和NIHSS评分均明显低于治疗后7 d和治疗前(P0. 05);而FMA评分明显高于治疗后7 d和治疗前(P0. 05)。治疗3个月后,存活病人冠脉血管再通率为89. 47%(34/38);并发症发生率为21. 05%(8/38),心血管事件发生率为10. 53%(4/38)。结论对老年急性脑梗死合并心肌梗死病人采用rt-PA静脉溶栓治疗能有效减轻病人神经功能缺损程度和残障水平,提高运动功能,且冠脉血管再通率较高,但易出现症状性脑出血等并发症和心血管事件,临床应加以重视。 相似文献
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端粒酶与肿瘤的发生有十分密切的联系,研究与人端粒酶逆转录酶(hTERT)相互作用的端粒相关蛋白将有助于了解端粒酶在肿瘤细胞中的生物学特性和分子机制。目的:筛选新的人端粒相关蛋白,为进一步了解端粒酶的全酶结构、生物学特性及其作用机制奠定实验基础。方法:采用酵母双杂交技术进行人端粒相关蛋白分子的筛选。构建诱饵融合蛋白表达载体pGBKT7-hTERT,筛选人睾丸cDNA文库;以蛋白质印迹法测定pGBKT7-hTERT融合蛋白的表达。对筛选得到的阳性克隆质粒进行测序,在GenBank中行同源性比较。采用逆转录聚合酶链反应(RT.PCR)检测hTERT、HKR3、SMARCBl mRNA在胃癌细胞株SGC.7901中的表达。结果:融合蛋白表达载体pGBKT7-hTERT可在酵母菌株AHl09中有效、稳定地表达。cDNA文库筛选获得GenBank已收录的人cDNA序列HKR3和SMARCBl。hTERT、HKR3、SMARCBl mRNA在胃癌细胞株SGC-7901中表达一致,均呈高表达。结论:HKR3、SMARCBl是人端粒相关蛋白成员.与hTERT有十分密切的联系,可能在胃癌的发生过程中存在相互调节或协同作用。 相似文献