三七皂甙诱导骨髓基质细胞分化为心肌样细胞的实验研究

目的探讨三七皂甙对体外定向诱导猪骨髓基质细胞(MSCs)分化为心肌样细胞的影响。方法用穿刺方法抽取猪骨髓,分离并培养骨髓基质细胞,中药三七皂甙定向诱导分化为心肌样细胞。倒置显微镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法鉴定心肌细胞特异性抗原标志物肌钙蛋白T,用RT-PCR对心肌肌球蛋白重链(β-MHC)进行鉴定。取培养的猪心肌细胞作为阳性对照,未经三七皂甙诱导正常培养的骨髓基质细胞作为阴性对照。结果猪MSCs经三七皂甙诱导2h后,大部分MSCs可分化为心肌样细胞,免疫细胞化学检测细胞中的肌钙蛋白T呈阳性,RT-PCR显示能表达β-MHC。结论MSCs是骨髓来源的具有多向分化潜能的干细胞,在三七皂甙的定向诱导下,可以向心肌样细胞分化,有望成为心衰及心肌梗死等心肌损伤时干细胞移植治疗的理想细胞材料。     

辽宁省部分地区男性骨质疏松危险因素的病例对照研究

目的 探讨辽宁省男性骨质疏松患病的危险因素.方法 采用病例对照研究方法,收集在辽宁省6所医院就诊的132例男性骨质疏松患者(病例)和同期进行健康体检的138例非骨质疏松男性(对照)的临床资料.采用统一调查表调查研究对象的人口学特征、生活饮食习惯、既往患病情况及长期用药情况等,对以上研究因素进行单因素及多因素非条件Logistic回归分析.结果 多因素非条件Logistic回归分析结果表明,老龄(OR =40.121)、吸烟(OR=21.870)、饮茶(OR=8.767)、喝碳酸饮料(OR =853.921)是男性骨质疏松患病的危险因素;而口服钙片(OR =0.011)、体育锻炼(OR=0.034)是保护因素.结论 男性骨质疏松的发生与年龄、饮食习惯、体育锻炼等多因素共同作用有关,应采取针对性的综合干预措施来控制和预防该病的发生发展.     

系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞生长特性与相关细胞因子的表达

背景：骨髓造血依赖于干细胞所处的造血微环境，其中基质细胞及多种细胞因子在造血中发挥着重要的调控作用。系统性红斑狼疮具有淋巴细胞亚群及相关细胞因子表达，其基质细胞及细胞因子的异常可能导致造血微环境异常，损伤造血功能。 目的：观察体外培养系统性红斑狼疮基质细胞的生长特性及细胞因子白细胞介素6、白细胞介素8的表达，探讨细胞因子与系统性红斑狼疮活动的关系，阐明系统性红斑狼疮慢性病贫血可能的病理机制。 设计、时间及地点：细胞学体外培养，病例-对照观察，于2008-01/12在大连医科大学附属第二医院血液风湿科及血液学实验室完成。 对象：选择大连医科大学附属第二医院血液风湿科收治的活动期系统性红斑狼疮患者15例(实验组)，男1例，女14例，中位年龄32(20~55)岁；合并慢性病贫血者7例，无贫血者8例。另选健康个体10名作为对照，男9名，女1名，中位年龄46(38~57)岁。 方法：取系统性红斑狼疮患者及健康对照者的骨髓液分离单个核细胞培养。 主要观察指标：系统性红斑狼疮患者及健康对照者骨髓基质细胞生长特性及体外培养上清白细胞介素6和白细胞介素8的水平。 结果：系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞较健康对照生长及集落形成均延后，合并慢性病贫血的系统性红斑狼疮患者更加明显，集落内各细胞排列欠规整有序。与健康对照者相比，系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞体外培养上清细胞因子白细胞介素6、白细胞介素8的表达显著升高(P < 0.01)，并且与系统性红斑狼疮的疾病活动呈正相关。 结论：由于系统性红斑狼疮基质细胞可能存在功能的缺陷，并且高表达细胞因子如白细胞介素6、白细胞介素8，损伤了骨髓微环境，最终导致系统性红斑狼疮患者造血功能异常。细胞因子可能成为系统性红斑狼疮疾病活动的标志。     

