实验大鼠侵袭性肺曲霉病早期诊断的研究

目的 建立高效液相色谱技术（HPLC）检测（1-3）-β-D-葡聚糖的方法，并与巢式聚合酶链反应（PCR）方法进行比较，评价其在实验大鼠侵袭性肺曲霉病（IPA）早期诊断中的意义。方法 将烟曲霉孢子注入实验大鼠左肺以制作IPA模型；采集各组实验大鼠血样及脏器标本，进行巢式PCR、HPLC及培养方法的检测。结果 HPLC检测（1-3）-β-D-葡聚糖最低检测限度为1～2pg／ml，临界值为15pg／ml。模型组检测值和阳性率均较对照组高，差异有统计学意义（P〈0．01）；随感染时间延长检测值和阳性率逐渐上升，各组差异有统计学意义（P〈0．01）；感染死亡大鼠血液标本的检测值与死亡时间呈负相关关系，其相关系数r为-0．949（P〈0．01）。1周内HPLC方法敏感度（77．8％）和特异度（91．7％）均较巢式PCR高，但差异无统计学意义（P〉0．05），两者敏感度均高于血培养，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HPLC检测大鼠血中（1-3）-β-D-葡聚糖浓度，在早期预测大鼠肺曲霉感染的发生、发展及预后判断方面明显优于传统的血培养，也要优于巢式PCR方法。     

HLA-DRB1等位基因与广东汉族人群甲真菌病的相关性研究

 目的:探讨人类白细胞抗原HLA DRB1等位基因与广东汉族人群甲真菌病的关联性。方法：纳入64例广东汉族甲真菌病患者(包括10例红色毛癣菌甲癣患者)以及64例健康对照者，采用聚合酶链式反应-序列特异性引物（PCR-SSP）技术，对研究对象全血基因DNA进行HLA DRB等位基因分型，比较等位基因频率，分析甲真菌病与HLA基因多态性的关系。结果：甲真菌病患者HLA-DRB1*10基因频率高于健康对照组（ X²=5.10,P<0.05）。红色毛癣菌感染的甲癣患者组HLA DRB1*12基因频率低于健康对照组（  X²=4.70,P<0.05）。结论：HLA-DRB1*10等位基因可能是广东汉族人群甲真菌病遗传易感基因，而HLA-DRB1*12等位基因可能是红色毛癣菌感染的甲真菌病患者的保护性基因，HLA基因多态性与甲真菌病的发生可能存在遗传免疫关联性。     

马尔尼菲青霉基因功能研究工具载体pSilent-GFP的构建

目的 建立一种基于载体pSilent-1介导的对马尔尼菲青霉基因进行功能研究的工具。方法 将绿色荧光蛋白（GFP）基因整合于丝状真菌表达质粒pSilent-1中,构建pSilent-GFP载体,将构建成功的pSilent-GFP载体通过电转化方法转化马尔尼菲青霉酵母细胞,经潮霉素阳性筛选及PCR方法鉴定阳性克隆子,并在荧光显微镜下观察GFP在马尔尼菲青霉中的表达。结果 成功构建了pSilent-GFP表达载体,该载体能转化马尔尼菲青霉酵母细胞并在菌体内稳定表达GFP。结论 pSilent-GFP载体在马尔尼菲青霉中稳定表达GFP,pSilent-1载体可应用于马尔尼菲青霉基因的功能研究。     

胫前型营养不良型大疱性表皮松解症并发甲损害1例

1病历摘要 患儿女,11岁.因双下肢和手足背反复出现红斑、水疱、糜烂,伴瘙痒10年,于2007年5月7日就诊于广东省中医院皮肤科门诊.患儿于1岁左右时双小腿胫前、足背因碰撞或搔抓后出现水疱、血疱,疱易破,破溃后形成糜烂面,愈合缓慢,愈后遗留瘢痕,部分指(趾)甲变形.     

马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及TNF-α分泌的影响

目的 研究马尔尼菲青霉对巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4、Dectin-1的表达及促炎因子TNF-α分泌的影响.方法 马尔尼菲青霉酵母相菌液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养24 h,采用流式细胞技术检测巨噬细胞TLR-2、TLR-4及Dectin-1的平均荧光强度;共聚焦显微镜观察荧光染色的受体;ELISA法测定培养液上清中TNF-α的浓度;Real time PCR检测不同时间段TNF-α的mRNA表达.结果 马尔尼菲青霉可使巨噬细胞TLR-2、TLR-4、Dectin-1的平均荧光强度均增高,并激活巨噬细胞产生TNF-α.结论 马尔尼菲青霉上调了巨噬细胞模式识别受体TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达,巨噬细胞的激活与TLR-2、TLR-4及Dectin-1的表达上调相关.     

