SB239063,新一代p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂在缺氧缺糖所致SHSY5Y细胞损伤中的作用

目的 探讨SB239063,新一代p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂在缺氧缺糖(OGD)所致SHSY5Y细胞损伤中的作用.方法 体外培养SHSY5Y神经母细胞瘤株,以OGD、SB239063(10μmol/L)处理,以MTT检测SHSY5Y细胞活性,以Western blot方法检测p38MAPK活性,应用HEt和fluo-3/AM的荧光强度测定OGD后SHSY5Y细胞超氧化物阴离子和钙离子的浓度.结果 SB239063能提高OGD后SHSY5Y细胞的活性(P<0.01),降低OGD后p38MAPK活性(P<0.05),HEt(P<0.05)和fluo-3/AM荧光强度(P<0.01).结论 SB239063通过抑制p38MAPK的激活,降低细胞内超氧阴离子的浓度,进而抑制细胞内钙超载,从而达到保护SHSY5Y细胞对抗OGD的细胞损害的作用.

Abstract：

Objective To investigate the neuroprotective effect of SB239063,the new p38 mitogen—activated protein kinase (MAPK) inhibitor on SHSY5Y neuronal cells against oxygen-glucose deprivation(OGD),and the mechanisms of the neuroprotective effect.Methods SHSY5Y neuroblastoma cells were exposed to OGD with or without SB239063 (10μmol/L),cell viability was measured by the MTF assay,activity of p38MAPK was measured by western blot,intracellular concentration of superoxide anion and calcium were evaluated via the fluorescence intensity of Het and fluo-3/AM. Resuits Compared with the OGD group.The MTT value was elevated significantly in the SB239063 group(P<0.01),the activitv of p38MAPK decreased significantly in the SB239063 group(P<0.01),the fluorescence intensity of Het(P<0.05)and fluo-3/AM(P<0.01)decreased significantly in the SB239063 group.Conclusion SB239063 protects SHSY5Y neuronal cells against OGD by inhibiting the activity of p38MAPK,then reducing the intracellular concentration of superoxide anion and calcium.     

丝裂原活化蛋白激酶家族在Swedish 突变的淀粉样前体蛋白 转基因鼠脑缺血中的作用

 【目的】 探讨丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPK)在Swedish 突变的淀粉样前体蛋白(APP/SWE)转基因鼠脑缺血中的作用&#65377;【方法】 APP/SWE 转基因鼠与非转基因鼠各12 只应用光化学法诱导脑梗塞形成,缺血7 d后其中6只以尼氏染色对缺血半暗带区存活神经元进行定量分析,6只以Western blot方法检测p38MAPK和JNK的活性&#65377; 【结果】 缺血7 d后, 非转基因鼠组缺血半球海马区缺血半暗带存活神经元数目与非缺血半球镜像部位神经元数目的比值(78.3 ± 1.3)%与APP/SWE转基因鼠组(70.5 ± 1.4)%有统计学差异(P < 0.05);APP/SWE转基因鼠组缺血半球p38MAPK和JNK活性与非缺血半球有统计学差异(P < 0.05),而非转基因鼠组缺血半球p38MAPK和JNK活性与非缺血半球差异无统计学意义(P > 0.05)&#65377;【结论】 APP/SWE转基因鼠组缺血后脑损伤显著重于非转基因鼠组,可能的机制与丝裂原活化蛋白激酶过度激活促进脑缺血后细胞凋亡过程有关&#65377;     

中国人视神经脊髓炎临床与病理学特征

目的：研究中国人视神经脊髓炎（DNMO）临床与病理学特征。方法：回顾7例中国DNMO患者的临床与病理学资料,分析中国与高加索DNMO患者临床特点,比较中国DNMO患者与多发性硬化症（MS）患者临床与病理学的不同点。结果：7例中国DNMO患者均以急性视力损害为首发症状,病程从3天到9年,2例患者复发。7例患者尸检均可见脱髓鞘改变,5例患者可见坏死性改变和格子细胞,1例患者可见胶原增生性损害,6例患者可见血管周围炎症细胞浸润。比较中国与高加索DNMO患者,发现：发病年龄,首发症状,视神经炎与脊髓炎的间隔时间没有显著差异,7例中国DNMO患者中3例是女性,8例高加索DNMO患者全部为女性。与中国MS患者相比,中国DNMO患者复发少,坏死性改变,格子细胞和血管周围炎症细胞浸润发生率高,胶原增生性损害发生率低。结论：中国与高加索DNMO患者临床特点没有显著差异,在临床与病理学方面中国DNMO患者与MS患者有较大不同。     

大鼠局灶脑缺血中心区与边缘区VEGF表达及mRNA变化

目的 探讨VEGF、VEGFmRNA在局灶脑缺血中心区和边缘区的表达和动态变化。方法 SD大鼠54只。根据缺血时间和再灌时间分为9组，采用线栓并环扎的方法建立局灶脑缺血再灌模型。LSAB法免疫组化染色观察VEGF免疫阳性表达。RT—PCR法检测VEGFmRNA动态变化。结果 在缺血3～6h，缺血中心区与边缘区VEGF免疫阳性反应达高峰，VEGFmRNA转录水平明显升高，两者24h基本降至正常水平。结论 VEGF在缺血早期的高表达可能与神经细胞和内皮细胞的自身保护作用有关。     