“心肌样”微环境中骨髓基质细胞分化为心肌样细胞

[目的]探讨“心肌样”微环境中，骨髓基质细胞（marrow stromal cells，MSCs）是否可以分化为心肌样细胞。[方法]将SD成年大鼠的MSCs分离、培养后用5-BrdU标记，再将标记的MSCs与SD大鼠乳鼠心肌细胞（cardiomyocytes，CM）共培养，在倒置显微镜下观察MSCs形态学变化；用免疫细胞化学法检测MSCs中心肌特异性肌钙蛋白T。[结果]MSCs 3 d后贴壁生长，呈梭形或多角形，细胞核大，细胞增殖迅速，当细胞80％～90％融合时加入CM，共培养3d，MSCs变成长杆状，即呈现较为一致的极性排列。取共培养3周的细胞进行免疫细胞化学染色，见到经5-BrdU标记的部分MSCs在荧光显微镜下细胞核显现红色荧光的同时光镜下胞浆中心肌特异性肌钙蛋白T呈阳性。[结论]在“心肌样”微环境中，确实有部分MSCs转化为心肌样细胞。     

类克输注开始时间精确输液滴数调节对发生不良反应患者的影响

目的:观察类克治疗中,精确输注开始时间时输液滴数的调节,对发生不良反应患者的影响。方法:将400例次使用类克治疗的风湿病患者按时间的先后顺序随机分为对照组和观察组,每组各200例。对照组患者采用将头皮针连接输液器中生理盐水作为引液开始输注类克,并计算输注开始时间及输液滴数;观察组患者采用头皮针连接注射器建立静脉通路后直接连接类克稀释液,并计算输注开始时间及输液滴数。比较两组患者的不良反应发生率。结果:观察组患者的不良反应发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论:精确类克输注开始时间的滴数调节可有效降低不良反应发生率。     

CD34^＋造血干细胞在“心肌样”微环境中转化为心肌样细胞的可能性

目的：一般认为CD34^＋细胞只能向血细胞分化，观察CD34^＋造血干细胞在“心肌样”微环境中转化为心肌样细胞的可能性。方法：实验于2004-01／12在大连医科大学附属第二医院实验中心完成。①选用成年健康SD大鼠30只及出生l-3dSD大鼠乳鼠。在体外分离、培养CD34^＋造血干细胞，并将CD34^＋造血干细胞与分离出的新生乳鼠心肌细胞共培养。②将新生乳鼠心肌细胞的培养环境模拟为在体心肌细胞的生活环境即心肌样微环境。③在细胞培养瓶内加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记CD34^＋细胞。在倒置显微镜下观察CD34^＋造血干细胞形态学变化，用免疫细胞化学法检测心肌特异性肌钙蛋白T。结果：①CD34^＋造血干细胞与心肌细胞共培养3d，CD34^＋细胞变成长杆状，即呈现较为一致的极性排列，靠近心肌细胞的CD34’细胞形态学改变更早、更明显。②共培养的细胞经免疫细胞化学染色，发现部分5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记的CD34^＋细胞核在荧光显微镜下呈现红色，同时其细胞浆心肌特异性肌钙蛋白T表现阳性，说明确实有部分CD34^＋造血干细胞转化成幼稚心肌细胞。结论：将CD34^＋造血干细胞与心肌细胞共培养，CD34^＋造血干细胞可以分化为心肌样细胞，从而验证了体外“心肌样”微环境可以促使CD34^＋造血干细胞向心肌样细胞转化的潜能。     