复方甘草酸苷治疗寻常性银屑病疗效观察

目的观察复方甘草酸苷治疗银屑病的临床疗效。方法对63例寻常性进行期银屑病患者随机分为治疗组36例,对照组27例,对照组给予综合药物治疗4周;治疗组在对照组的基础上,同时静滴复方甘草酸苷20 m l,1次/d,共4周。观察两组患者临床疗效及不良反应。结果治疗组治愈率5 0%,有效率为6 9.4 4%。对照组分别为11.11%和40.74%。治愈率及有效率差异均具有显著性(P均<0.01)。两组均未见明显不良反应。结论在常规综合治疗基础上加用复方甘草酸苷,可显著提高治愈率,且无明显副作用。     

念珠菌在母婴间垂直传播的流行病学研究

目的：探讨产妇念珠菌感染与其新生儿口腔念珠菌的带菌情况，了解母婴间的垂直传播。方法：对554例某妇婴医院产科经阴道分娩的产妇分娩前的阴道后穹隆分泌物，及其刚出生断脐后新生婴儿口腔分泌物进行真菌分离培养。并采用常规科玛嘉念珠菌显色培养基、玉米粉培养基、海藻糖试验、API20C生化鉴定板等进行菌种鉴定。同时对产妇的一般情况进行调查。结果：554例产妇中132例培养出真菌，分离率最高的职业是主妇，占50．76％．而第1胎检出率最高，占92．42％：产前感染率百分比最高的是农民和干部，分别占33．33％和30．00％。分离出的132株真菌中，白念珠菌78株(占分离菌的首位)，其次为光滑念珠菌21株；而554例新生儿口腔真菌培养共分离出11株真菌，白念珠菌8株，光滑念珠菌2株，克柔念珠菌1株．阳性率为1．99％。母婴间同时分离出相同念珠菌共11对，为白念珠菌8对，光滑念珠菌2对，克柔念珠菌1对。结论：妊娠末期妇女阴道念珠菌的感染可垂直传播给新生儿，其垂直传播率约为8．33％。预防母亲产前阴道念珠菌感染可降低新生儿念珠菌感染的可能性。     

地塞米松对F.monophora感染巨噬细胞模式识别受体及炎症因子表达的影响

目的:探讨F.monophora体外感染模型中地塞米松(DEX)对模式识别受体及免疫炎症因子表达的影响。方法:实验分为四组:F.monophora与加入DEX的巨噬细胞共培养组、F.monophora与巨噬细胞共培养组、单纯加入DEX的巨噬细胞组及巨噬细胞空白对照组。定量PCR检测各组中模式识别受体Dectin-1、TLR-2、TLR-4的表达;ELISA法测定培养上清中TNF-α的表达量。结果:F.monophora与巨噬细胞共培养组相对于空白对照组及单纯加入DEX组的Dectin-1表达显著升高,在加入DEX后Dectin-1表达明显受到抑制(t=121 900,P0.05);加入DEX的共培养组中TLR-2表达增加,但与F.monophora和巨噬细胞共培养组相比,差异无统计学意义(t=3 022,P0.05);F.monophora感染引起TLR-4显著下调,加入DEX对TLR-4表达无影响(t=2 021,P0.05)。相对于F.monophora与巨噬细胞共培养组,DEX共培养组中巨噬细胞分泌TNF-α的量显著下调(t=1 514 000,P0.05)。结论:DEX可抑制巨噬细胞Dectin-1的表达,并下调TNF-α的表达量,进而使机体处于免疫耐受状态,但对TLR-2、TLR-4表达无明显影响。     

尿真菌检查对HIV/AIDS患者马尔尼菲青霉病的诊断意义

【目的】 探讨尿真菌镜检与培养对HIV/AIDS患者马尔尼菲青霉病的诊断意义&#65377; 【方法】 分别同时对166例HIV/AIDS患者的尿液进行真菌镜检&#65380;培养,并作血真菌培养,检测尿标本马尔尼菲青霉的阳性率&#65380;灵敏度,并与血液真菌培养进行比较&#65377;【结果】 166例HIV/AIDS患者中,确诊马尔尼菲青霉病患者26例(阳性率15.66%),马尔尼菲青霉血尿检查总阳性24例(14.46%)&#65377;尿镜检阳性3例(1.81%),尿培养阳性14例(8.43%),血培养阳性19例(11.45%)&#65377;尿培养&#65380;血培养及两者联合的灵敏度分别为53.84%&#65380;73.08%和92.31%,特异度均为100%&#65377;血&#65380;尿培养的马尔尼菲青霉阳性率差异无统计学意义,但尿镜检与尿培养,尿镜检与血培养的阳性率之间,以及血培养与尿培养,尿培养与尿镜检之间的关联性存在统计学差异&#65377; 【结论】 尿真菌培养马尔尼菲青霉敏感性较高,方便快捷,是一种较好的HIV/AIDS患者尤其是取血困难者马尔尼菲青霉病的诊断方法,而尿真菌镜检意义不大&#65377;     

地塞米松对巨噬细胞信号转导接头蛋白MyD88的抑制作用

目的研究地塞米松对马尔尼菲青霉固有免疫反应中巨噬细胞信号转导接头蛋白MyD88的作用。方法马尔尼菲青霉酵母相菌液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养,应用地塞米松作用后采用ELISA法测定培养液上清中TNF-α的浓度;Real time PCR及Western blot法检测MyD88的蛋白及基因表达。结果地塞米松抑制被马尔尼菲青霉激活的巨噬细胞产生TNF-α,并抑制巨噬细胞接头蛋白MyD88的蛋白及mRNA的表达。结论地塞米松对马尔尼菲青霉固有免疫反应抑制作用与其对MyD88的抑制相关。