不同途径导入rAAV-VEGF165基因对大鼠脑缺血边缘区血管内皮细胞生长因子表达的影响

背景VEGF基因可促进脑缺血边缘区的血管生长,哪种导入途径的表达效果更理想值得探讨.目的探讨脑池内及静脉导入rAAV-VEGF165基因对大鼠脑缺血边缘区血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)表达的影响,为VEGF基因治疗脑缺血提供实验依据.设计析因设计.地点和对象实验地点深圳市人民医院动物实验中心;暨南大学医学院病理教研室.健康雄性SD大鼠48只,SPF级.干预措施用线栓加环扎法建立SD大鼠持续性大脑中动脉闭塞(middlecerebral artery occlusion,MCAO)模型.SD大鼠48只,随机分为脑脊液导入组、静脉导入组、梗死组和假手术组,治疗组于术后24 h内将rAAV-VEGF165基因通过小脑延髓池或静脉内导入.各组分别取6只大鼠于术后7 d和14 d断头取脑,免疫组织化学染色检测VEGF的表达.主要观察指标各组大鼠不同时间脑组织VEGF阳性细胞密度.结果最终进入统计分析的大鼠保持为4组,每组12只,无缺失值.各组脑缺血边缘区VEGF阳性细胞密度(个/高倍视野,×400)分别为7 d组脑脊液导人组74.90±2.33、静脉导人组36.27±2.61、梗死组24.27±1.69和假手术组5.65±0.47(P＜0.05);14 d组脑脊液导入组95.03±1.55、静脉导人组69.17±4.29、单纯梗死组29.95±1.05和假手术组7.30±0.76(P＜0.05).结论在rAAV为载体介导下,VEGF165基因可以通过脑池内及静脉内导人转染到大鼠缺血脑组织中并表达VEGF,促进新生血管的形成,保护神经细胞,治疗脑缺血.     

不同途径导入rAAV-VEGF165基因对大鼠缺血性脑保护的比较研究

目的 比较不同途径(直接注射、脑脊液及静脉内)导入重组腺相关病毒介导的血管内皮细胞生长因子基因(recombinant adeno-associated virus mediated vascular endothelial growth factor165 gene,rAAV-VEGF165)治疗大鼠局灶性脑缺血的疗效,寻找出适合临床、安全、有效的基因导入方法.方法 用线栓加环扎法建立SD大鼠大脑中动脉持续性闭塞(MCAO)模型.30只雄性SD大鼠随机分为直接注射组、脑脊液导入组、静脉导入组、MCAO组和假手术组,其中治疗组于术后24 h内将rAAV-VEGF165基因从大鼠脑缺血边缘区、小脑延髓池或股静脉内注入.术后14 d取脑,免疫组织化学染色检测脑缺血边缘区VEGF的表达和微血管的密度、HE染色观察脑组织坏死情况、4% TTC染色检测脑梗死体积.结果 与单纯梗死组和假手术组相比较,治疗组脑缺血边缘区VEGF表达水平明显升高、微血管密度显著增高(P＜0.01),脑组织坏死情况明显减轻,脑梗死体积明显缩小(P＜0.05);其中以前2个指标在直接注射和脑脊液导入组比静脉导入组更为显著(P＜0.05).结论 直接注射和脑脊液导入比静脉内导入rAAV-VEGF165基因转染到大鼠缺血脑组织的效果更优,而且通过脑脊液导入可能是较为合适有效的途径.     

蛛网膜下腔出血脑脊液置换治疗后的随访研究

目的：了解蛛网膜下腔出血（SAH）患者经脑脊液置换治疗后的远期预后情况。方法：对21例初发SAH并经脑脊液置换治疗的患者及17例对照组患者进行随机调查，比较两组的远期预后关系，结果：经脑脊液置换治疗组的继发必癫痫及脑积水的发生率，比未经脑脊液置换治疗组明显降低（P＜0．05）。而头痛，再发SAH，痴呆的发生率与对照组比较无显著差别（P＞0．05）。结论：SAH早期脑脊液置治疗可降低继发性癫痫及脑积水的发生率。     

中老年多发性肌炎(附6例临床分析)

目的　探讨中老年多发性肌炎的临床特点。方法　分析 6例中老年多发性肌炎的临床资料 ,并结合文献分析其临床和病理特点 ,治疗进展及预后。结果　 6例均有肌无力和肌萎缩 ,部分伴有运动及感觉神经损害及其它系统损害。全部病例肌酶均明显升高 ,肌电图以肌源性损害为主 ,病理有肌纤维的变性、坏死、横纹消失及淋巴细胞浸润。结论　中老年多发性肌炎是一组以肌无力及肌萎缩为主要表现的自身免疫性疾病 ,本病的诊断应结合临床资料、肌酶和肌电图检查 ,有条件应行肌肉活检进行确诊 ,并进行全面检查 ,寻找可能存在的恶性疾病。激素治疗应早期、全程、足量 ,减量应缓慢 ,总疗程 1～ 2年。激素无效可试用免疫抑制剂。中药对提高疗效有辅助作用。预后可能与发病年龄、治疗时机、及合并症有关。     

深圳市社区人群各亚型脑卒中的常见危险因素分析

目的分析深圳市社区人群各亚型脑卒中发生的常见危险因素,为卒中防治提供理论依据。方法2003-2005年对深圳市全市所有自然社区人群的脑卒中新发病例进行登记监测,采用分组、分类比较方法对其进行亚型分析,探讨发生卒中的常见危险因素,并进行双因素方差分析和χ2检验。结果2003-2005年间深圳市社区人群脑卒中新发病例共15474例,其中脑梗死为10396例（占67.2%）,脑出血为4297例（占27.8%）,蛛网膜下腔出血为632例（占4%）。结论中年人特别是50岁以下人群应重视出血性卒中的危害,50岁以上的人群的预防重点应放在缺血性卒中,严密关注控制高血压、糖尿病、心脏病等危险因素。