阿托伐他汀对AngⅡ诱导大鼠心肌肥大的抑制作用及对TLR4基因表达的影响

目的： 探讨阿托伐他汀(atorvastatin)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠心肌细胞（CM）肥大的抑制作用及对TLR4基因表达的影响，旨在探索他汀类药物对心肌肥大抑制作用的可能机制。方法: 采用胰酶消化、差速贴壁法培养新生SD大鼠CM，应用考马斯亮蓝法测定CM蛋白含量、RT-PCR分别检测心肌肌球蛋白重链β-MHC、AT₁受体和TLR4 mRNA表达。结果: ① AngⅡ可使CM蛋白含量及β-MHC mRNA表达明显增加，并能够上调AT₁ mRNA和TLR4 mRNA表达。② Ator呈浓度依赖性抑制由AngⅡ诱导的CM蛋白含量及β-MHC mRNA表达的增加。③ Ator呈浓度依赖性下调由AngⅡ诱导的肥大CM AT₁ mRNA和TLR4 mRNA表达。结论: 阿托伐他汀可部分抑制CM肥大的发生，下调AT₁ mRNA和TLR4 mRNA表达是其作用机制之一。     

系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞生长特性与相关细胞因子的表达

背景:骨髓造血依赖于干细胞所处的造血微环境,其中基质细胞及多种细胞因子在造血中发挥着重要的调控作用.系统性红斑狼疮具有淋巴细胞亚群及相关细胞因子表达,其基质细胞及细胞因子的异常可能导致造血微环境异常,损伤造血功能.目的:观察体外培养系统性红斑狼疮基质细胞的生长特性及细胞因子白细胞介素6、白细胞介素8的表达,探讨细胞因子与系统性红斑狼疮活动的关系,阐明系统性红斑狼疮慢性病贫血可能的病理机制.设计、时间及地点:细胞学体外培养,病例一对照观察,于2008-01/12在大连医科大学附属第二医院血液风湿科及血液学实验室完成.对象:选择大连医科大学附属第二医院血液风湿科收治的活动期系统性红斑狼疮患者15例(实验组),男1例,女14例,中位年龄32(20～55)岁;合并慢性病贫血者7例,无贫血者8例.另选健康个体10名作为对照,男9名,女1名,中位年龄46(38～57)岁.方法:取系统性红斑狼疮患者及健康对照者的骨髓液分离单个核细胞培养.主要观察指标:系统性红斑狼疮患者及健康对照者骨髓基质细胞生长特性及体外培养上清白细胞介素6和白细胞介素8的水平.结果:系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞较健康对照生长及集落形成均延后,合并慢性病贫血的系统性红斑狼疮患者更加明显,集落内各细胞排列欠规整有序.与健康对照者相比,系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞体外培养上清细胞因子白细胞介素6、白细胞介素8的表达显著升高(P<0.01),并且与系统性红斑狼疮的疾病活动呈正相关.结论:由于系统性红斑狼疮基质细胞可能存在功能的缺陷,并且高表达细胞因子如白细胞介素6、白细胞介素8,损伤了骨髓微环境,最终导致系统性红斑狼疮患者造血功能异常.细胞因子可能成为系统性红斑狼疮疾病活动的标志.     

M2a巨噬细胞在过敏性哮喘发病机制中的研究进展

巨噬细胞极化在过敏性哮喘发病中起重要作用。巨噬细胞被IL-4和IL-13激活后成为替代活化型巨噬细胞(AAM)或M2细胞,其中M2a巨噬细胞在哮喘中的作用备受关注。阐明M2a细胞特异性蛋白在哮喘发病机制中的作用,有助于理解IL-4诱导的巨噬细胞在过敏性哮喘中的作用。本文对不同人M2a巨噬细胞标志物(包括表面标志物、酶、趋化因子和细胞因子)在过敏性哮喘发病机制中的作用进行综述。AAM在哮喘发病中既有保护性也有致病性作用,是过敏性哮喘的双刃剑。