乳腺癌癌基因及相关蛋白与预后的关系

随着人们对乳腺癌认识的深人和诊断、治疗技术的成熟，乳腺癌的存活率逐渐升高，患的生存质量明显改善，但术后局部复发和远处转移的问题仍悬而未决，影响着乳腺癌的预后。近年来，国内外对乳腺癌预后影响因素的研究已从临床病理学及辅助治疗转向分子生物学，本复习了近年来国内外献，着重从乳腺癌癌组织中癌基因及相关蛋白表达角度分析影响乳腺癌预后的相关因素。[第一段]     

肝细胞核因子6在小鼠肝内胆管发育过程中的表达

目的 探讨肝细胞核因子6(HNF6)在肝内胆管发育过程中的作用. 方法 用RT-PCR及免疫组织化学等方法 检测HNF6在小鼠胚胎发育的各个阶段以及成年肝中的表达. 结果 RT-PCR结果 显示,HNF6 mRNA的表达在E9d开始出现,与肝芽形成的时间吻合,E13d HNF6 mRNA的表达消失,E15d又重新出现,并一直维持到出生.免疫组织化学显示,CK19免疫反应在E13d开始出现,此时免疫反应阳性细胞在肝索内散在分布.E15d时在近肝门处的门管区丌始出现由单层的、CK19阳性细胞组成的胆管板,之后,阳性细胞反应主要分布于胆管板和小叶间胆管.E9～11d,多数肝索细胞呈HNF6阳性反应,E13d的肝索中未观察剑HNF6的表达.E15～17d,HNF6阳性反应的分布与CK19相似,成年小鼠肝的胆管上皮细胞仍呈HNF6阳性反应. 结论 HNF6可能与肝干细胞的特化关系不大,而与肝发育的启动、肝干细胞向胆管上皮细胞的分化及其分化状态的维持有关.     

下颌牙窝的应用解剖

目的　为临床牙种植和下颌骨外伤的处理提供形态学基础。方法　对 30例成人下颌牙窝外壁厚度、牙窝间隔厚度、牙窝深度、牙窝上口的径线进行了观察和测量。结果　在所有下颌牙窝中 ,中切牙窝最浅 ,其左侧为 8.96± 1.79m m,右侧为8.6 7± 2 .46 mm;尖牙窝最深 ,左侧为 14 .38± 2 .5 8m m,右侧为 13.74± 2 .18m m。下颌牙窝外壁上缘薄 ,下缘厚 ,且外壁可有缺损 ,缺损出现率为 6 .46 % .结论　熟悉下颌牙窝的结构特点对牙种植和下颌骨外伤的处理具有重要的临床意义。     

医学硕士研究生培养模式的探讨

为提高硕士研究生培养的质量,在加强思想政治教育的同时,要注意培养研究生的团队协作意识、开拓精神和创新能力;在研究生学位课题的设计、实施等过程中,进行有效的指导和监督。     

大鼠胚胎肝干细胞标记物的筛选

目的筛选大鼠胚胎肝脏组织特异性表达的mRNA,寻找肝干细胞的特异性标记物。方法取成年大鼠肝脏2个、2周胚龄大鼠胚胎肝脏2个作为标本。提取标本的RNA,反转录合成cDNA,再体外转录合成cRNA,同时进行标记。将cRNA纯化后进行杂交、洗涤、染色,对芯片进行扫描。将基因芯片数据进行处理与分析,筛选出目的基因。免疫组化方法检测各相关蛋白在胚胎肝脏组织中的表达。结果筛选出787个在大鼠胚胎肝脏组织中高表达的差异表达基因,涉及8个类别。免疫组化检测发现,高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在2周胚龄多数胚肝胎细胞中表达阳性,阳性信号多分布于细胞质。结论大鼠胚胎肝脏组织发育相关的差异表达基因筛选可采用基因芯片,HMGA1是大鼠胚胎肝干细胞特异性标记物。     

