氧自由基与成人呼吸窘迫综合征

成人呼吸窘迫综合征(ARDS)是多器官衰竭在肺部的主要表现。氧自由基是ARDS发生发展的重要因素。本文就ARDS病人氧自由基的产生、引起肺部的损害、体内的拮抗以及抗氧自由基治疗等几方面作一综述     

美国卫生保健财政署批准研究相对价值费用

美国卫生保健财政局(HCFA)已同意以相对价值尺度(RVS)为基础对医生付费的研究地六个研究部门向HCFA申请进行此项研究,HCFA批准了需时30个月,索价最高的、美国医学会支持的哈佛研究所的申请,此项研究费需230万美元。 HCFA正考虑根据历史上的有关费用,RVS的资料、数据,制定统一的医生费用表。以代替现在盛行     

树突状细胞负载肝癌抗原肽疫苗体外诱导特异性免疫学反应的研究

目的：研究树突状细胞(dendritic cell，DC)负载肝癌抗原肽EPVTKAEML体外诱导特异性CTL的能力及其抑癌效果。方法：用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR—SSP)选择HLA—B7表型供者，从脾组织中分离、培养DC-EPVTKAEML特异性CTL。用^51Cr释放法检测CTL的杀伤活性，并用抗HLA-1分子单抗(mAb)进行杀伤抑制实验。结果：找到4例HLA-B7杂合子供者，用DC负载HLA-B7限制的抗原肽EPVTKAEML可诱导特异性CTL反应，对肝癌细胞HHCC有较强的杀伤作用。结论：DC负载抗原肽EPVTKAEML在体外可诱发较强的特异性免疫反应。     

肝癌特异性超抗原SEA(D227A)基因表达载体的构建与表达

目的：构建受AFP顺式作用元件调控的超抗原表达载体，将SEA(D227A)特异性的表达于AFP阳性肝癌细胞膜表面。方法：PCR扩增AFP基因启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)。将上述片断插入逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点，构建AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原表达载体(pLXSN SEA(D227A)—linker—CD80tm)。通过脂质体介导，以表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系，用RT—PCR和间接免疫荧光染色，检测SEA的表达。结果：成功地将AFP基因的启动子、增强子、linker—CD80tm和SEA(D227A)克隆到逆转录病毒载体pLXSN的多克隆位点，酶切鉴定和DNA序列分析无误，RT—PCR和间接免疫荧光法检测证实，SEA(D227A)能在AFP阳性的肝癌细胞膜特异性表达。结论：AFP顺式作用元件修饰的超抗原表达载体的构建，为下一步用其强化肝癌的免疫治疗奠定了基础。     

兔抗MAGE-n血清的制备、纯化及鉴定

目的: 制备高效价、特异性的兔抗人MAGE-n血清。方法: 对原核表达的MAGE-n蛋白进行纯化, 与弗氏佐剂混合免疫新西兰兔制备抗血清, 用硫酸铵盐析法及溴化氰活化的Sephrose4B(CNBr-ActivatedSephrose4B)亲和层析柱纯化抗血清, 以双向免疫扩散实验、ELISA、Westernblot和免疫组化对兔抗人MAGE-n血清进行鉴定。结果: 经免疫得到高效价的兔抗人MAGE-n血清, 抗血清能够与MAGE-n特异性结合, 免疫组化结果表明MAGE-n是一种胞质蛋白。结论: 用MAGE-n蛋白与弗氏佐剂混合免疫兔, 制备得到高效价的抗血清, 纯化后的特异性兔抗人MAGE-n血清, 为进一步研究MAGE-n在各种组织中的表达奠定了基础。     

VEGF真核表达载体的构建及在内皮与心肌细胞内的表达

目的：探讨外源性人VEGF165基因在内皮细胞与心肌细胞内表达的可行性。方法：构建了(vaseular endothelium growth factor,VEGF)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)基因其表达载体pIRES2—FGFP—VEGF165，以脂质体法转染内皮细胞和心肌细胞，采用荧光显做镜检测内皮细胞与心肌细胞中EGFP的表达，同时利用免疫组织化学方法检测VEGF的表达。结果：成功地构建了真核表达载体pIRES2—EGFP—hVEGF165，采用脂质体法转染内皮细胞与心肌细胞后，经荧光显微镜观察，可见细胞内有EGFP的表达，同时经免疫组化证实有VEGF的表达。结论：采用脂质体法可以成功地将外源性VEGF165基因转染到内皮细胞与心肌细胞中，并进行表达。本研究为今后利用VEGF基因治疗心肌缺血等疾病提供了实验基础。     

氟碳部分液体通气对吸入性损伤犬的呼吸道组织病理学影响

目的：观察氟碳部分液体通气在治疗吸入性损伤中,呼吸道组织病理的变化,探讨氟碳部分液体通气治疗吸入性损伤的机理。方法：采用蒸汽吸入造成急性呼吸道损伤,观察氟碳部分液通气＋高频通气治疗组与单纯高频通气对照组的气管,支气管,肺的光镜下HE染色的组织形态变化。结果：（1）对照组和治疗组均表现为左侧支气管,肺病变轻于右侧;（2）治疗组病变轻于对照组。结论：吸入性损伤的组织病理学改变以右侧为重,氟碳部分液体通气,可减轻吸入性损伤呼吸道充血水肿,并有明显的抗炎作用,可能为其治疗吸知识性损伤的机理之一。     

液质联用分析肝癌细胞HLA Ⅰ类分子递呈的抗原肽

0 引言HLA-抗原肽是抗原经过抗原递呈细胞(APC)加工后,由HLA分子递呈给T细胞抗原受体(TCR)的短肽. 寻找能够为T细胞所识别的HLA结合肽对于肿瘤免疫学研究及肿瘤有效防治具有重要的理论意义和应用价值,许多国家都在致力于这一领域的研究. 细胞HLA-抗原肽含量很少,分子量很小,难于纯化和测序,是免疫学研究的一个难点. 我们应用肝癌细胞膜酸洗技术及高效液相色谱与质谱联用技术首次分析和鉴定了一条为HLA-A2递呈的肝癌抗原肽.     

肝癌细胞实验室大量培养的方法及其质控

目的:探讨以提取肝癌抗原肽为目的的肝癌细胞实验室大量培养方法及其质量控制。方法:先利用普通培养瓶在CO_2孵箱中进行少量培养,再接种到10L转瓶进行旋转培养;FCM检测MHC-Ⅰ类抗原表达。结果:细胞数增加1～9倍,不仅保持了MHC-Ⅰ类抗原的表达量,而且,培养细胞质量高、好。结论:建立了用于制备肝癌抗原肽的肝癌细胞实验室大量培养方法。     

IL—6抗化疗药所致血细胞和巨噬细胞功能减低效应的观察

将5-氟脲嘧啶（5－Fu125mg／kg）为化疗组；注入小鼠后5h后再给IL－6（10000U／0．5ml每日1次）为IL－6组；给生理盐水为阴性对照组。第1、3、5、7天后，阴性对照组血白细胞、血小板数值无明显变化，化疗组则呈明显下降趋势，应用IL－6后在第3天以后白细胞下降趋势略小于化疗组，血小板下降明显小于化疗组。化疗组巨噬细胞吞噬率（％）和指数明显下降，应用IL－6后则升高，并发现脾组织红髓中大量巨噬细胞增生，白髓中大量淋巴细胞及母细胞聚集。说明IL－6可促进受抑制造血和免疫机能恢复。