中国农村医疗卫生状况调查系列报道（二）：乡村医生难以满足农民就医需要

在所调查的100多个行政村中，平均每个行政村有医疗诊所2．3个左右，在这些医疗机构中，80％以上为各种形式的私营经营诊所，可以说，私人诊所是农村医疗服务的主要供给者。     

帕金森病相关蛋白α-共核蛋白的可溶性表达、纯化及抗体制备

目的 利用分子克隆接术在愿核细胞中表达α-共核蛋白（SNCP），并制备免多克隆抗体。方法 从人神母经细胞SH-SY5Y细胞中提取总RNA，逆转录成cDNA。利用PCR技术扩增获得SNCP的cDNA序列，测序正确后克隆至pQE-30-GST表达载体上，在大肠埃希菌中表达GST-SNCP融合蛋白。融合蛋白纯化后免疫新西兰大白兔，制备特异性抗血清，并对该抗体进行检测。结果 琼脂糖凝胶电泳显示获得SNCP cD-NA序列为420bp。SDS-PAGE和Western blot分析，表达的融合蛋白呈可溶性，相对分子质量约为45000。以其为抗原制备的SNCP抗血清的ELISA效价达到1：32000，并且该抗体可与BALB/c小鼠脑组织中内源性SNCP发生特异性反应。结论 人SNCP可在原核细胞中可溶性表达。用表达的蛋白制备获得特异性较好的SNCP抗血清，为进一步了解SCNP的结构和功能以及在中枢神经系统退行性疾病的作用提供了必要的实验基础。     

急性三氯乙醛中毒4例报告

报告4名工人佩带自制的长管面具轮流下罐清理三氯乙醛残渣,下午又进行同样工作。平均每人下罐2—5h。有2人当日上午发病,余2人下午发病。主要表现咳嗽、气短、胸闷,其中3例吐白色泡沫样痰。查体见:呈喘息状态,心率快,两肺有哮鸣音和水泡音,血常规及肝功能化验正常,     

那个被叫作豆腐渣的女孩

<正>豆腐渣原名单丽花,豆腐渣这个绰号是上初中时我们历史老师的发明。豆腐渣是个与众不同的女孩子。过了这么多年,我仍旧记得她浓妆艳抹的样子。她穿着红色的外套,唇彩涂得比外套还要红,好像刚生吃了什么小动物一样。脸上很不均匀地扑着粉,看得见汗滑过的痕     

重组MHCⅠ类分子K^b-EGFP分子的构建及表达

目的 构建绿色荧光蛋白标记的MHCⅠ类分子K^b(K^b-EGFP融合蛋白)，并在哺乳动物细胞中获得功能性表达。方法 RT-PCR的方法获得小鼠MHCⅠ类分子K^b cDNA，克隆入真核表达载体pEGFP-N1中EGFP分子的上游，脂质体转染COS-7细胞，G418加压筛选获得抗性重组细胞。荧光显微镜下观测重组分子的表达及胞内定位情况。结果 分子克隆的方法获得了预期的重组质粒，质粒经DNA序列测定证实阅读框无误，转染COS-7细胞后的抗性克隆胞浆内可以观察到明亮的绿色荧光，特征性地分布于细胞质膜，及核周、膜下的囊泡结构中。结论 所构建的K^b-EGFP融合蛋白在细胞内表达后具有MHCⅠ类分子的特征性分布，提示该重组分子具有野生型MHCⅠ类分子的生物学特性和胞内分布特征，为进一步深入研究MHCⅠ类分子胞内动态分布及分子功能提供了良好的细胞和分子模型。     

一种朊蛋白错误折叠循环扩增方法的建立

目的建立一种类似于PCR的蛋白质扩增方法-蛋白错误折叠循环扩增技术(PMCA),用于朊病毒病脑组织中PrPSc的检测。方法将不同浓度的羊瘙痒因子263K毒株原液与正常仓鼠脑组织匀浆混合,经反复孵育/超声,共10~15个循环。WesternBlot检测扩增产物中蛋白酶K抗性PrPSc信号。结果在本研究试验体系下,263K毒株可以利用仓鼠脑组织为基质在体外迅速复制。所建立的PrPSc-PMCA技术可检测到10-5稀释的毒株原液中的PrPSc。与常规的脑组织免疫印记方法相比,敏感度提高了105~106倍。研究还显示PrPSc还可利用小脑和脑干为基质进行体外扩增复制。结论成功建立了PrPSc-PMCA技术,为朊病毒病的早期诊断和朊病毒生物学特性的研究提供了一种新的手段。     