筛动脉眶内段及窦内段的应用解剖研究

目的：研究筛动脉的走行规律及局部位置关系,为筛窦手术和视神经管减压术提供参考。方法：采用显微解剖学技术对６０ 侧成人筛动脉眶内段和窦内段进行观察和测量。结果：筛前动脉眶内段长（５．１６±１．２４）ｍ ｍ ,管径为（０．５６±０．１７）ｍ ｍ ;筛后动脉眶内段长（９．０８±２．２９）ｍ ｍ ,管径为（０．３７±０．１４）ｍ ｍ 。筛动脉的周围有致密结缔组织构成的筋膜鞘,该鞘包绕与之并行的筛神经和筛静脉,筋膜鞘在筛动脉窦内段亦存在。筛动脉窦内行程有三种类型：走在骨管内;走在筛房顶壁和筛粘膜之间;部分走在骨管内。结论：在筛窦手术或视神经管减压术中,正确寻找和处理筛动脉有重要意义     

基础医学硕士研究生培养模式的探索

基础医学研究生招生规模不断扩大,随之产生的矛盾日渐明显,本文分析了现阶段我国研究生培养模式,剖析了其中存在的问题,并对其提出了几点看法。     

叶绿素显示液在妇科恶性肿瘤淋巴清扫术中的应用

目的探讨叶绿素在妇科恶性肿瘤淋巴清扫术中的应用价值。方法将１４支狗的睾丸或子宫角处注射叶绿素溶液，注射后２，４，６，８，１２，２４，４８，７２，１２０ｈ后分别取其腰淋巴结作光、电镜观察，并按相同时间取股静脉血作叶绿素测定。对２３例宫颈癌患者，术前随机分为宫颈注射叶绿素组１３例和对照组１０例。术中观察记录盆腔淋巴结的染色摘除情况，并取淋巴结作组织切片，显微镜观察。结果叶绿素注射４ｈ后，其在血液中的浓度最高为３６０．６５μｇ／ｍｌ，２４ｈ后，血液测不到叶绿素。狗腰淋巴结平均显色时间为８ｍｉｎ，显色可持需１２０ｈ以上。宫颈癌病人淋巴结染色组，盆腔淋巴结平均摘除３１．３８个，对照组２２．５个（Ｐ＜０．０１）；染色组所用时间为５７ｍｉｎ，对照组为７４ｍｉｎ。结论宫颈注射叶绿素显示盆腔淋巴结，可提高淋巴结清除率并能缩短手术时间     

第3～5周人胚肝的细胞特征和生长因子及其受体表达

背景：早期肝的发育与横隔间充质和原始心脏的发育在时间和空间上存在密切关系，来自原始心脏和横隔间充质的信号分子可诱导前肠内胚层细胞向肝细胞的特化，横隔间充质为肝芽的形成提供了一个适宜的环境，并可促进其生长和分化。但这一诱导过程的分子机制尚不清楚。 目的：利用发育第3～5周人胚标本，选择甲胎蛋白、细胞角蛋白19、c—Met作为肝干细胞的标记物，观察早期人胚胎的发育及肝干细胞的形态特征，以明确肝干细胞的特征和影响其增殖、分化的因素，为肝干细胞的基础研究和临床应用提供实验依据。 设计：开放性实验。 单位：潍坊医学院人体解剖学教研室。 材料：实验于2004-09／2005-01在成都医学院科研中心完成。选择2个月内流产的新鲜人胚胎标本20例，20min内用40g/L多聚甲醛固定，常规石蜡包埋、连续切片，苏木精-伊红染色，显微镜下观察，参照Jirasek的人胚发育分期标准，根据胚胎的长度、体节的数目及器官发育状况确定胚龄。 方法：选择胚龄第3-5周的标本，SABC法进行免疫组织化学染色。多克隆抗肝细胞生长因子、c—Met、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体、转化生长因子β1、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2抗体，单克隆抗增殖细胞核抗原、甲胎蛋白和细胞角蛋白19抗体，4℃孵育过夜，羊抗兔或羊抗鼠ⅠgG及SABC液室温下分别孵育2h，二氨基联苯胺显色。以磷酸盐缓冲液代替-抗作阴性对照。光学显微镜下观察、拍照。 主要观察指标：第3～5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色，肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在第3-5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达。 结果：①第3-5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色观察：第3周末肝芽形成，第4周肝芽的细胞伸人横隔间充质内形成肝索，构成肝索的细胞具有与第3周末相同的形态特点。第5周时这些细胞数量明显增加，细胞体积有所增大，胞核嗜碱性稍减弱，胞质的嗜酸性增强，但细胞的形态仍均匀一致。第3～4周时肝索的细胞呈增殖细胞核抗原的反应阴性，5周时开始出现阳性反应，主要分布在细胞核，少数细胞的胞质为弱阳性。第3～5周时多数肝索细胞都为甲胎蛋白和c—Met阳性，甲胎蛋白阳性细胞的免疫反应沉淀物在胞核、胞质及细胞膜中均存在；c—Met阳性反应主要分布于细胞核，胞质亦可见较弱的阳性反应。而这些细胞为细胞角蛋白19阴性。②肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体在第3—5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达：发育第4周组成肝索的细胞表达c—Met，而不表达其他的因子或受体。第5周时，除了肝细胞生长因子以外的其他因子均在肝索细胞表达。转化生长因子β1及其受体转化生长因子β受体l、转化生长因子β受体2的免疫反应沉淀物主要存在于细胞质和细胞膜，胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体的阳性反应在细胞核、细胞质以及细细胞膜均可见。第3-5周时，肝芽或肝索周围的心肌细胞和间充质细胞呈肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子Ⅰ免疫反应阳性，阳性信号主要聚集在细胞质，少数胞核亦有阳性。 结论：①人胚胎发育的第3周末，前肠腹侧的部分内胚层细胞特化为肝干细胞。②发育第3-5周人胚肝的细胞为未分化的肝干细胞，若拟研究人胚肝干细胞，此时取材、并利用肝干细胞特异性的标记物，可得到具有双向分化潜能的肝干细胞。对于鼠胚肝于细胞的研究，也可利用人、鼠胚龄的对应关系，推算出其肝干细胞存在的时间、从而决定取材的时间点。③肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β1等生长因子促进早期人胚肝的发育。     

