黄芪miRNA的预测及其干旱表达模式分析

目的利用生物信息学手段预测黄芪Astragalus membranaceus的miRNA及其靶基因,应用定量PCR分析其干旱胁迫表达模式,为黄芪miRNA研究奠定基础。方法下载公共核酸数据库中的黄芪高通量测序序列,使用Trinity软件拼接获得转录本数据。利用生物信息学预测方法进行黄芪miRNA及其靶基因的预测,并对靶基因进行功能分类分析。利用茎环引物荧光定量PCR方法验证miRNA的存在,并分析miRNA在干旱胁迫下的表达模式。结果序列拼接获得88 263条黄芪转录组数据。使用这些数据预测到分属于17个家族的17个miRNA序列以及相应的茎环结构前体。这些miRNA靶向的145个基因主要参与基因转录调控、物质代谢、信号转导、胁迫应答和蛋白翻译后修饰等生物学过程。随机选取8个miRNA进行茎环引物荧光定量PCR验证,其干旱逆境表达模式分析表明miR2118和miR166可能参与了黄芪的干旱胁迫应答。结论预测的黄芪miRNA、靶基因以及干旱应答miRNA,为理解miRNA在黄芪中的生物学功能提供了重要数据。     

重症肝病患者医院感染病原菌分布与耐药性研究

目的探讨重症肝病患者发生医院感染时病原菌的临床分布特点及其耐药性分析研究,为临床治疗提供理论参考依据。方法将2009年10月-2013年10月医院收治的480例重症肝病患者作为研究对象,对患者的腹水、尿液、血液以及痰液等分别分离并培养,并对病原菌的临床分布特点及耐药性进行统计分析,采用SPSS14.0软件进行统计处理。结果 480例重症肝病患者发生医院感染118例,感染率为24.5%,共分离出152株病原菌,其中以革兰阴性菌为主,共105株占69.1%,前3位病原菌分别为大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌以及肺炎克雷伯菌,大肠埃希菌对氨苄西林及头孢曲松等的抗菌药物的耐药率较高,分别为76.4%、43.6%,对于亚胺培南以及阿米卡星和头孢哌酮/舒巴坦比较敏感,耐药率分别为0、10.9%、9.1%。结论重症肝病的患者医院感染率较高,大肠埃希菌以及凝固酶阴性葡萄球菌为感染的主要病原菌,并且其耐药性也比较高。     

消癌平对伊马替尼在大鼠体内外代谢的影响

目的探讨消癌平注射液对伊马替尼在大鼠体内外代谢的影响。方法分别在伊马替尼人和大鼠肝微粒体孵育体系中加入2滋l消癌平注射液和消癌平注射液10倍稀释液，孵育结束后终止反应。建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS），检测代谢产物N-去甲基伊马替尼的生成量。将SD大鼠随机分成对照组和给药组（按7.5ml/kg连续10d腹腔注射消癌平注射液），每组8只，消癌平注射液连续给药10d，第10天两组大鼠按30mg/kg灌胃伊马替尼，并于灌胃后0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24h采集血样处理并检测。结果以伊马替尼为底物，消癌平注射液和消癌平注射液10倍稀释液在大鼠肝微粒体中，较对照组分别抑制了90.83%和50.73%；在人肝微粒体中，较对照组分别抑制了79.44%和28.77%。消癌平注射液连续10d腹腔注射后，伊马替尼及其活性代谢产物N-去甲基伊马替尼的相关药代动力学参数发生了改变：相比于空白对照组，血浆伊马替尼达峰时间（Tmax）延后了105.72%，表观分布容积（Vz/F）减少了24.76%；血浆N-去甲基伊马替尼AUC(0-t)减少了21.37%，AUC(0-∞)减少了19.29%，Tmax延后了35.70%，峰浓度（Cmax）减少了20.01%，Vz/F增加了45.38%，清除率（CLz/F）增加了32.44%。结论体内外实验结果提示消癌平注射液能影响伊马替尼的代谢。临床上同时应用消癌平注射液与伊马替尼时，应密切关注患者的临床症状和伊马替尼血药浓度Tmax     

MiR-146a在免疫反应中的调节作用

microRNA是一类非编码的小分子RNA,通过在转录后水平抑制蛋白的表达,在许多生理和病理进程中发挥重要作用。MiR-146a在固有免疫调节、炎症反应以及抗病毒中发挥重要作用。本文就最近对miR-146a在固有免疫、炎症应答、病毒感染和人类疾病等方面的研究进行了综述。研究显示,可能可以通过对miR-146a表达的调控来治疗一些人类疾病。     

固有免疫调控蛋白PKR串联亲和纯化系统的建立及应用

目的 构建固有免疫调控蛋白--双链RNA(dsRNA)调控的蛋白激酶(PKR)的串联亲和纯化系统(TAP),初步研究PKR蛋白功能,以用于与PKR相互作用的新蛋白的鉴定与功能分析.方法 通过PCR扩增PKR目的基因,克隆至真核表达载体pcTAP-A中.将重组质粒pcTAP-PKR通过脂质体法转染PKR稳定沉默(PKRk...     