不同剂量羊瘙痒因子263K颅内感染仓鼠临床终末期脑中GFAP表达的研究

目的 研究不同剂量羊瘙痒因子263 K经颅内注射感染仓鼠后,在发病的终末期星形胶质细胞增生程度是否与注射剂量及潜伏期长短有关.方法 以胶质纤维酸性蛋白(glial fibrill aryacidic protein,GFAP)作为星形胶质细胞增生的分子标志物,采用Western Blot和免疫组化方法检测感染仓鼠终末期脑匀浆和脑组织病理切片中的GFAP表达,经定量分析比较各感染剂量组间是否存在差异.结果与正常对照相比,不同剂量感染仓鼠发病终末期脑组织GFAP阳性细胞数量和总GFAP含量均明显升高,但各感染剂量组间无显著差异.结论 不同感染剂量羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠在发病终末期脑中星形胶质细胞的增生程度相似,与感染剂量及潜伏期无关联性.     

痢疾杆菌R质粒的检测、消除及药物敏感试验

目的：探讨得疾杆菌的耐药性。方法：采用Ｋ－Ｂ法测定痢疾杆菌的耐药谱,对耐药菌株进行Ｒ闰的检测及接合传递人工诱导痢疾杆功秋稳定Ｌ型,观察Ｒ质粒丢失情况。结果：４５株痢疾杆菌４４经,耐药率９７．８％,其中三重耐药菌株占９３．２％,四重以上耐药菌株占７３．３％。８８．９％（４０／４５）的菌株检测出Ｒ质粒,质粒的接合传递率为６１．４％。痢疾杆菌Ｌ型未见质粒丢失。结论：痢疾杆菌的耐药性十分严重,自由质粒控制     

免疫学测定在细菌L型败血症诊断中的意义

目的 :探讨红细胞补体受体 1(ECR1)花结率、红细胞免疫复合物 (EIC)花结率、金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )抗体及红细胞沉降率 (ESR)测定在细菌L型败血症诊断中的意义。方法 :按郭峰改良法测定ECR1和EIC花结率 ,试管凝集法测定金葡菌抗体 ,常规法测定ESR。结果 :临床及细菌学诊断为细菌L型败血症患者组的ECR1花结率 (11.1± 7.89) %较健康对照组低 (P <0 .0 0 1) ;EIC花结率 (10 .98± 4.99) %较健康对照组高 (P <0 .0 5 ) ;金葡菌抗体 (lg 2 .4± 0 .2 )较健康对照组增高 (P <0 .0 0 1) ;ESR(33.0 9± 2 .92 )mm/ 6 0min较健康对照组快 (P <0 .0 0 1)。结论 :ECR1花结率、EIC花结率、金葡菌抗体及ESR的指标可辅助快速诊断细菌L型败血症。     

染料木素对前列腺癌细胞恶性增殖的抑制作用

目的研究染料木素（Gen）对人前列腺癌细胞（PC-3）的影响。方法将PC-3细胞在DMEF-12培养液（含10％胎牛血清）中采用开放式单层贴壁培养，采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）比色法、细胞核分裂指数、集落形成和^3H-TdR掺入试验方法进行检测。染料木素剂量设为10，20，40，80μmol／L。以二甲基亚砜（DMSO）为溶剂对照。结果不同剂量的染料木素对PC-3细胞的生长增殖有不同的抑制作用。在MTT试验中，不同浓度染料木素对PC-3细胞的7d抑制率分别为27．7％，58．8％，72．3％，84．4％。在核分裂指数试验中，随着染料木素剂量的增高，其核分裂指数明显降低；遮集落形成试验中，随着染料木素剂量的增加，集落形成抑制作用增加；在^3H-TdR掺入试验中，可见随着染料木素剂量的增高，^3H-TdR掺入到PC-3细胞中明显的减少，与阴性对照组比较差异有统计学意义。结论染料木素对PC-3细胞的生长增殖有明显抑制作用，可能是染料木素抑制前列腺癌的机制之一。