血管内皮生长因子及其受体和angiopoietin及其受体在人胚胎造血过程中的作用

背量：血管内皮生长因子家族及其受体在血管生成和新血管形成过程中具有重要作用。近来，有关血管内皮生长因子家族对血液发生的作用受到广泛关注。 目的：观察血管内皮生长因子A、血管内皮生长因子C及其受体和alI．giopoietin-1（ang-1）、angiopoietin-2（ang-2）及其受体在发育第3-12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的表达，以了解血管内皮生长因子和angiopoietin家族在血液发生过程中的作用。 设计：单一样本观察。 单位：潍坊医学院，形态实验中心和解剖学教研室。 对象：实验于2002-02／2004-08在潍坊医学院进行，收集流产的47例孕妇的受糟龄第3-12周人胚胎标本，孕妇知情同意。 方法：标本连续切片，每隔10张抽出2张切片，分别做苏木精一伊红染色和免疫组织化学染色。多克隆抗血管内皮生长因子C，fms样酪氨酸激酶，flt-4，ang-1，ang-2，Tie-2抗体以及单克隆抗血管内皮生长因子A，胎肝激酶l抗体4℃孵育过夜，羊抗鼠IgG及SABC液室温下分别孵育2h，DAB显色。分别以正常兔或鼠血清代替一抗作阴性对照。光学显微镜下观察、拍照。 主要观察指标：①血管内皮生长因子A和血管内皮生长因子C及其受体在发育第3-12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的时空表达。②ang-1和ang-2及其受体在发育第3-12周人胚胎卵黄囊血岛、主动脉-生殖腺-中肾区的时空表达。结果：①第21-25天人胚卵黄囊血岛血管内皮细胞和造血细胞强表达血管内皮生长因子A及其受体fms样酪氨酸激酶和胎肝激酶l、血管内皮生长因子C及其受体胎肝激酶4、ang-2及其受体Tie-2蛋白，弱表达ang-1蛋白。②背主动脉和中肾于发育第4周开始表达上述各种因子及其受体，免疫阳性反应物集中在大而圆、有核的造血细胞。阳性细胞的数量到第7周到达高峰。8周以后，阳性细胞数量显著减少，到12周，几乎所有的血细胞为免疫阴性反应。③生殖腺主要在第6-8周表达血管内皮生长因子A，fms样酪氨酸激酶，flt-4，ang-1,ang-2和Tie-2蛋白，但不表达血管内皮生长因子C和胎肝激酶l。④主动脉一生殖腺一中肾区的血管内皮细胞未检测到上述各因子的表达。 结论：人胚卵黄囊血岛造血细胞和内皮细胞以及背主动脉和中肾共表达多种与血管发生和血液发生相关的因子。人胚内造血发生于第4周。