结核分枝杆菌感染高危人群潜伏结核感染筛查及危险因素分析

目的 调查结核分枝杆菌感染高危人群潜伏结核感染的情况并分析相关危险因素.方法 根据结核菌暴露程度将与结核患者有密切接触史的医务人员及患者家属纳入高危组,无结核患者密切接触史的健康人群纳入低危组,对所有研究对象进行影像学检查,并采用ELISPOT的方法进行γ干扰素释放试验(IGRA)检测.结果 高危组的IG-RA阳性率为24.4％(11/45),高于低危组的4.5％(2/44),差异有统计学意义(x2=5.557,P=0.018).高危组中医务人员的IGRA阳性率为24.1％(7/29),与结核患者家属的25％(4/16)相当,差异无统计学意义.年龄≥30岁(OR=21.250,95％CI=0.005～195.804)和结核菌暴露时间≥3年(OR=6.429,95％ CI=1.201～34.407)为高危人群LTBI的可能危险因素.结论 结核菌感染高危人群的LTBI发生率明显高于低危人群,并且与年龄和暴露时间呈正相关,应加强LTBI的早期筛查;医务人员与结核患者家属的LTBI发生率相当,应建立系统的医务人员结核感染和患病筛查制度,改善防护设施,加强监督管理,尽可能的减少或避免医务人员的职业暴露.     

视频反馈结合模拟教学法在儿童体格检查教学中的应用

系统而精准的体格检查是临床医师获取患者信息的重要来源,是临床实践的基石之一,也是医学生必须掌握的基本技能。医学生主要通过《诊断学》大课学习体格检查理论,并在示教课中相互查体或以患者为对象进行练习以掌握具体操作手法,所学的内容均基于成人体格检查。儿童体格检查的内容及方式与成人相比有较大差异,且不同年龄阶段的儿童亦有不同的体征及相应的查体方法,仅具备《诊断学》知识远不能满足儿科学临床实践要求。     

沉默PeroxiredoxinⅠ基因对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

摘要：目的探讨PeroxiredoxinⅠ（PrxⅠ）沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表
达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为
4组：pGPU6-HK组、pGPU6-PrxⅠ组、pGPU6-HK+照射（ionizing radiation,IR）组、pGPU6-PrxⅠ+IR组。用6 MV X线照
射裸鼠瘤组织,测量肿瘤体积,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;免疫组化检测肿瘤组织中PrxⅠ和Caspase3蛋白表达;电镜观
察肿瘤细胞超微结构,Western blot 测定肿瘤组织中γ-H2AX和Rad51 蛋白表达。结果成功构建了裸鼠移植瘤模型,
pGPU6-PrxⅠ+IR组裸鼠移植瘤生长肿瘤明显迟缓,体积较小,抑瘤率为79.76%,与pGPU6-PrxⅠ（34.92%）和pGPU6-HK+
IR（56.94%）比较差异具有显著性（P<0.05）;给予pGPU6-PrxⅠ及IR处理后,肿瘤细胞凋亡和坏死增多,PrxⅠ和Rad51蛋
白表达减少,而Caspase3和γ-H2AX蛋白表达增加,以pGPU6-PrxⅠ+IR组更为显著,其Rad51蛋白下降了84.8%,γ-H2AX
蛋白表达升高5.6倍(P<0.05)。结论沉默PrxⅠ表达可提高乳腺癌移植瘤的放射敏感性,其作用机制与DNA双链断裂增
加、DNA损伤后修复能力降低有关。PrxⅠ可能是一个理想的乳腺癌放射增敏分子靶点。     

膀胱肿瘤2350例临床病理学特点分析

目的 探讨膀胱肿瘤的发病现状、总体趋势和病理特点.方法 整理1980-2007年2350例膀胱肿瘤病理档案,分为1980-1989、1990-1999和2000-2007年3个时间段.应用SPSS 13.0软件分析3时间段患者性别、年龄及肿瘤组织学类型间的关系.结果 2350例膀胱肿瘤中男1854例,女496例.良性92例,恶性2258例,膀胱恶性肿瘤的发病人数逐年上升.发病高峰年龄从50～69岁推迟到60～79岁.1980-1989、1990-1999和2000-2007年3个时间段中男、女恶性肿瘤病例数分别为524例和113例(4.64:11 00)、589例和164例(3.59:1.00)、675例和193例(3.50:1.00),男性约为女性的3.80倍;3时间段男性发生膀胱尿路上皮癌年龄分别为(57.5±11.7)、(62.6±12.3)、(65.9±11.3)岁,女性分别为(58.7±13.6)、(60.7±12.1)、(65.8±12.0)岁,男女各年龄段分别比较差异有统计学意义(P<0.05).男性发生鳞状细胞癌、尿路上皮癌和腺癌年龄分别为(68.05±9.7)、(59.85±14.1)、(63.4±9.9)岁,差异有统计学意义(P相似文献   

姜炭止血有效部位的实验研究

目的优选姜炭止血作用的有效部位。方法选取健康小鼠,给予姜炭不同极性部位的混悬液,用玻片法测凝血时间,筛选出有效部位,研究有效部位不同剂量对小鼠凝血时间的影响。结果与正常对照组比较,姜炭乙酸乙酯部位和水部位的高剂量组分别缩短小鼠凝血时间30.82%和28.46%,均与阳性对照药三七相当。石油醚和正丁醇部位对小鼠的凝血时间没有影响。结论姜炭乙酸乙酯部位、水部位的高剂量有较好的止血作用,为姜炭止血的有效部位。