不同超声参数及转染方式对细胞活力和红色荧光蛋白基因传输的影响

目的 探讨不同超声参数和转染方式对细胞活力和红色荧光蛋白(RFP)基因传输的影响.方法 以两种不同的转染方案培养人宫颈癌细胞(Hela):(A)培养24 h以完全黏附培养板;(S)细胞悬液.对培养的细胞进行超声辐照(强度为1.0 W/cm2;占空比10%、20%、50%;辐照1 min或3 min),比较这两种转染方案和不同超声参数对细胞活力及RFP表达效率的影响.运用最优参数对其他4种不同类型的细胞(HepG2、lshikawa、MCF-7和B16-F10)行超声处理.结果 A组细胞活力随着占空比的增加、辐照时间的延长而逐步降低,超声辐照导致贴壁的细胞从培养板脱离.与A组相比,S组经相同超声参数转染的细胞数目明显增加,但存活率无明显下降.悬浮方式的转染方案,20%占空比,辐照3 min,是获得较高基因转染效率[(28.04±2.27)%]和存活率[(81.20±1.73)%]的最优选择.当培养细胞暴露于最优条件时,不同类型的细胞对超声的反应性不同.与非辐照组相比,辐照组转染率和死亡率均有不同程度的增加.结论 不同超声参数和转染方式对细胞活力和基因传输效率有较大的影响,对超声介导微泡增强的基因传输需要深人地进行优化研究,以提高转染效率.     

超声介导微泡携带激肽原酶靶向治疗技术对实验性急性脑梗死后神经再生及血管新生的影响

目的 探讨超声介导微泡携带激肽原酶靶向治疗技术对大鼠急性脑梗死后神经再生及血管新生的影响.方法 线栓法建立局灶性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,按随机数字表法分为超声介导激肽原酶微泡组、超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、激肽原酶对照组、生理盐水对照组,每组24只.机械振荡法制备激肽原酶载药微泡.MCAO术后24h所有大鼠按不同组别予以尾静脉给药,每天1次,连续给药2d或6d.超声组在尾静脉给药的同时,予以超声辐照缺血侧颅骨10 min.分别在第3天和第7天行神经功能评分,并处死大鼠,测量脑梗死体积,观察侧脑室室管膜下区(SVZ)双皮质素的表达变化和梗死灶周围血管密度层黏连蛋白表达的变化.结果 术后7d超声介导激肽原酶微泡组、超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、激肽原酶对照组、生理盐水对照组SVZ区在每20倍目镜视野下双皮质素阳性细胞数分别为251.8 ±13.1、125.7±11.6、130.2±13.7、234.5±12.4和123.7±10.0,梗死灶周围区在每10倍目镜视野下层黏连蛋白免疫阳性百分比分别为10.0％±0.8％、5.2％±0.7％、5.0％±1.0％、8.0％±1.8％和5.0％±0.9％.其中,超声介导激肽原酶微泡组和激肽原酶组梗死侧SVZ区双皮质素阳性细胞数和梗死灶周围层黏连蛋白免疫阳性百分比均明显高于同时点超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、生理盐水对照组(双皮质素:超声介导激肽原酶微泡组比超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、生理盐水对照组,t=17.88、17.17、18.16,P＜0.01;激肽原酶组比超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、生理盐水对照组,t=15.42、14.78、15.70,P＜0.01.层黏连蛋白:超声介导激肽原酶微泡组比超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、生理盐水对照组,t=7.01、6.71、7.11,P＜0.01;激肽原酶组比超声介导空白微泡对照组、超声辐照对照组、生理盐水对照组,t=4.23、3.94、4.33,P＜0.01).另外,超声介导激肽原酶微泡组与激肽原酶对照组相比,梗死侧SVZ区双皮质素阳性细胞数(t=2.46,P＜0.05)及梗死灶周围层黏连蛋白免疫阳性百分比(t =2.78,P＜0.05)均更高,差异有统计学意义.MCAO术后7d上述各组的神经功能评分超声介导激肽原酶微泡组与其他4组相比,差异均有统计学意义.结论 超声介导激肽原酶载药微泡治疗较单用激肽原酶治疗更能促进大鼠MCAO术后的神经再生和血管新生,进一步改善大鼠急性脑梗死后的神经功能,因此,超声介导载药微泡靶向治疗技术有望进一步用于神经系统疾病的治疗.     

超声及超声造影剂介导基因转染和药物传输的研究进展

近年来,超声以一种崭新的治疗方式在医学各领域广泛应用.临床上,超声具有非常安全的频率和强度,可实现体内几乎任何部位的靶向能量输送.超声可增加细胞膜通透性,超声介导基因转移已成功用于体内基因转移,具有安全、靶向、无创的特点.     

