脱细胞血管基质与血管平滑肌细胞的体外相容性

目的:酶-化学除垢剂制备脱细胞血管基质,检测其与平滑肌细胞的相容性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性。方法:实验于2003-12/2005-12在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。①脱细胞血管基质制备:在37℃水浴振荡条件下,犬总动脉先后用1g/L胰蛋白酶 0.2g/L乙二胺四乙酸钠和1.0%TritonX-100进行脱细胞处理24h和176h,充分漂洗,冷冻干燥后备用。②平滑肌细胞的提取:应用组织块贴壁法体外培养扩增犬隐静脉的平滑肌细胞。③四甲基偶氮唑盐法测定脱细胞血管基质浸提液对平滑肌细胞的毒性:设浸提原液、75%、50%和25%浸提液组,阴性对照组(DMEM 体积分数为0.1的胎牛血清培养液)。以阴性对照组的吸光度作为100%细胞增殖率,增殖百分率(P%)=犤实验组A值/阴性对照组A值犦×100%,按ISO和医学生物材料标准评定材料毒性。④急性毒性试验:取成年大鼠8只,将备用脱细胞血管基质研磨成粉末,生理盐水配成2g/L的混悬液,无菌条件下向大鼠腹腔内注入1mL脱细胞血管基质混悬液,观察72h,记录动物有无死亡及不良反应。⑤亚急性毒性试验:取成年大鼠12只,随机分成2组。实验组用脱细胞血管基质混悬液灌胃,剂量为500mg/kg质量,隔日1次,共10次;对照组给等量生理盐水灌胃。实验期间观察记录体质量变化及动物活动情况。21d取血检查血常规。⑥溶血试验:取抗凝兔血8mL,加入生理盐水10mL,稀释备用。取脱细胞血管基质粉末,加生理盐水中,再加入稀释兔血离心后取上清测定545nm处的吸光度。阴性对照为生理盐水10mL加入稀释兔血;阳性对照为蒸馏水加入稀释兔血。溶血率=犤(试验材料的吸光度-阴性对照的吸光度)/(阳性对照的吸光度-阴性对照的吸光度)犦×100%。⑦凝血试验:血库健康献血员新鲜血浆,用自动血液凝固测定仪进行凝血酶原凝固试验、测定部分凝血活酶凝固时间、凝血酶凝固时间和纤维蛋白原。取血浆2mL加入脱细胞血管基质粉100mg,混合后再测定上述指标。结果:①酶-化学除垢剂能使犬总动脉细胞几乎完全脱落,使基质纤维的三维结构变得疏松。苏木精-伊红、胶原染色和弹力纤维染色显示脱细胞血管基质无细胞残留,主要成分为胶原和弹力纤维。②动物实验表明材料无急性、亚急性毒性。体外实验脱细胞血管基质的溶血率为1.6%,符合医用生物材料生物性能测试所提出的溶血率<5%标准。材料混合前后,血浆中凝血酶原凝固试验、部分凝血活酶时间、凝血酶凝固时间和纤维蛋白原4项指标检测结果无明显变化,说明材料不引起凝血功能的改变。③四甲基偶氮唑盐显示75%脱细胞血管基质浸提液培养平滑肌细胞1,3和5d后,细胞增殖率均大于95%,材料毒性为0或1级。结论:TritonX-100和胰蛋白酶制备的脱细胞基质具有良好的生物相容性,能与异体犬平滑肌细胞结合到一起,并在体外生成血管移植物。     

血管组织工程中单根主动脉培养的内皮细胞和平滑肌细胞形态学和生长增殖

目的:探索体外培养及扩增同一来源内皮细胞和平滑肌细胞的有效方法,为研究内皮细胞和平滑肌细胞相互关系和体外构建组织工程血管提供理论和实践基础。方法:在体外用酶消化法和组织块贴壁法分别建立内皮细胞和平滑肌细胞的原代,并应用胰蛋白酶和乙二胺四乙酸钠传代培养。应用光镜、透射电镜和细胞计数对内皮细胞和平附肌细胞的形态和增殖进行研究。结果:酶消化法和植块培养法可以有效的建立起内皮细胞和平滑肌细胞的原代。讨论:内皮细胞和平滑肌细胞作为血管构成的基本细胞,对于它们的形态学、体外培养和扩增以及相互关系的研究具有重要的意义。     