超声评价多囊卵巢综合征不孕症患者介入术后卵巢间质血流

目的评价多囊卵巢综合征（PCOS）不孕症患者经阴道超声引导下未成熟卵泡介入术（TUG-IFI）术前、术后卵巢间质血流变化。方法对73例PCOS不孕症患者行TUG-IFI,运用彩色多普勒超声（CDU）检测卵巢间质血流情况,结合相关血清激素水平,分析比较TUG-IFI术前、术后的变化情况和相关性。结果术后血清LH、睾酮和LH/FSH比值明显降低（P〈0.01）,卵巢间质最大收缩期血流速度明显升高（P〈0.01）,搏动指数、阻力指数明显下降（P〈0.01）,搏动指数与LH、睾酮和LH/FSH比值之间存在正相关（P〈0.05）,阻力指数与睾酮和LH/FSH比值之间存在正相关（P〈0.05）。结论CDU可为PCOS不孕症患者TUG-IFI术前、术后卵巢间质血流提供准确、可靠的定量评估指标。     

超声联合PEI增强microRNA转染沉默survivin表达诱导细胞凋亡

细胞凋亡在肿瘤的发生和发展发挥了重要的作用。针对病灶诱导癌细胞凋亡是有吸引力的癌症治疗策略。 Survivin是哺乳动物的凋亡蛋白家族最小的成员,其上调可防止各种恶性肿瘤细胞凋亡。 Survivin的下调节可诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成。 微小RNA（miRNA）介导的RNA干扰可沉默Survivin的表达。然而,仍缺乏无创、组织特异的基因传递技术。同时,miRNA表达载体的利用率也受到基因传输技术的影响,尤其在体内,需要安全、有效的基因转染技术。成功的基因传输方法将产生新的、可行的抗癌治疗方法。超声空化是一种新的基因传递技术,其通过超声破坏微泡效应产生细胞膜上的微孔。结合我们以往的研究基础,我们推断,超声空化和聚乙烯亚胺（PEI）结合可介导miRNA的转染,靶向Survivin的miRNA可诱导细胞凋亡。通过这一非病毒技术的新技术,可导致严重的细胞凋亡,提供了有效和有针对性的基因传递可能是可行的,是一种新颖、可行的基因治疗方法。     

脑缺血疾患颈动脉彩色多普勒超声检查

目的 :探讨二维彩色多普勒超声及彩色血管三维超声在颈动脉疾病的诊断价值。材料方法 :疑为缺血性脑卒中患者 80例 ,行颈动脉彩色多普勒超声检查 ,其中 2 8例同时做彩色血管三维超声成像 ,5 5例经临床、CT、MRI证实为脑梗死。结果 :①本组 5 5例脑梗死 ,彩色多普勒超声发现 4 9例颈动脉粥样硬化斑。②有脑梗死的彩色血管三维血流图呈“串珠”状 ,而非脑梗死的彩色血管三维血流图呈连续“圆锥”状。结论 :彩色多普勒超声诊断颈动脉粥样硬化有良好的价值 ,三维彩超是二维彩色多普勒超声的有益补充。     

彩色多普勒超声在皮下软组织海绵状血管瘤中的诊断价值

目的 :探讨彩色多普勒超声在皮下软组织海绵状血管瘤中的诊断价值。方法 :16例海绵状血管瘤先用高频二维超声观察肿块大小、形态、内部回声 ,再用彩色多普勒观察周边及内部血流 ,最后再用加压法观察上述内容。结果 :16例海绵状血管瘤表现为 12例内部血流呈静脉频谱 ,4例呈动脉频谱 ,但流速较慢。5例周边见迂曲血管 ,4例为静脉 ,1例为动脉。上述方法使海绵状血管瘤易于与软组织肿块相鉴别。结论 :彩色多普勒超声为海绵状血管瘤的诊断提供了一个方便、有效方法 ,有重要的临床价值。     

低度酒蒸馏方程的推导

根据蒸馏酒理论采用微积分方法，以酒精质量分数与相对密度的对照表以及蒸馏时原酒液质量分数与蒸馏液质量分数对照表两组基础数据为依据，推导了原酒液酒度随蒸馏体积分数变化的关系方程式，进一步推导了以低度酒为原料进行蒸馏的蒸馏液酒度随蒸馏液体积变化的方程式，该方程可用于蒸馏过程酒度控制。     

早期异位妊娠子宫内膜阴道超声下形态及其与病理类型的相关性

目的:运用阴道超声(TVS)观察早期异位妊娠患者的子宫内膜形态,探讨阴道超声下的子宫内膜形态与其病理类型的关系。方法:回顾性分析55例早期异位妊娠患者TVS下的子宫内膜厚度、形态类型、对称性等,并与42例宫内早早孕相对照,其中31例早期EP患者行诊刮术。比较TVS下内膜"三线征"与早期EP病理类型的关系。结果:①EP组子宫内膜厚度比宫内早孕薄(P<0.01),70.9%的EP患者内膜厚度≤9mm,89.1%呈对称增厚,69.1%呈A型内膜("三线状"改变),与宫内早孕组相比差异均有显著性意义(P<0.01)。②子宫内膜病理结果为蜕膜样组织、蜕膜组织和A-S反应、晚期增殖期的病例出现A型内膜的比例较高,但它们之间没有相关性。结论:阴道超声下子宫内膜形态可以作为鉴别诊断早期EP的有价值指标之一,对预测、鉴别早期EP有一定意义。