浅谈数字化手术室的应用

介绍了数字化手术室的概念和具体功能,分析了数字化手术室在安全的手术环境、医院系统集成、教学及学术交流等方面的应用,并从提升医疗安全和质量、提高工作效率、监控医疗过程、提高医院信息化管理水平等方面详细阐述了数字化手术室应用效果,指出了数字化手术室是医院数字化建设的重要组成部分,为医院带来直接的经济效益和社会效益,提高了医院的核心竞争力,是医院数字化的必然趋势。     

COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭营养支持疗效观察

目的探讨肠内联合肠外营养支持治疗对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭的疗效。方法 98例COPD合并2型呼吸衰竭随机分为营养组与对照组,两组患者给予相同的抗感染及对症治疗。营养组给予针对性的饮食指导,每日静点脂肪乳及氨基酸,对照组给予自由饮食。结果营养组治疗后与对照组治疗后各项指标比较有明显改善(P<0.05)。结论肠内联合肠外营养支持治疗可明显改善COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭的肺功能及血气分析。     

内蒙古地区蒙古族、汉族的急性胸痛患者早期危险因素的识别研究

目的通过建立急诊胸痛单元,对内蒙古地区蒙古族和汉族人群的急性胸痛患者早期识别,早期诊断高危胸痛和排除中低危胸痛患者,规范急性胸痛诊疗流程。方法急诊胸痛单元每周开诊3 d,时间随机确定,其余时间由急诊科按常规流程对胸痛患者进行诊疗,由研究者对蒙古族、汉族的急性胸痛患者的民族、危险因素和诊疗时间进行注册登记。结果 2011年1月至2003年12月因急性非创伤性胸痛就诊急诊科的蒙、汉族患者共645例,经急诊胸痛单元诊治的诊疗时间较非胸痛中心诊治时间均有所缩短(P<001、P<0.05、P<0.05),蒙古族患者体重指数、血脂水平、饮酒、糖尿病、高血压和汉族有一定差异(P<005)。结论内蒙古地区蒙古族和汉族急性胸痛患者的早期危险因素有一定差异,而急诊胸痛单元的建立对蒙古族高危胸痛的患者早期正确诊断、规范诊疗流程、改善高危胸痛患者的预后有重要作用。     

软骨微粒脱细胞基质微载体的制备及其特性研究

目的：制备以软骨微粒脱细胞基质为原料的微载体，为体外大量培养软骨细胞提供实验依据。方法：利用胰蛋白酶等试剂制备直径为0．100∽0．154mm的软骨微粒脱细胞基质并寻找胰蛋白酶的最佳含量及时间。取绵羊的新鲜膝、肘关节软骨600g，随机分为5组，每组8例，用不同含量的胰蛋白酶作用2∽36h。标本进行大体观察，苏木精-伊红、胶原染色，光镜及扫描电镜观察，密度、含水量测定。结果：微粒软骨脱细胞基质微载体无抗原性成分存在，主要含有胶原，氨基葡聚糖等混合细胞外基质成分。微粒呈不规则形，表面粗糙。软骨微粒脱细胞基质干重密度为0．6547g／mL，湿重密度为1.0627g／mL，含水量为72％。胰蛋白酶的最佳含量为0．25g／L，最适作用时间为(18．3&;#177;1．6)h。结论：以软骨微粒为原料的微载体具有天然细胞外基质成分，是一种体外培养软骨细胞的良好载体。     

血清镁离子与慢性阻塞性肺疾病急性加重次数及生活质量的相关性分析

目的探讨血清镁离子(Mg2+)与慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)次数及生活质量的相关性。方法前瞻性选取2016年1～12月因AECOPD而住院的病人117例,对所有病人行血常规、全血生化、动脉血气分析、肺功能及COPD评估测试(CAT)问卷检测。病人随访1年,统计其AECOPD次数及1年后CAT评分,分析血清Mg2+水平与AECOPD次数及病人生活质量的相关性。结果病人1年内平均加重次数为100(025,100)次,频繁急性加重(AECOPD2次年)病人的(091±007)mmol水平与AECOPD次数及1年后CAT评分呈负相关(r=-0828、-0737,P0001)。Logistic回归分析显示,初次就341, 95%CI:0121～0683)是AECOPD的主要影响因素。结论血清Mg2+与AECOPD次数及病人生活质量明显相关,是预测AECOPD及评价其生活质量的良好指标。     

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响

目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0...